公共文化服务平台

张春华: 作品数：15 被引量：29H指数：3; 供职机构：南京军区南京总医院更多>>; 发文基金：南京市科技发展计划项目江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学建筑科学电子电信更多>>

合作作者

人穿孔素真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：2: 2008年; 目的:观察克隆的人穿孔素(pfn)基因在COS-7细胞中的表达情况。方法:用PCR方法获取人pfn全长基因,将所获基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),转染COS-7细胞,RT-PCR检测pfn基因在COS-7细胞中的表达。结果:成功获得人pfn全长基因,并构建了真核表达载体。转染COS-7后,检测出pfn基因的表达。结论:人pfn全长基因可以在转染的COS-7细胞中表达。; 张春华李芳秋缪家文; 关键词：穿孔素真核表达

人颗粒溶素基因真核表达载体的构建及在肝癌细胞中表达的实验研究被引量：4: 2005年; 目的:构建人颗粒溶素(GNLY)全长编码序列的真核表达载体,转染肿瘤细胞,观察GNLY在细胞内的表达及其对细胞增殖的抑制作用。方法:用RT-PCR技术获取人GNLY全长编码序列cDNA,克隆至pGEM-T载体进行测序,再将克隆片段插入质粒pcDNA3.1(+)中,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/GNLY,用阳离子聚合物转染试剂转染肝癌细胞系SMMC-7721,检测目的基因mRNA的表达,W ST-8法检测细胞增殖活性。结果:获得人GNLY全长编码序列cDNA,并成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/GNLY;转染SMMC-7721细胞后,检测出目的基因mRNA的表达;重组质粒转染组与空质粒对照组细胞增殖活性有非常显著性差异(P<0.01和P<0.001),并且随着转染基因浓度的增加,细胞增殖活性逐渐降低,2.0μg/m l pcDNA3.1(+)/GNLY转染组细胞增殖活性下降至0.329。结论:pcDNA3.1(+)/GNLY真核表达载体构建成功,GNLY基因转染对SMMC-7721细胞能产生细胞毒性效应,对肝癌细胞具有一定的杀伤作用。; 缪家文李芳秋杨爱龙张春华; 关键词：颗粒溶素真核表达细胞抑制作用

放射诱导基因治疗肿瘤的研究进展被引量：2: 2005年; 近年来,放射诱导基因治疗已成为肿瘤治疗领域新的研究热点之一。该治疗策略一方面将放射治疗与基因治疗有机地结合,发挥协同治疗作用;另一方面由于放疗具有靶向性和可控性,实现了对杀伤基因表达的时空调控。相关的研究已经取得一定进展,作者简要概述目前的研究现状及该技术未来的应用前景。; 张春华李芳秋; 关键词：基因治疗

人精子蛋白17放射诱导表达细胞模型的构建: 目的：构建pEgr-Sp17重组质粒并检测其在人卵巢癌细胞系HO8910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达Sp17的细胞模型。方法：用双酶切、粘端连接的方...; 张春华李芳秋杨爱龙缪家文朱锡旭; 关键词：卵巢癌细胞模型精子蛋白17 基因调控免疫细胞化学; 文献传递

人精子蛋白17放射诱导表达细胞模型的构建被引量：3: 2007年; 目的:构建pEgr-Sp17重组质粒,并检测其在人卵巢癌细胞系HO8910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达人精子蛋白Sp17的细胞模型。方法:用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导特性的早期反应因子Egr-1和人Sp17基因的pEgr-Sp17重组质粒,利用脂质体介导其转染人HO8910细胞,用免疫细胞化学方法检测X线照射后被转染细胞中Sp17的表达。在确证Sp17能瞬时表达后,继续用含G418的RPMI1640培养基培养细胞,筛选稳定表达Sp17的细胞株。结果:测序结果和酶切鉴定均证实pEgr-Sp17重组质粒构建正确;免疫细胞化学试验表明pEgr-Sp17重组质粒转染的人HO8910细胞表达Sp17蛋白。结论:X线可诱导pEgr-Sp17重组质粒在人HO8910细胞中表达Sp17蛋白,构建了Sp17蛋白放射诱导表达的卵巢癌细胞模型。; 张春华李芳秋杨爱龙缪家文朱锡旭; 关键词：EGR-1启动子 X线

人精子蛋白17基因在大肠杆菌中的表达: 目的克隆人精子蛋白17（hSp17）基因,构建重组表达载体并表达重组蛋白。方法用RT-PCR法从人睾丸中克隆hSp17基因,构建重组表达质粒pET-28a（+）/hSp17,转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表...; 杨爱龙李芳秋张春华缪家文; 关键词：基因克隆基因表达; 文献传递

城市滨水空间景观研究——江苏历史古城护城河的保护与利用探讨: 对一些城市而言，滨水区是城市的核心，是城市特色形成的重要因素。护城河是江苏古城水系的特殊形态之一，随着工业化、城市化水平的提高面临新的选择。护城河作为城市景观资源、生态资源的充分挖掘有助于改善城市环境与强化城市的个性。关...; 张春华; 关键词：资源保护城市空间规划; 文献传递

hSp17真核表达载体构建及其在卵巢癌细胞中的表达: 2011年; 目的构建人精子蛋白17(hSp17)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/hSp17,为其临床应用奠定基础。方法用PCR方法获取hSp17基因片段,NheⅠ、KpnⅠ双酶切、粘端连接的方法构建含有hSp17基因的pcD-NA3.1(+)/hSp17真核表达载体。将该载体行脂质体介导转染卵巢癌细胞HO8910,免疫细胞化学方法检测转染细胞hSp17蛋白表达,G418筛选稳定表达hSp17蛋白的细胞株。结果酶切和测序结果均证实pcDNA3.1(+)/hSp17重组质粒的构建完全正确。免疫细胞化学方法证实外源性hSp17基因能够在卵巢癌HO8910细胞瞬时表达。经G418连续筛选,得到阳性克隆细胞株,并证实了外源性hSp17基因在卵巢癌HO8910细胞中稳定表达。结论成功构建了稳定表达外源性hSp17蛋白的卵巢癌细胞株;其可为卵巢癌的免疫治疗奠定基础。; 缪家文张海燕张春华李芳秋; 关键词：真核表达载体免疫细胞化学

不育患者血清精子蛋白17抗体的检测及临床意义被引量：3: 2007年; 目的:检测抗精子抗体(AsAb)阳性不育患者血清中抗精子蛋白17(Sp17)的抗体,探讨该抗体在免疫性不育血清学诊断和免疫避孕方面的潜在应用价值。方法:用重组人Sp17作为抗原,ELISA法检测62例AsAb阳性血清中Sp17抗体阳性率及滴度,分析AsAb中抗Sp17的含量。结果:AsAb阳性血清中Sp17抗体阳性率为56.5%,男女之间差异无显著性。Sp17抗体占AsAb的(10.09±7.45)%,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论:Sp17是重要的精子抗原组分,血清中Sp17抗体的检测可作为不育患者辅助诊断指标,同时也提示Sp17可能是一种免疫避孕候选抗原疫苗。; 张春华李芳秋杨爱龙孙伟缪家文; 关键词：精子蛋白17 抗体免疫性不育免疫避孕

肿瘤放射诱导基因治疗的研究进展: 近年来放射诱导基因治疗已成为肿瘤治疗领域新的研究热点之一。该治疗策略一方面将放疗与基因治疗有机结合,发挥协同治疗作用:另一方面,由于放射具有靶向性和可控性,实行了对杀伤基因表达的时空调控。相关的研究已经取得一定进展,本文...; 张春华李芳秋; 文献传递