杨涛
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：江南大学药学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程理学化学工程更多>>
- 表面活化甲壳素固定化Gibberella intermedia生物转化制备异烟酸
- 2015年
- 甲壳素及其衍生物资源来源广泛、具有生物安全性,在材料、食品、化工等领域拥有良好的应用前景。本研究首次尝试采用经表面活化的甲壳素为包埋材料对产腈水解酶的G.intermedia游离细胞进行固定化,对固定化条件进行了初步优化,选取甲壳素质量分数3%,三聚磷酸钠质量分数7%,固定化时间5 h,固定菌体浓度为20g/L时催化活力达到最高。对固定化细胞的催化应用特性进行了表征,结果表明固定化细胞对4-氰基吡啶转化反应的最适反应温度为50℃,最适p H值为7.0;最适底物浓度为125mmol/L,最大产物耐受浓度为400mmol/L,均明显优于游离细胞。探索了将制备的固定化细胞直接应用于4-氰基吡啶生物转化合成异烟酸,固定化细胞可重复利用14批次,而相应游离细胞仅为3次。
- 龚劲松李恒杨涛钱建瑛陆震鸣许正宏史劲松
- 关键词：甲壳素异烟酸固定化生物转化
- 基于宏基因组学壳聚糖酶挖掘研究被引量：4
- 2014年
- 壳聚糖酶(EC3.2.1.132)可有效地将壳聚糖降解为活性良好和应用前景广泛的低分子壳聚糖或壳寡糖,但目前存在专一性强的壳聚糖酶发酵水平低、种类单一、应用性能较差等问题.本研究从虾蟹堆积场淤泥采样,采用宏基因组文库方法,从其Fosmid文库中筛选出壳聚糖酶基因ChiE.测序表明,ChiE由1 362 bp组成,编码453个氨基酸,预测分子量(Mr)为42×103左右.将ChiE与pET-28a(+)载体连接,转化大肠杆菌Escherichia coli Rosetta-gami(DE3)构建了壳聚糖酶重组菌.采用离子交换柱(DEAE Sepharose FF)和凝胶色谱柱(SuperdexTM 75)纯化目的蛋白.酶学性质结果显示,该酶最适作用温度70℃,最适pH 6.0,Li+、Sr2+、K+等离子对其具有一定激活作用,Fe3+、Pb2+、Fe2+等离子则具有不同程度的抑制.在最适作用条件下,该酶比酶活为2 158 U/mg.本研究表明,重组菌E.coli Rosetta-gami(DE3)/ChiE具有培养简便、酶发酵产量大等优点,结果可为利用基因工程菌生产壳聚糖酶奠定基础.
- 费忠李恒龚劲松杨涛许正宏史劲松
- 关键词：宏基因组文库FOSMID壳聚糖酶壳寡糖大肠杆菌
- 固定化Gibberella intermedia转化3-氰基吡啶制备烟酸被引量：3
- 2014年
- 研究不同复合包埋材料对含腈水解酶的Gibberella intermedia CA3-1进行固定化,选择出最为适合的壳聚糖-聚乙烯醇作为复合包埋材料,其优化后的浓度分别为1.6%和2%。实验结果表明该固定化细胞的最适转化条件为:3-氰基吡啶初始浓度300mmol/L,转化温度30℃,pH值7.0,转化时间60min。固定化细胞可以稳定进行26个批次转化,每克干细胞可转化产生283.5g烟酸,为游离细胞的3倍。此外,固定化细胞对高浓度3-氰基吡啶的耐受性大幅提高,温度稳定性有一定增强。连续补料19次,固定化细胞酶活保留约30%,经折算产率为每克干细胞转化生成191.3g烟酸。
- 杨涛李恒龚劲松熊雷朱小燕许正宏史劲松
- 关键词：烟酸固定化生物催化
- 固定化Pseudomonas putida CGMCC3830转化3-氰基吡啶制备烟酸被引量：1
- 2014年
- 采用固定化Pseudomonas putida CGMCC3830转化3-氰基吡啶制备烟酸。选择海藻酸钠作为包埋材料进行固定化,考察固定化细胞的制备条件、转化条件以及批次稳定性。结果表明,优化的固定化条件为:海藻酸钠2 g/dL,氯化钙0.4 g/dL,固化时间6 h;最适转化条件为:温度35℃,pH 7.0,底物浓度100 mmol/L。批次转化实验结果显示,当底物浓度为100 mmol/L时,固定化细胞重复使用10次,酶活仍保留59.1%,产物烟酸的得率为91.8 g/g细胞干重,而游离细胞的使用3次后,酶活下降至45.6%。
- 李恒赵欣杨涛龚劲松朱小燕熊雷陆震鸣许正宏史劲松
- 关键词：PUTIDA固定化烟酸3-氰基吡啶腈水解酶
- 废弃虾壳制备改性甲壳素凝胶球及其对金属离子的吸附性能被引量：2
- 2016年
- 以虾壳酶解残渣为原料,经5%盐酸脱钙处理4 h后,用45%氢氧化钠和460 W微波辅助脱乙酰处理10 min,得到脱乙酰度为40.4%的改性甲壳素。将改性甲壳素加入海藻酸钠水溶液中混合均匀,挤压滴入氯化钙水溶液中固化12h,制备得到直径为1.5~3.2 mm的凝胶小球,研究了该凝胶球对Pb^(2+)、Cr^(3+)、Ni^(2+)、Cu^(2+)、Co^(2+)和Zn^(2+)的吸附效果。结果表明:凝胶球对Cu^(2+)、Co^(2+)和Zn^(2+)的吸附效果最好,300 mg/L重金属离子溶液吸附处理8 h是较适宜的吸附条件,此条件下,Cu^(2+)、Co^(2+)和Zn^(2+)的吸附率分别达到94.2%、75.6%和57.3%。在Cu^(2+)-Co^(2+)-Zn^(2+)共存溶液体系中,凝胶球对3种离子的吸附率均有所提高,Cu^(2+)、Co^(2+)和Zn^(2+)的吸附率分别为95.1%、82.5%和67.5%。
- 钱建瑛丁振中杨涛李恒史劲松
- 关键词：金属离子
