武永淑
- 作品数：16 被引量：33H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学航空宇航科学技术更多>>
- MHC单倍型SPF鸭的培育及其TAP基因组序列分析
- 引言鸭主要组织相容性复合体（MHC）是一组紧密连锁高度多态的基因簇,其单倍型与宿主的抗病性和免疫应答水平密切相关[1,2],其中抗原提呈相关转运蛋白（TAP）基因毗邻MHCⅠ基因[3,4]。HBK鸭排除了10种特定病原体...
- 张晓娜武永淑吴少莲廉传江文辉强陈洪岩韩凌霞
- 鸡MHC Ⅰ类分子的多抗制备及其在不同MD抗性MHC单倍型鸡脾脏中的差异表达被引量：3
- 2012年
- 目的制备能检测不同MHC-B单倍型MHC I类蛋白的多抗血清,并对马立克氏病(MD)抗性较强的BW/G3系鸡群(MHC B2单倍型)和敏感性较强的BW/G7系鸡群(B19单倍型)接种马立克氏病毒(MDV)后,利用Western blot技术半定量分析MHC I类蛋白表达量的差异。方法从BW/G3系鸡脾组织cDNA中PCR扩增BF基因的保守序列第4～8外显子,克隆入原核表达载体pET-30a,构建重组质粒。转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得表达,经SDS-PAGE初步纯化,免疫新西兰兔,制备兔抗血清。以高效价的兔抗血清为一抗,对BW/G3和BW/G7系健康鸡和MDV攻毒后11周的脾组织进行Western blot,利用ImageQuant 5.2软件半定量分析其中MHC Ⅰ类蛋白含量的变化。结果含BF部分基因的重组质粒在大肠杆菌中表达,其特异性兔抗血清能检测到不同MHC-B单倍型鸡的MHC Ⅰ类蛋白。BW/G3和BW/G7系鸡群感染MDV后,MHC Ⅰ类蛋白含量全部上调,正常组和攻毒组中BW/G7系的表达量均极显著高于BW/G3系(P≤0.01,P≤0.001)。结论成功制备了能检测MHC B2、B6和B19单倍型鸡的MHC I类蛋白特异性多抗血清;MDV攻毒后期,抗性鸡BW/G3和敏感鸡BW/G7脾组织中MHC I类蛋白的表达量都发生上调,且易感鸡中的表达量高于抗性鸡,为进一步揭示病毒性肿瘤病的致病机理提供了思路。
- 高彩霞李行杨柳武永淑蔡文博张伟韩建林韩凌霞
- 关键词：MHC
- HBK鸭人工感染鸭疫里默氏杆菌和Ⅰ型鸭肝炎病毒试验
- 目的 分析HBK鸭的TAP基因型对病原微生物感染的敏感性差异。方法 本研究分别利用A1、A2、A4和A2/A4基因型鸭感染鸭疫里默氏杆菌(RA)和Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ),每日观察动物精神状况,计算死亡率,观察组织脏...
- 韩凌霞武永淑张伟廉传江文辉强赵丽丽陈洪岩
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌
- HBK-SPF鸭MHC单倍型筛选及其TAP基因的生物信息学分析
- HBK-SPF鸭是中国农业科学院哈尔滨兽医研究所在绍兴麻鸭基础上培育的SPF鸭，包括HBK-Q和HBK-B品系，现已繁育至第8代。TAP分子是MHC class I抗原递呈路径中一个关键蛋白分子，它将水解的内源性多肽运送...
- 武永淑
- 关键词：微卫星DNA标记MHC单倍型
- 文献传递
- 实验用巴马小型猪的遗传多样性研究被引量：1
- 2013年
- 为了研究屏障环境下小规模保存实验用巴马小型猪的遗传学背景,试验运用19个微卫星基因座,对长期在屏障环境下封闭饲养的同世代、同父本但不同母本的3窝巴马小型猪(BM/HVRI猪)进行分子群体遗传学检测,计算平均等位基因数(Na)、平均观察杂合度(Ho)和平均期望杂合度(He),检验Hardy-Weinberg平衡并进行遗传分化分析。结果表明:该群体的Na、Ho和He分别为3.05±0.71,0.703 7±0.019 2和0.574 6±0.023 1,3窝仔猪的He分别为0.558 3±0.029 3,0.552 0±0.037 3和0.549 2±0.030 8,且差异不显著(P>0.05);经完全枚举法检验,A窝和C窝分别有3个和5个基因座偏离Hardy-Weinberg平衡;经U检验,A窝和C窝分别有4个和6个基因座存在杂合子过剩,仅C窝1个基因座表现出杂合子缺失现象。说明该猪群遗传多样性较低,处于低度杂合状态,窝系之间不存在遗传分化。
- 武永淑张海燕杨柳杨超李海超廉传江韩建林曲连东韩凌霞
- 关键词：屏障环境
- MHC-B单倍型BW/G系鸡群同种异型抗血清的制备及应用被引量：3
- 2013年
- BW/G(n)系鸡群是主要组织相容性复合体核心区纯合的SPF鸡群,包括BW/G1、BW/G2、BW/G3、BW/G5、BW/G6和BW/G76个亚系,分别属于B13、B15、B2、B5、B21、B19单倍型。本研究以BW/G(n)系鸡的外周血红细胞作为免疫原,静脉接种其它不同单倍型鸡,制备了同种异型高免抗血清。参照经典的鸡血型鉴定方法,初步建立了单倍型鸡血型鉴定红细胞凝集方法,B13、B15、B5、B21、B2和B19的同种异型抗血清血凝效价分别为1∶80、1∶80、1∶40、1∶20、1∶16和1∶32,利用PCR对24只鸡的BF基因外显子2和3进行测序,确定其中22只为B5/B15杂合、2只为B15/B15纯合。利用制备的B15和B5抗血清分别对这24只鸡进行血凝试验,结果表明:B15抗血清与B5/B15个体的血凝效价为0～1∶160,与B15/B15个体的血凝效价分别为1∶80和1∶160;B5抗血清与B5/B15个体的血凝效价为1∶40～1∶80,与B15/B15个体的血凝效价分别为1∶10和1∶20。本研究制备的6种MHC单倍型鸡同种异型抗血清,为鸡的血型鉴定及免疫遗传基因纯合个体的筛选提供了物质基础。
- 杨柳高彩霞武永淑李海超杨超廉传江韩凌霞
- 鸭圆环病毒FJ/2011株全基因组的克隆与序列分析
- 鸭圆环病毒可感染鸭的免疫系统，造成病鸭的免疫抑制，对养鸭业造成危害.利用PCR方法从福建地区某鸭场疑似鸭圆环病毒(DuCV)感染的病料中，经过全基因组扩增、克隆和测序，获得一株鸭圆环病毒，命名为DuCV/FJ/2011.
- 文辉强武永淑廉传江陈洪岩韩凌霞
- 关键词：鸭圆环病毒全基因组序列
- 鸭圆环病毒双拷贝串联基因组感染性克隆的构建
- 以鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)FJ/2011分离株基因组为模板,构建带遗传标记的双拷贝串联基因组感染性克隆(pEGFP-2DuCV).应用分子生物学技术,以GenBank数据库中本实验室测得的D...
- 文辉强武永淑张晓娜廉传江赵丽丽韩凌霞陈洪岩
- 关键词：鸭圆环病毒感染性克隆
- 文献传递
- HBK-SPF鸭MHCI区域微卫星标记分析被引量：4
- 2015年
- 禽主要组织相容性复合体是一组紧密连锁高度多态的基因群,与免疫反应或敏感性密切相关,鸭MHC I区域全长36.8 kb,由TAP1、TAP2和5个MHC I拷贝基因(UAA-UEA)组成。HBK-SPF鸭是中国农业科学院哈尔滨兽医研究所培育的无特定病原体种鸭,分为B和Q 2个品系,已封闭繁育了7个世代。本文在鸭MHC I区域筛选了4个微卫星位点,通过单链构象多态性分析和聚合酶链式反应直接测序,发现A位点具有多态性,为(GT)n的重复结构,第6代HBK-B和HBK-Q的31个个体和第7代的140个个体进行聚合酶链式反应,结果直接测序,在重复结构之前的108bp中,发现了4种纯合单倍型和6种杂合单倍型;B位点未得到目的产物;C位点位于MHC I拷贝基因UDA和UEA之间,扩增结果与UAA和UBA之间序列高度同源,无法判断基因型;D位点表现为单态,为(ATA)15的固定重复结构。本研究为进一步研究鸭MHC I基因结构和建立家系提供了依据。
- 韩凌霞武永淑吴少莲彭蔚宇王兴童韩建林陈洪岩
- 关键词：无特定病原体微卫星标记
- 家禽MHC结构研究进展被引量：15
- 2012年
- 禽主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)的结构与禽病防控、禽免疫学、禽类遗传学研究密切相关。文章对鸡、火鸡、鹌鹑、鸭和鹅的MHC结构方面的研究进展进行了综述,表明其有以下共同特点:都有保守的MHC区域,包括MHC I基因和MHC II基因及一些功能未知基因;基因排列简单而紧凑;MHC I基因内含子的长度都比哺乳动物小;鸡、火鸡、鸭和鹅的MHC I基因组序列都有8个外显子和7个内含子,MHC IIβ基因组序列都有6个外显子和5个内含子;鸡、火鸡和鹌鹑的BG基因结构模式相同;都存在微卫星重复单元。但也存在种属差异:鸡的MHC I基因和MHC II基因是双拷贝,而鸭、鹅和鹌鹑有若干个拷贝;BG基因的拷贝数及其外显子数目不同。对主要家禽MHC结构进行分析比较,将有利于对禽病学及禽免疫遗传学的进究。
- 武永淑韩凌霞
- 关键词：家禽MHC
