张思
- 作品数：7 被引量：14H指数：3
- 供职机构：兰州大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶的生物信息学分析及其表达与活性检测被引量：4
- 2014年
- 目的利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶(EgFBPA)的结构和功能特征,并利用基因工程技术进行克隆、表达、纯化,获得活性蛋白。方法利用多种生物信息学软件分析EgFBPA的拓扑结构、生物学以及免疫功能特征;用限制性内切酶EcoRⅠ和HandⅢ对重组质粒FBPA/P-blue酶切FBPA目的基因片段,亚克隆入表达载体pET30a,筛选重组克隆并测序,将测序正确的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细菌,用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白;用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,并建立酶反应体系,通过NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的变化测定重组蛋白EgFBPA的酶催化活性。结果 EgFBPA基因全长1 092bp,编码363个氨基酸,软件分析其等电点(pI)为8.34,分子质量单位为39.8035ku。亚细胞定位分析该蛋白为无信号肽的细胞质蛋白,属于稳定蛋白;结构域和保守功能域的预测,FBPAI的激活位点为VYLEGTLLKPN(222aa-232aa),并含有TIMβ/α筒状结构(6aa-346aa),二级结构以α-螺旋和环状结构居多,无跨膜区,有10种类型的活性位点。经PCR、双酶切和测序证实pET30a(+)-EgFBPA构建成功。SDS-PAGE检测重组质粒表达产物分子质量与预期相符,且具有可溶性;Bradford法测定蛋白浓度为(0.50±0.02)mg/ml。酶活性检测Ni-NTA柱纯化后的FBPA具有良好的酶促活性,且存在量效关系。结论生物信息学预测EgFBPA可能是潜在的药物靶点。重组质粒Pet30a(+)-FBPA在大肠埃希菌BL21中成功表达,表达产物具有酶促活性,为进一步研究其生物学功能及药物靶点奠定了基础。
- 王绚吴巨龙吕刚苏娟辛奇鲁俊张思王猛孙萃平逯召莲何黎黎景涛
- 关键词：细粒棘球绦虫蛋白纯化分子克隆生物信息学
- 青蒿素对秀丽隐杆线虫寿命和生殖的影响被引量：4
- 2013年
- 目的用不同浓度青蒿素处理秀丽隐杆线虫,观察秀丽隐杆线虫的生存周期、繁殖及相关基因的变化,探讨青蒿素影响秀丽隐杆线虫生殖的机理。方法用不同浓度青蒿素处理线虫,在体视显微镜下观察线虫的存活天数以及产卵情况。提取各组线虫RNA,反转录成cDNA后进行实时荧光定量PCR,比较sec-23、lin-29、ung-1表达的差异性。结果 3、4和5mmol/L青蒿素组线虫和正常对照组的平均生存天数分别为3.65、3.25、2.65和4.3d,差异有统计学意义(t=0.021,P<0.05);3、4和5mmol/L青蒿素组线虫均未产卵或后代出现;5mmol/L青蒿素组线虫sec-23表达下调,lin-29与ung-1表达均上调。结论青蒿素能缩短秀丽隐杆线虫的寿命,抑制其生殖能力,作用机理可能与sec-23、lin-29和ung-1的调控有关。
- 张思逯召莲包根书韩俭张艳刘欣景涛陈根
- 关键词：青蒿素秀丽隐杆线虫荧光定量PCR生殖
- 5-氟尿嘧啶对秀丽隐杆线虫生殖作用的影响及数字基因表达谱的变化
- 目的本论文通过不同浓度5-氟尿嘧啶作用秀丽隐杆线虫,观察秀丽隐杆线虫的繁殖能力的变化及其相关基因的表达变化,探讨5-氟尿嘧啶影响秀丽隐杆线虫生殖的原理以及5-氟尿嘧啶的作用机理。 方法将不同浓度5-氟尿嘧啶处理秀丽隐杆线...
- 张思
- 关键词：秀丽隐杆线虫5-氟尿嘧啶
- 文献传递
- 5-氟尿嘧啶对秀丽隐杆线虫生殖作用的影响及数字基因表达谱的变化
- 目的 本论文通过不同浓度5-氟尿嘧啶作用秀丽隐杆线虫,观察秀丽隐杆线虫的繁殖能力的变化及其相关基因的表达变化,探讨5-氟尿嘧啶影响秀丽隐杆线虫生殖的原理以及5-氟尿嘧啶的作用机理.方法 将不同浓度5-氟尿嘧啶处理秀丽隐杆...
- 张思逯召莲陈根
- 关键词：秀丽隐杆线虫5-氟尿嘧啶
- 兰州市慢性病患者隐孢子虫和溶组织阿米巴感染流行病学调查结果分析
- 2013年
- 目的了解兰州市慢性病(主要为高血压、糖尿病和恶性肿瘤)人群隐孢子虫和溶组织阿米巴的感染状况。方法在兰州市收集高血压、糖尿病、恶性肿瘤及非慢性病患者等的粪便,分别采用改良抗酸染色法和碘染色法,检测粪便中的隐孢子虫卵囊和溶组织阿米巴包囊。结果在600例粪便中,隐孢子虫和溶组织阿米巴感染率分别为4.17%和4.50%,感染率差异无统计学意义(χ2=0.080,P>0.05);男性感染率分别为4.67%和4.33%,女性感染率分别为3.67%和3.00%;<10岁者隐孢子虫和溶组织阿米巴的感染率最高,分别为6.00%和7.00%;糖尿病和恶性肿瘤组隐孢子虫的感染率分别为7.00%和10.00%,与对照组比较差异有统计学意义(χ2=4.178,7.639;P<0.05);糖尿病和恶性肿瘤组溶组织内阿米巴的感染率分别为9.00%和8.33%,与对照组比较差异有统计学意义(χ2=6.866,4.108;P<0.05)。结论兰州市隐孢子虫和溶组织阿米巴儿童和慢性病患者人群感染率较高,可能与该人群健康状况、免疫力和卫生习惯等密切相关。
- 王雁南董甜甜王爱秀党文逯召莲张思陈根
- 关键词：隐孢子虫慢性病腹泻
- 安徽省当涂县农村留守群体电视收视及其影响研究
- 随着我国经济的进步与城镇化的推进,留守群体日渐庞大,逐步成为引起社会众多关注的焦点群体。大众媒介现今不断发展进步,与庞大的留守群体关系也非常密切。其中,电视媒介与农村留守群体生活最为密切,影响显著。目前学界关于这方面的研...
- 张思
- 关键词：电视媒介
- 文献传递
- 1994～2010年我国人狂蝇蛆病134例分析与体会被引量：5
- 2011年
- 本文介绍了我国人体狂蝇科幼虫寄生引起的蝇蛆病,简述了1994～2010年间该病患者的特点、地区分布和发病季节等,分析了各种因素与该病形成的关系,提出了该病的诊断要点。
- 张思包根书
