李晖
- 作品数：10 被引量：45H指数：4
- 供职机构：上海交通大学药学院更多>>
- 发文基金：上海市教委科研基金上海市科学技术发展基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 葡萄糖对JAL1＊杂交瘤细胞生长代谢的影响
- 2002年
- 研究了不同浓度的葡萄糖对 JAL1杂交瘤细胞生长、乳酸及氨的生成等代谢过程的影响。在细胞培养箱中 ,批培养杂交瘤细胞 ,培养条件为 p H7.0～ 7.5 ,温度 3 7℃ ,5 % CO2 。结果表明 ,适宜于该株杂交瘤细胞生长的葡萄糖浓度为加入2～ 8g/L,所获得的单抗 OD4 0 5值均在 0 .6以上 ,葡萄糖浓度对乳酸。
- 陆苹赵冰李晖王国丰
- 关键词：葡萄糖杂交瘤细胞生长代谢传染性法氏囊病
- 鸡传染性法氏囊病病毒dsRNA的提纯与应用被引量：10
- 2002年
- 用传染性法氏囊病病毒 (IBDV)攻击 4周龄的非免疫鸡 ,以超速离心法从感染鸡法氏囊组织中分离、纯化IBDV ,应用蛋白酶K消化和Trizol(异硫氰酸胍 -酚 -氯仿法 )处理 2种方法从纯化的IBDV中抽提dsRNA。通过低熔点琼脂糖割胶 -酚 -氯仿抽提可获得纯化的dsRNA ,研究发现应用蛋白酶K消化获得的纯化RNA产量高 ,用其作模板进行RT -PCR可扩增IBDV基因组全长cDNAA片段和B片段、VP2基因和VP2 - 4 - 3基因。
- 孙建和陆苹赵渝李晖
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒DSRNA提纯
- 一步法扩增IBDV上海株全长基因组cDNA被引量：2
- 2002年
- 为了研究鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)上海株的全部核苷酸序列 ,应用蛋白酶K消化、割胶纯化获得了高纯度的dsRNA ,应用随机引物合成了cDNA的第一链。参照基因库中相关IBDV毒株的基因序列 ,设计合成了两对引物 ,一步扩增出IBDV上海株全长基因组cDNA的A片段和B片段。为了验证获得的A片段和B片段的正确性 ,以扩增出的A片段为模板 ,成功扩增出IBDV的VP2 基因 ,并应用T载体进行了克隆和测序 ,测序结果显示 ,其与国内外数株IBDV毒株的同源性很高 ,表明本文建立的扩增IBDV全长基因组cDNA的一步法正确。
- 孙建和陆苹赵渝李晖
- 关键词：传染性法氏囊病病毒CDNAVP2基因基因克隆
- 鸡传染性法氏囊病上海超强毒株NH99的分离与鉴定被引量：20
- 2002年
- 通过对上海近郊某鸡场数群 10日龄左右的病鸡的临床症状、病理变化、病毒分离、纯化、动物回归、血清学检测及病毒核酸纯化、VP2基因序列的测定与分析 ,确认上海地区以发病日龄早 ,发病率、死亡率高为特征的鸡传染病为超强毒型鸡传染性法氏囊病 ,病原具有鸡传染性法氏囊病病毒超强毒 (vvIBDV)的分子特征 ,为vvIBDV。
- 孙建和陆苹李晖赵渝
- 关键词：鸡传染性法氏囊病
- 特异性抗IBDV单链抗体基因的构建及序列分析
- 2002年
- 从抗 IBDV杂交瘤细胞系 SJS中分离总 RNA,经 RT-PCR体外扩增重、轻链可变区基因 ,通过一连接肽 (Giy4 Ser) 3基因拚接形成 Sc Fv基因 ,经 IBDV抗原亲和筛选出特异性阳性克隆进行核苷酸序列测定及氨基酸序列推导。所获得的特异性抗 IBDV单链抗体基因为 VH-Linker-VL 结构 ,其含有编码 (Giy4 Ser) 3的连接肽基因及维持抗体结构所必须的半胱氨酸残基 ,编码产物具有与亲本抗体相同的抗原结合活性和特异性 ,从而为研制具有应用潜力的高表达工程化抗体奠定了基础。
- 胡昕陆苹李晖孙建和王国丰
- 关键词：传染性法氏囊病病毒可变区单链抗体噬菌体展示
- 疏水修饰聚阳离子高分子SP-Chol在COS-7细胞中转染和毒性的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究以精胺为单体,以乙二醇二氯甲酸酯作为连接剂,以胆固醇氯甲酸酯作为疏水基团连接剂合成的疏水修饰聚阳离子高分子SP-Chol对非洲绿猴肾癌细胞COS-7的转染活性和细胞毒性的影响。方法:以荧光素酶质粒为报告基因,研究SP-Chol与DNA的复合物在COS-7细胞的转染活性,用MTT方法研究SP-Chol对COS-7细胞的毒性。结果:COS-7细胞实验显示,SP-Chol具有低于PEI 25kDa的细胞毒性,同时也具有高效输送DNA的能力。结论:SP-Chol是一种新型的高效、低毒,在基因治疗领域有潜在应用价值的非病毒基因输送载体。
- 李晖刘一浓王菲魏蓓蓓周毅杜子秀吴飞
- 关键词：精胺转染毒性
- 谷氨酰胺对JAL1杂交瘤细胞生长代谢的影响被引量：7
- 2002年
- 为研究不同浓度的谷氨的酰胺对JAL1 杂交瘤细胞生长、葡萄糖消耗、乳酸及氨生成等代谢过程的影响。在细胞培养箱中 ,用含不同浓度谷氨酰胺的培养液培养细胞 ,培养条件为pH 7 0～ 7 5 ,温度 37℃ ,5 %CO2 。实验表明 ,适宜于该株杂交瘤细胞生长的谷氨酰胺浓度为 2mmol/L ,谷氨酰胺浓度与细胞的葡萄糖消耗呈反比 ,与乳酸生成浓度呈反比 。
- 陆苹赵冰李晖
- 关键词：谷氨酰胺细胞生长代谢
- JAL1杂交瘤细胞的批量培养研究
- 2002年
- 研究了不同葡萄糖、谷氨酰胺浓度下JAL1细胞的生长、糖耗、乳酸及氨的生成、单抗合成等代谢过程及该株细胞的基本代谢规律 ,同时对该株细胞生长和单抗生产的动力学方面进行了研究。在细胞培养箱中 ,采用方瓶批量培养杂交瘤细胞 ,培养条件为pH7.0～ 7.5,温度 3 7℃ ,5%CO2 。实验表明 ,在不同浓度葡萄糖、谷氨酰胺的培养液中 ,细胞的活性细胞密度、总细胞密度、细胞活性上均有不同。相应地 ,对细胞的最大比生长速率、葡萄糖最大比消耗速率、乳酸最大比生成速率以及单抗最大比合成速率也有不同程度的影响。实验结果还表明 。
- 陆苹赵渝李晖赵冰
- 关键词：IBDV葡萄糖谷氨酰胺鸡传染性法氏囊病细胞培养细胞代谢
- 鸡传染性法氏囊病毒南汇分离株cDNA探针的研制被引量：4
- 2001年
- 采自上海郊县某发病鸡场的法氏囊病料 ,用单克隆抗体 (McAb )沉淀法从冻融的上清液提纯IBD病毒。用SDS 蛋白酶K法提纯核酸 ,得到高纯度的IBDVRNA后 ,再用特异性引物进行逆转录和PCR扩增 ,得到长度为 147bp的IBDVcDNA片段。将该片段回收、纯化和克隆 ,经测序鉴定 ,其结果与Genebank中同源率达 96 %。采用DIG非放射性标记系统 ,标记IBDVcDNA片段 ,得到足够量的探针 ,与不同毒株的IBDVRNA和送检病料RNA进行杂交 ,均有清晰斑点出现 ,其灵敏度为 0 1pg。
- 陆苹李晖孙建和
- 关键词：IBDVRT-PCR杂交CDNA探针
- 大麦嫩叶保健茶的研制被引量：4
- 2002年
- 大麦幼苗幼嫩茎叶,经清洗、日晒、60℃烘干后制成茶粉,与薄荷、荷叶、紫苏等辅料按一定配比制成具有清凉保健功效的袋泡茶。
- 李晖陆苹孙建和
- 关键词：袋泡茶
