张敬宇
- 作品数：11 被引量：13H指数：2
- 供职机构：苏州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ELISA法vWF-FⅧ结合试验的建立及其临床应用被引量：1
- 2000年
- 张敬宇王迎春张威阮长耿
- 关键词：血友病VWDELISA
- 中国汉族人群vWF基因G2805A多态性研究被引量：1
- 1999年
- 为研究中国汉族人群vWF基因G2805A多态性特点,应用PCR-DGGE技术结合Nla Ⅳ酶切分析,研究了60名中国汉族人120条染色体vWF基因G2805A的等位基因发生频率及杂合情况,并对28例DGGE电泳行为异常中的4例进行了DNA序列分析。结果发现,在中国汉族人群中存在vWF基因G2805A多态性,其等位基因发生频率分别为0.73(G)和0.23(A),理论杂合率为0.39,实际杂合率为0.40。这表明vWF基因G2805A多态性在中国汉族人群中具有较高的理论杂合率,可用于血管性血友病的遗传咨询和产前诊断。
- 张敬宇王迎春万海英程大卫阮长耿
- 关键词：多态性变性梯度凝胶电泳限制性片段长度多态性DNA测序
- 2A型血管性血友病vWF的基因突变
- 2000年
- 目的 研究中国人 2 A型血管性血友病 (von Willebrand disease,v WD)的分子病理机理 ,了解 v WD的临床表现型和基因型的相关性。方法 对 12 6例先天性出血性疾病患者进行了出血时间、v WF∶Ag、F ∶CAg、瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集率的检测和 v WF的血浆多聚物分析。对 2 A型血管性血友病的患者用多聚酶链反应、变性梯度凝胶电泳 ,结合测序的方法进行了基因突变的研究。结果 确诊 2 A型血管性血友病 14例 ,在 3个家系发现了 4例 v WF的基因突变 ,它们是 Arg6 11His、Ala737Glu、Arg834 Trp,其中 Ala737Glu是 1例新的基因突变。结论 2 A型 v WD的基因突变存在高度的异质性 ,对其分子病理机理的研究有助于了解 v WF的基因结构和功能的关系。
- 王迎春张敬宇张威程大卫万海英阮长耿
- 关键词：VWF基因PCR基因突变
- 血管性血友病及其相关基因研究
- 2001年
- 血管性血友病(von Willebrand Disease,vWD)是最常见的遗传性出血性疾病之一,发病率(5～10)/10万人口,最高达1%,是由于血浆中vWF因子质或量异常的疾病.vWF在初期止血过程中起着重要的作用.vWF既是血小板膜糖蛋白GpIb/Ⅸ复合物的受体,介导血小板粘附于受损的血管内皮组织,又是血浆中FVⅢ的载体,起着稳定FVⅢ,延长其半衰期的作用.vWD是一组高度异质性的遗传性疾病.利用我国人口众多,vWD的病人来源丰富的优势,提出适合我国的vWD患者正确的诊断和分型的方法,具有重要的临床意义.用分子生物学的手段对中国vWD患者进行分子生物学的研究,有助于了解中国vWD的分子病因,从而进一步证明vWF基因结构和功能的关系.该项研究的开展具有重要的理论意义.
- 阮长耿王迎春李震宇顾建明张敬宇张威
- 关键词：血管性血友病血浆分子病理VWF
- 血管性血友病及其相关基因的研究
- 阮长耿李震宇王迎春顾建明张敬宇万海英王泳张威
- 该研究提出了适合VWD的诊断和分型的方法，对2N型、2A型和部分3型VWD用变性梯度凝胶电泳和DNA测序的方法进行了分子病理机制的研究，该研究有助于了解VWF结构和功能的关系及中国人VWD的分子病理机制。对VWF基因空复...
- 关键词：
- 关键词：血友病相关基因
- 2N型血管性血友病家系的基因诊断和遗传连锁分析
- 2000年
- 王迎春顾建明万海英张敬宇程大卫张威阮长耿
- 关键词：血友病基因诊断
- 2A型血管性血友病vWF基因Ala737→Glu的突变被引量：6
- 1999年
- 目的阐明２Ａ型血管性血友病（ｖＷＤ）临床表现型与基因型的相关性。方法研究来自同一家系的２例患者，他们具有初期止血障碍的出血特点，ｖＷＦ∶Ａｇ和ＦⅧ∶ＣＡｇ减少，瑞斯托霉素诱导的血小板聚集明显降低，大、中多聚物分子消失，临床表型符合２Ａ型血管性血友病。用聚合酶链反应方法扩增患者的ｖＷＦ基因的２８号外显子，并用特异性内切酶的方法获得真基因，变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）筛选突变基因，对电泳行为异常的片段进行测序。结果该２Ａ型ｖＷＤ家系ｖＷＦ基因的４３７０～４５９０区域ＤＧＧＥ有明显减慢的条带。ＤＮＡ序列测定，表明在ｖＷＦ基因４４９９位Ｃ→Ａ致ｖＷＦ蛋白Ａ２区域Ａｌａ７３７→Ｇｌｕ。结论该突变有助于研究ｖＷＦ蛋白功能域的精细功能及ｖＷＤ表型与基因型的相关性。
- 王迎春张敬宇万海英施纪文李震宇阮长耿
- 关键词：血友病血管性血友病VWF基因点突变PCR
- SZ-51单链抗体与金属硫蛋白的融合基因构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1999年
- 近年来，对活化血小板膜糖蛋白１４０（ＧＭＰ１４０）的单抗ＳＺ５１进行了系列基因工程抗体的研究，首先克隆出抗体的可变区基因［１］，从而获得了系列基因组抗体［２］，使鼠源性抗体对人体的免疫原性大大降低。我们利用金属硫蛋白（ＭＴ）的低相对分子质量（６０...
- 万海英夏晓波张敬宇王斌刘征辉顾津明王迎春阮长耿
- 关键词：大肠杆菌SZ-51单链抗体金属硫蛋白基因构建
- 2A型血管性血友病的临床诊断被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨 2A型血管性血友病的临床特征和诊断方法。方法 用出血时间 (BT)、血浆凝血酶原时间(PT)、全血凝固时间 (CT)、活化的部分凝血活酶时间 (APTT)、vWF :Ag、FⅧ :C、FⅧC :Ag、瑞斯脱霉素诱导的血小板凝集试验和血浆多聚物分析 ,对 12 6例有先天性出血倾向的患者进行了研究。结果 确诊为 2A型血管性血友病 14例。皆有初期止血障碍的出血特点 ,表现为BT延长 ,PT、CT正常 ,APTT轻度延长 ,vWF :Ag下降 ,FⅧ :C、FⅧC :Ag轻度下降 ,瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集明显降低。血浆中缺乏大中分子量的多聚物。 结论 BT、CT、PT、APTT、vWF :Ag、FⅧ :C、瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验可作为血管性血友病的初筛试验 。
- 王迎春张威程大卫张敬宇阮长耿
- 血管性血友病因子Ala737→Glu突变体的构建和表达被引量：2
- 2000年
- 目的 研究血管性血友病因子 (vWF)Ala737→Glu突变对vWF功能的影响 ,分析vWFAla737→Glu突变致 2A型血管性血友病 (vWD)的分子病理机制。方法 用聚合酶链反应 (PCR)的方法对野生型的vWF全长表达质粒 (pSVvWF)进行体外定点诱变 ,在COS 7细胞中进行表达。分析其表达上清和细胞裂解液中的vWF∶Ag和上清的vWF的多聚物 ,观察患者血小板中的vWF多聚物及患者对DDAVP(糜凝 )的治疗反应。结果 vWFAla737→Glu的突变体上清vWF∶Ag是野生型的 76 .4% ,裂解液中vWF∶Ag是野生型的 98.8%。vWF突变体的多聚物形态和野生型相似 ,患者血小板中的vWF多聚物存在全部分子量的形式 ,糜凝治疗后vWF∶Ag明显升高。结论 vWFAla737→Glu的突变没有影响vWF的分泌和转运 ,vWFAla737→Glu突变致第Ⅱ类 2A型vWD。
- 王迎春张敬宇万海英张威阮长耿
- 关键词：血管性血友病VWF突变体基因表达
