杨小华 作品数:7 被引量:13 H指数:2 供职机构: 浙江大学医学院免疫研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 浙江省科技厅项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
可溶性TGFβⅡ型受体(sTGFβRⅡ)与人γ干扰素融合蛋白的表达及生物学活性鉴定 实验目的:构建可溶性人转化生长因子-β Ⅱ型受体(soluble transfouming growthfactou beta receptou sTGFβRⅡ)与人γ干扰素(hIFN-γ)融合基因的真核表达质粒pSec... 杨小华关键词:真核表达 融合蛋白 文献传递 可溶性细胞因子受体与疾病发生发展以及治疗的研究进展 被引量:6 2005年 细胞因子 (Cytokine ,CK)是免疫反应和炎症反应的主要介质 ,其异常产生常常是炎性疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、变态反应性疾病等多种疾病的主要病理因素之一 ,因此也是此类疾病生物治疗的主要靶点之一。可溶性细胞因子受体 (solublecytokinereceptor,sCR)一般能特异性抑制相应配体与其膜受体的结合 ,有拮抗CK活性的作用 ,因此对上述疾病有显著的治疗和控制作用 ,目前认为是一种新型的免疫治疗制剂。本文就近年sCR与疾病发生发展以及治疗的研究进展加以综述。 杨小华 张立煌 曹雪涛关键词:细胞因子 自身免疫性疾病 免疫抑制剂 大鼠转化生长因子β型受体胞外区与γ干扰素融合蛋白真核表达载体的构建 被引量:2 2005年 目的 :在哺乳动物细胞中表达有生物学活性的大鼠转化生长因子β 型受体胞外区与γ干扰素(rs TGFβR - IFNγ)融合蛋白。方法 :提取大鼠肝脏 m RNA,用 RT- PCR方法分别扩增 s TGFβR 和 IFNγ基因并克隆至同一真核表达载体 p Sec Tag2 A,构建 p Sec Tag2 A/rs TGFβR - IFNγ重组体 ,以脂质体转染至 CHO细胞 ,用EL ISA及 Western印迹法检测 rs TGFβR - IFNγ表达 ,并检测该融合蛋白的生物学活性。结果 :转染 p Sec Tag2 A/rs TGFβR - IFNγ的 CHO细胞培养上清表达 rs TGFβR - IFNγ融合蛋白 ,该融合蛋白具有明显的抗病毒活性 ,能拮抗 TGFβ1对 CCL- 6 4细胞的增殖抑制作用 ,能抑制 TGFβ1诱导的体外培养的 HSC活化。结论 :本实验构建的p Sec Tag2 A/rs TGFβR - IFNγ表达质粒能在哺乳动物细胞中表达具有生物学活性的 rs TGFβR - IFNγ融合蛋白。 郁子扬 张立煌 姚航平 杨小华关键词:受体 转化生长因子Β Γ干扰素 重组融合蛋白质类 大鼠转化生长因子βⅡ型受体胞外区与γ干扰素融合蛋白真核表达载体的构建 目的:在哺乳动物细胞中表达有生物学活性的大鼠转化生长因子βⅡ型受体胞外区与γ干扰素(rsTGFβRⅡ-IFNγ)融合蛋白。方法:提取大鼠肝脏mRNA,用RT-PCR方法分别扩增sTGFβRⅡ和IFNγ基因并克隆至同一真核... 郁子扬 张立煌 姚航平 杨小华关键词:受体 转化生长因子Β Γ干扰素 重组融合蛋白质类 文献传递 人可溶性转化生长因子βⅡ型受体真核表达载体的构建及表达 被引量:1 2004年 目的 :构建人转化生长因子 β 型受体胞外区 (s TGFβR )基因的真核表达载体 ,转染真核细胞 CHO以表达 s TGFβR 蛋白 ,并检测其生物学活性。方法 :以 TGFβR 的重组质粒为模板 ,用 PCR方法扩增得到人TGFβR 胞外区 (1- 15 9位氨基酸 )的 c DNA,将该 c DNA重组到真核表达载体 p CDNA3.1/myc- his(- ) B(p CDNA)的 Eco R 和 Hind 多克隆位点上 ,构建成 p CDNA- s TGFβR 重组质粒。经双酶切和核酸测序鉴定 ,将该重组质粒转染 CHO细胞 ,用 Western blotting法检测 s TGFβR 的表达 ,并测定其生物学活性。结果 :CHO细胞转染 p CD-NA- s TGFβR 重组质粒后 ,其培养上清经 Western blotting分析 ,显示有特异性的蛋白条带 ,所表达的蛋白能明显抑制 TGFβ1对貂肺上皮细胞的增殖抑制作用。结论 :成功克隆了 s TGFβR 基因 ,并获得有生物学活性的 s TGFβR 蛋白。 杨小华 张立煌 史丽云 姚航平 郁子扬关键词:转化生长因子Β 真核细胞 CHO细胞 精神分裂症患者的干扰素及白介素表达水平的研究 被引量:4 2004年 目的 分析精神分裂症患者外周血单个核细胞 (PBMCs)IFN γ、IL 12、IL 18的表达水平 ,从细胞因子水平探讨精神分裂症患者的免疫功能状况。方法 用酶联免疫法 (ELISA)检测 34例精神分裂症患者和 2 0例正常人PBMCsIFN γ、IL 12、IL 18的表达水平。结果 精神分裂症患者PBMCs的IFN γ、IL 12、IL 18的表达水平比正常人显著增高。结论 PBMCs的IFN γ、IL 12、IL 18的表达增强 ,提示精神分裂症患者免疫功能混乱。 汪辉 杨小华 宋志艳 钱惠忠 陈梅芳 陈致宇 杨金芳 郑海雅关键词:精神分裂症 干扰素 白细胞介素 单个核细胞 酶联免疫法 肝纤维化患者星状细胞Smad分子表达及IFN—γ的调控作用 本文分析慢性肝炎肝纤维化患者星状细胞对TGF—β1的应答能力与TGFβR,Smad分子表达的关系,及IFN—γ对星状细胞TGFβR及Smad分子的调控作用,探讨Smad分子在肝纤维化过程中的作用及IFN—γ的抗肝纤维化机... 张立煌 姚航平 郁子扬 杨小华 曹雪涛文献传递