吴瑜佳
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 供职机构：重庆大学生物医学工程联合学院基因工程研究中心更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 胶体金速测卡研制及柑橘溃疡病菌快速诊断
- 柑橘溃疡病(Citrus bacterial canker disease，CBCD)是一种由柑橘黄单胞菌(Xanthomonas citri pv.citri,Xcc)所引起的，危害全世界柑橘种植业最严重的检疫性细菌病...
- 吴瑜佳
- 关键词：柑橘溃疡病菌
- 文献传递
- 柑橘溃疡病的发生及其综合防控被引量：4
- 2011年
- 柑橘溃疡病是一种为害全世界柑橘种植业最严重的细菌性病害[1],并列入国内外检疫性病害。该病主要分布于亚洲、非洲、美洲、大洋洲及马来群岛的一些国家和地区。
- 陈渝吴瑜佳刘洪董鹏
- 关键词：柑橘溃疡病细菌性病害检疫性病害马来群岛种植业
- 抗柑橘溃疡病菌三结构域稳定性重组抗体(sc-dsFv)的研制与原核表达
- 以鼠源抗柑橘溃疡病表面脂多糖的二硫键稳定性抗体dsFv为模板,利用重叠延伸PCR在重链可变区VH和轻链可变区VL之间引入一条人类抗体重链恒定区1(CH1)5’端12个氨基酸的序列作为连接肽,成功构建了单链二硫键稳定重组抗...
- 李蒙殷幼平于红吴瑜佳王中康
- 关键词：柑桔溃疡病菌复性BIACORE
- 文献传递
- 柑橘溃疡病菌快速诊断胶体金速测卡的研制被引量：2
- 2012年
- 将制备并提纯的抗Xcc单克隆抗体、多克隆抗体及重组抗体,采用间接ELISA方法对比其效价和特异性,筛选用于胶体金速测卡的最优抗体;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗Xcc单抗Xcc-2D8,固定于金标垫上;利用双抗夹心原理,将单抗Xcc-2D6和羊抗鼠抗体分别固定于硝酸纤维素膜上,作为检测线(T线)和质控线(C线),经试验条件优化,组装胶体金速测卡密封干燥保存。对Xcc菌悬液及柑橘样本浸泡液进行检查。结果表明ELISA方法筛选出2株特异性强、稳定性好的抗体(Xcc-2D8效价为1:128 000倍、Xcc-2D6效价为1:256 000倍),应用于胶体金速测卡的研发;所研制速测卡对Xcc菌悬液的最低检测下限为1×103～1×104 cfu/mL,对多个地区的206份柑橘样本进行实际检测所得结果与qPCR方法所得结果具有较高一致性(kappa值=95.15%),混杂的柑橘组织液对检测结果无影响,检测时间控制在10min以内,检测常见细菌及植物病菌显示特异性良好,各批次速测卡无批间差异,速测卡保存方便稳定性良好。
- 殷幼平吴瑜佳于红李蒙王中康
- 关键词：胶体金单克隆抗体免疫层析
- 柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法的建立被引量：11
- 2013年
- 建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP和快速LAMP检测方法,使其能应用于基层检验检疫部门对病害的快速检测。利用柑橘溃疡病菌基因组特有的保守区域设计LAMP引物,通过优化反应条件,建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP检测体系;在普通LAMP引物的基础上设计一对环引物,建立柑橘溃疡病菌的快速LAMP检测体系,并以多种参比菌DNA以及健康柑橘叶片基因组DNA为模板对普通LAMP和快速LAMP检测体系的特异性进行了验证,利用柑橘溃疡病菌菌液和DNA溶液梯度稀释液对普通LAMP和快速LAMP检测体系的灵敏度进行了验证。普通LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25×104cfu和2.03×10-1 ng,快速LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25cfu和2.03×10-5 ng。在特异性测试中,普通LAMP检测体系与快速LAMP检测体系均仅对柑橘溃疡病菌进行扩增,对非靶标菌和柑橘叶片基因组DNA不产生扩增,普通LAMP与快速LAMP检测体系特异性测试结果一致。快速LAMP检测体系在0.5h内就可以达到普通LAMP检测体系的扩增量,是普通LAMP检测体系反应时间的一半,大大提高了检测的效率;快速LAMP检测体系菌悬液和DNA检测灵敏度均比普通LAMP检测体系提高了10 000倍。成功地建立了柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法,为柑橘溃疡病菌的检测提供了一种新的简便、快速的检测手段。
- 张仑殷幼平吴瑜佳王中康
- 关键词：柑橘溃疡病菌环介导等温扩增LAMP检疫
