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林杰材

作品数:12 被引量:22H指数:3
供职机构:海南大学农学院更多>>
发文基金:海南省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 4篇科技成果

领域

  • 8篇农业科学
  • 3篇生物学
  • 2篇医药卫生
  • 1篇文化科学

主题

  • 3篇克隆
  • 3篇CDNA文库
  • 2篇血白细胞
  • 2篇蟒蛇
  • 2篇外周
  • 2篇外周血
  • 2篇外周血白细胞
  • 2篇五指山小型猪
  • 2篇细胞
  • 2篇小型猪
  • 2篇白细胞
  • 1篇代谢动力学
  • 1篇单胞菌
  • 1篇蛋白抗原
  • 1篇地方猪
  • 1篇地方猪种
  • 1篇动物
  • 1篇动物病
  • 1篇动物病理
  • 1篇动物病理学

机构

  • 12篇海南大学
  • 4篇华中师范大学
  • 1篇海南省动物疫...
  • 1篇海南大田国家...

作者

  • 12篇林杰材
  • 8篇满初日嘎
  • 8篇王凤阳
  • 7篇杜丽
  • 6篇刘涛
  • 6篇吴科榜
  • 6篇成鹰
  • 5篇李治深
  • 4篇李笑春
  • 4篇申明霞
  • 4篇祁超
  • 3篇韩新畴
  • 3篇曾纪锋
  • 3篇张莉娜
  • 2篇倪承结
  • 2篇陈品林
  • 2篇郑继平
  • 2篇陈斌玺
  • 1篇林贤梅
  • 1篇严虹羽

传媒

  • 1篇兽类学报
  • 1篇生物技术
  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇华南热带农业...
  • 1篇中国实验动物...
  • 1篇现代农业科技
  • 1篇中国兽医科学
  • 1篇热带生物学报

年份

  • 1篇2015
  • 2篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2010
  • 4篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
12 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
海南黄牛外周血白细胞cDNA文库的构建被引量:4
2007年
运用SMART(Switching Mechanism at 5'end of RNA Transcript)技术构建海南黄牛外周血白细胞cDNA文库。采用RNAiso Reagent处理新鲜血液,以总RNA抽提试剂盒(上海华舜)制备总RNA。用PowerscriptTM反转录酶逆转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得cDNA双链,SfiⅠ酶切和CHROMA SPIN-400TM柱分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB载体连接,电转化入Ecoli.DH5α,建成原始文库。经鉴定,库容量达到1.2×106克隆,原始文库滴度为3×109cfu/mL,扩增后的文库滴度为4.3×1010cfu/mL。PCR鉴定重组子,发现重组率接近100%,插入片段大小分布为0.5~2kb,插入片段平均长度约为1kb。文库的各项指标均达要求,为利用文库筛选海南黄牛已知和未知功能基因提供了材料来源,且为进一步研究基因的结构和功能奠定了重要基础。
杜丽刘涛申明霞王凤阳成鹰张莉娜祁超李治深吴科榜张艳许兆艳林杰材满初日嘎
关键词:CDNA文库SMART技术外周血白细胞
动物病理学实验教学方法多元化改革探讨被引量:1
2015年
实验教学是高素质人才培养的一个重要环节。为了提高实验教学的教学质量,对动物病理学传统的实验教学方法进行改革,总结了动物病理学实验教学方法多元化的多种途径,认为动物病理学实验教学方法多元化,有利于培养学生实践能力和创新能力,提高其综合素质,是提高动物病理学实验教学质量的有效途径。
曾纪锋柳贤德林杰材赵建国
关键词:动物病理学实验教学
蟒蛇铜绿假单胞菌的分离鉴定及抗药性分析被引量:3
2013年
为了确认死于急性支气管炎、肺炎的蟒蛇致病病原,对死亡蟒蛇的肝、肺组织及心血进行病原分离培养,获得1株分离菌株,并对其进行形态学、培养特性、生化特性测定及动物致病试验。结果表明,分离菌株为铜绿假单胞菌,是本病致病病原;对分离菌株进行24种常用抗菌药物的药敏试验,结果表明,该菌株对氟苯尼考、妥布霉素、氯霉素和环丙沙星敏感,对红霉素、氟哌酸、氨苄青霉素、头孢拉定、新霉素、复方新诺明、卡那霉素、罗红霉素、丁胺卡那霉素、氧氟沙星、阿莫西林、庆大霉素、四环素等多种抗菌药物产生耐药,且呈多重耐药性。
曾纪锋林杰材李笑春郑继平廖世庄
关键词:铜绿假单胞菌抗药性蟒蛇
五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库的构建与鉴定被引量:5
2009年
目的运用SMART技术,构建了五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库。方法用RNAiso reagent(TaKaRa)处理新鲜血液,以总RNA抽提试剂盒(上海华舜)制备总RNA。用Powerscript TM反转录酶逆转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得cDNA双链,Sfi I酶切和CHROMASPIN-400TM柱分离后,500 bp以上的片段与pDNR-LIB载体连接,电转化入E.coli.DH5α,建成原始文库。然后,扩增文库并随机挑取单菌落,PCR鉴定重组子插入片段大小。结果经鉴定,库容量达到1.5×106克隆,原始文库滴度为9.7×109cfu/mL,扩增后的文库滴度为6.4×1010cfu/mL。重组率接近100%,插入片段大小为0.5~2 kb,平均长度约为1.1 kb。结论构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库符合建库要求,可以用于全长cDNA的筛选。为五指山小型猪新基因的获得及结构和功能研究提供了可靠材料。
申明霞刘涛杜丽王凤阳成鹰李治深满初日嘎林杰材祁超
关键词:五指山小型猪外周血白细胞CDNA文库
基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立被引量:6
2009年
为建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)抗体的间接ELISA诊断方法,将HEV ORF3片段克隆至大肠杆菌表达载体pET42a(+)中,构建了原核表达载体pET42a-ORF3,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,并对表达的融合蛋白进行Ni2+-NTA柱纯化及SDS-PAGE、Western-blot鉴定,用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法。结果显示,GST-ORF3在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的蛋白质分子质量约为45.5 ku,具有良好的抗原性。用建立的间接ELISA检测190份猪血清样品,阳性率为84.7%,与试剂盒检测结果相比,阳性符合率为91.5%。表明,建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和灵敏性,可用于猪血清HEV抗体的检测。
刘涛杜丽王凤阳雷明崔克成鹰陈品林王轶林杰材满初日嘎
关键词:猪戊型肝炎病毒ORF3原核表达间接酶联免疫吸附试验
海南黄牛BAC文库与cDNA文库的构建及其应用研究
王凤阳米华存吴科榜杜丽冯飞陈斌玺王冬梅林杰材倪承结韩新畴满初日嘎
遗传多样性的存在是自然选择和生物体自身基因突变两者动态平衡的结果,海南地处热带的的气候及自然环境孕育了具有热带地域特征的动物基因资源,该研究选择海南黄牛作为研究对象,构建了海南黄牛外周血白细胞cDNA文库,库容量达到1....
关键词:
关键词:黄牛遗传多态性遗传学
氟苯尼考对大肠杆菌体外药动-药效同步模型的研究
杨雨辉王学梅吴科榜李笑春韩新畴胡日查林杰材倪承结严虹羽
为合理使用氟苯尼考治疗猪大肠杆菌病,该研究进行了氟苯尼考对猪大肠杆菌体外药效的研究,并使用体外药物代谢动力学模型研究了氟苯尼考对猪大肠杆菌体外药动药效同步关系,结果表明氟苯尼考对猪大肠杆菌的体外药效受各种培养条件的影响。...
关键词:
关键词:氟苯尼考大肠杆菌病药物代谢动力学
五指山小型猪APEX1基因cDNA的克隆及生物信息学分析被引量:1
2009年
[目的]对五指山小型猪脱嘌呤嘧啶核酸内切酶cDNA进行克隆和生物信息学分析。[方法]以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法,克隆得到APEX1基因全长cDNA,并运用生物信息学软件对该基因核苷酸序列及其编码蛋白的理化性质及二级结构等进行分析和预测。[结果]生物信息学分析表明,该cDNA全长1392bp,5′非翻译区长132bp,3′非翻译区长303bp,含有一个957bp的完整开放阅读框,编码318个氨基酸。该蛋白的分子量为35kD,等电点为8.05。比对分析表明,五指山小型猪APEX1基因的核酸序列及其氨基酸序列与人、小鼠、黑猩猩等哺乳动物具有较高的相似性。[结论]成功克隆了五指山小型猪A-PEX1基因cDNA,为进一步研究APEX1在动物体内的作用机制奠定了基础。
李治深杜丽刘涛申明霞王凤阳成鹰陈品林林杰材满初日嘎祁超
关键词:五指山小型猪CDNA文库克隆
海南黄牛HSF1 cDNA全长的克隆与序列分析被引量:1
2008年
目的:根据人、小鼠HSF1cDNA保守区序列设计引物,通过PCR方法扩增海南黄牛HSF1cDNA,并进行序列分析。方法:利用RT-PCR、半巢式PCR以及3'-RACE技术分段扩增得到了海南黄牛HSF1cDNA序列,测序正确后进行拼接。用DNAMAN 生物信息学软件分析海南黄牛HSF1 cDNA与赫里福德牛、人、小鼠同源性和海南黄牛HSF1蛋白的氨基酸组成、等电点、亲/疏水区等蛋白质性质,并根据各种动物HSF1蛋白绘制进化树。结果:(1)海南黄牛的HSF1 cDNA序列全长为1 993bp,包括150bp的5'非翻译区,1 578bp的开放阅读框以及264bp(不含poly(A)尾)的3'非翻译区,编码524个氨基酸,分子量为56.42 kD,等电点(pI)为 4.79。(2)海南黄牛的HSF1 cDNA与赫里福德牛、小鼠和人HSF1 cDNA的同源性分别为98.99 %、81.78 %、87.82 %,相应编码蛋白氨基酸序列的同源性分别为98.86 %、83.84 %、89.06 %,其中N-末端和C-末端高度保守,而中间区域存在缺失或替换。(3)根据氨基酸序列构建不同动物HSF1蛋白的进化树,与采用经典遗传分类法构建的进化树基本一致。结论:首次克隆了海南黄牛 HSF1 cDNA全长,分析表明:海南黄牛HSF1蛋白是亲水性蛋白,在8种动物中,其同源性大于73 %,高度保守。海南黄牛与赫里福德牛HSF1蛋白同源性高达98.86 %,在三聚体化区域、转录调节域和激活域存在6个位点的单氨基酸突变,这些发现为进一步揭示海南黄牛抗热性状形成的分子机制提供了重要依据。
成鹰李治深杜丽王凤阳刘涛申明霞张莉娜张巍吴科榜林杰材满初日嘎米华存祁超
关键词:CDNA克隆
海南坡鹿HSF1cDNA的克隆与表达被引量:3
2009年
采用RT-PCR和RACE方法扩增海南坡鹿热休克转录调节因子1(Heat shock transcription factor1,HSF1)cDNA全长,将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序并进行生物信息学分析;构建pET28a-hdHSF1表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,海南坡鹿HSF1cDNA全长为2036bp,含有1个1578bp的开放阅读框,编码525个氨基酸。经生物信息学分析,HSF1是一个等电点为4.93的亲水性蛋白。经IPTG诱导表达后,得到一个带组氨酸标签的约62kD的融合蛋白,用抗His单克隆抗体进行Western blot,得到一条约62kD特异性抗体结合带,表明海南坡鹿HSF1原核表达载体成功构建并表达。
成鹰杜丽王凤阳刘涛李治深许世英符运南林贤梅吴科榜林杰材满初日嘎
关键词:海南坡鹿克隆
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