张仑
- 作品数：6 被引量：55H指数：3
- 供职机构：重庆大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 柑桔溃疡病菌滚环扩增检测体系的建立被引量：25
- 2008年
- 根据柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac)独有的蛋白基因序列和锁式探针公共连接序列分别设计特异性的锁式探针及其扩增引物,优化系列反应条件,建立了特异性的柑桔溃疡病菌滚环扩增体系。初步检测结果表明该体系能够特异性地检出Xac的菌体细胞及其DNA,而检测不出供试的其它植物病原细菌和柑桔叶面常见的多种附生细菌;对Xac靶片段克隆质粒DNA的检测灵敏度为102copy/μL,对Xac菌悬液的检测灵敏度为20cfu/μL,比常规PCR的检测灵敏度稍高。用滚环扩增技术和常规PCR技术对田间采集的实际样品进行了检测,两种方法的检测结果没有显著差异(P>0.01)。由于锁式探针的公共连接序列对扩增的条件要求一致,本体系的建立可以为植物病原微生物多靶标检测和病害检疫检验提供新的技术支撑。
- 黄冠军殷幼平张仑李小焦葛建军陈洪俊王中康
- 关键词：柑桔溃疡病菌锁式探针滚环扩增
- 环介导等温扩增技术的研究进展被引量：17
- 2009年
- 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是利用2对特殊设计的引物和一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件下特异、高效地扩增DNA的新技术,扩增产物为一系列反向重复的靶序列构成的茎环结构和多环花椰菜样结构的DNA片段混合物,电泳图谱呈阶梯式带状分布,反应伴有白色的副产物焦磷酸镁沉淀产生,可通过肉眼定性判断反应结果。LAMP技术已在核酸的科学研究、疾病诊断和动物胚胎性别的鉴定等领域得到了广泛的应用。从LAMP技术的原理、引物组成及反应过程、技术特点、方法延伸和应用等方面对其进行了概述,以期为同类研究提供参考。
- 张仑殷幼平王中康
- 关键词：环介导等温扩增检验检疫
- 应用环介导等温扩增技术快速检测柑橘溃疡病菌
- 柑桔溃疡病(CBCD)是严重危害世界柑桔种植业的一种细菌性病害，其病原物为地毯草黄单胞杆菌柑桔致病变种Xanthomonas axonopodis pv.citri(Xac)。CBCD广泛发生在世界各主要柑桔产区，包括亚...
- 张仑
- 关键词：柑橘病害柑桔溃疡病微生物鉴定
- 柑橘上两种重要细菌性病害的纳米磁珠分离检测体系的建立及黄龙病侵染柑橘的转录组研究
- 柑橘溃疡病菌（Xanthomonas citrisubsp.citri）和柑橘黄龙病菌（Candidatus Liberibacter）是柑橘上两种重要的植物检疫性细菌病害，严重影响了柑橘的种植、生产以及贸易。由于缺乏有...
- 张仑
- 关键词：柑橘溃疡病菌病菌侵染
- 柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法的建立被引量：11
- 2013年
- 建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP和快速LAMP检测方法,使其能应用于基层检验检疫部门对病害的快速检测。利用柑橘溃疡病菌基因组特有的保守区域设计LAMP引物,通过优化反应条件,建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP检测体系;在普通LAMP引物的基础上设计一对环引物,建立柑橘溃疡病菌的快速LAMP检测体系,并以多种参比菌DNA以及健康柑橘叶片基因组DNA为模板对普通LAMP和快速LAMP检测体系的特异性进行了验证,利用柑橘溃疡病菌菌液和DNA溶液梯度稀释液对普通LAMP和快速LAMP检测体系的灵敏度进行了验证。普通LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25×104cfu和2.03×10-1 ng,快速LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25cfu和2.03×10-5 ng。在特异性测试中,普通LAMP检测体系与快速LAMP检测体系均仅对柑橘溃疡病菌进行扩增,对非靶标菌和柑橘叶片基因组DNA不产生扩增,普通LAMP与快速LAMP检测体系特异性测试结果一致。快速LAMP检测体系在0.5h内就可以达到普通LAMP检测体系的扩增量,是普通LAMP检测体系反应时间的一半,大大提高了检测的效率;快速LAMP检测体系菌悬液和DNA检测灵敏度均比普通LAMP检测体系提高了10 000倍。成功地建立了柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法,为柑橘溃疡病菌的检测提供了一种新的简便、快速的检测手段。
- 张仑殷幼平吴瑜佳王中康
- 关键词：柑橘溃疡病菌环介导等温扩增LAMP检疫
