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BLyS改组噬菌体文库的构建及初步筛选: 从质粒pT7474-BLyS及人胎脑cDNA文库中分别扩增出BLyS和APRIL基因,用DNaseⅠ消化后,回收小于 50 bp的片断,用于DNA改组.PCR产物与噬菌体载体pfUSE5连接后,电转E.coli ER27...; 沈琼宋聿文韩威丁艳丽龚毅袁勤生; 关键词：DNA改组噬菌体展示文库; 文献传递

B淋巴细胞刺激因子C端肽（BLYS<,134-285>）的结构和功效研究: B淋巴细胞刺激因子(BLYS)也称为BAFF，THANK和TALL-1等，是肿瘤坏死因子家族的新成员，其C端肽(BLYS134-285)为其发挥功能的主要区域。BLYS在体外能专一刺激B细胞增殖，并能诱导活化的B细胞分泌...; 沈琼; 关键词：B淋巴细胞刺激因子 B细胞增殖融合蛋白免疫生物学; 文献传递网络资源链接

融合干扰素-BLA(IFN-BLA)的构建、表达、纯化及抗病毒活性测定(英文): 2005年; 干扰素BLA(IFN BLA)由干扰素beta1b(IFN beta1b)和干扰素alpha2b(IFN alpha2b)通过连接肽GGGS融合而成。优化了其在大肠杆菌BL21CodonPlus(DE3)RIL中的实验室表达条件,表达的目的蛋白占菌体总蛋白的35%以上并且主要以包涵体的形式存在。对包涵体的复性条件进行了摸索,建立了IFN BLA的复性及纯化方法,纯化后的蛋白产量约为45mg/L,纯度在90%以上。抗病毒活性分析表明这一新的融合蛋白可能具有协同或加成活性。; 马文哲沈琼韩威陆晨轶杨胜利龚毅; 关键词：基因表达纯化抗病毒活性

BLyS改组噬菌体文库的构建及初步筛选: 2006年; 从质粒pT7474-BLyS及人胎脑cDNA文库中分别扩增出BLyS和APRIL基因,用DNase I消化后,回收小于50 bp的片断,用于DNA改组。PCR产物与噬菌体载体pfUSE5连接后,电转E.coliER2738获得改组文库。构建的改组文库库容量为8.9×105。对文库进行初步的筛选,获得了一个受体结合活性降低的突变克隆。成功构建了BLyS改组噬菌体文库,为蛋白结构与功能之间关系的深入研究打下了基础。; 沈琼宋聿文韩威丁艳丽龚毅袁勤生; 关键词：DNA改组噬菌体展示文库

BLyS对噬菌体随机12肽库的筛选被引量：1: 2006年; 用B淋巴细胞刺激因子(BLyS)对噬菌体随机12肽库进行亲和淘洗,3轮筛选后阳性噬菌体得到富集。用ELISA鉴定噬菌体克隆,多个阳性克隆测序后得到了同一个小肽序列(RHKIQLRQNIIT)。将该小肽与GST融合,在大肠杆菌中进行表达及纯化,ELISA实验进一步验证了其具有与BLyS特异结合的活性。该小肽有可能成为其天然受体的拮抗剂。; 丁艳丽韩威沈琼刘惠杨胜利龚毅; 关键词：BLYS 噬菌体肽库小肽

红色糖多孢菌红霉素抗性基因的克隆与鉴定被引量：2: 2002年; 将红色糖多孢菌 ( Saccharopolyspora erythraea)的染色体 DNA用 Pst I酶切后与载体p UWL2 0 1连接 ,转化变铅青链霉菌 ( S.lividans) TK2 3的原生质体。采用双重抗性筛选得到了 9个转化子。分别抽提其中的质粒并再次转化原生质体 ,在含红霉素的平板上各筛选约 2 0 0个转化子 ,其中有 3个在抗性板上生长良好 ,分别命名为 p LP42、p LP1 b和 p LP44。对其中的 p LP42酶切分析表明 ,其含有约 3.0 kb的红色糖多孢菌 ( Saccharopolyspora erythraea)染色体 DNA片段 ,它的载体部分发生了缺失。以 p UC1 8为载体 ,将 p LP42的 1 .7kb- Kpn I片断克隆、测序、经与 Genebank的erm E基因顺序比较 ,证实已克隆了 Saccharopolyspora; 孙丽萍沈琼叶江吴海珍张惠展; 关键词：鸟枪法原生质体转化红色糖多孢菌基因克隆基因鉴定

苏氨酸操纵子的克隆表达及天冬氨酸激酶的测活被引量：10: 2003年; 依据途径工程的基本原理 ,为构建大肠杆菌苏氨酸高产菌林 ,需强化表达苏氨酸生物合成途径中的关键基因。以EcoliMC4 10 0染色体DNA为模板 ,用PCR扩增了天冬氨酸激酶基因thrA部分片段 ,以之为探针从基因文库中克隆得到thr操纵子 ,包括启动子、结构基因 (thrA、thrB、thrC)、终止子。将结构基因装载于pET lla质粒上的T7启动子下游 ,得到了表达质粒pTHlla 0 8。转化E .coliBL2 1(DE3) ,经异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,获得了高效的表达。含表达质粒的菌体胞内粗提液经酶活分析表明 ,天冬氨酸激酶的活性为含载体质粒pET lla的对照菌的 10; 沈琼黄雪峰吴海珍张惠展; 关键词：天冬氨酸激酶基因表达

苏氨酸基因工程菌的构建: 依据途径工程的基本原理,为构建大肠杆菌苏氨酸高产菌株,需强化表达苏氨酸生物合成途径中的关键基因及苏氨酸分泌有关的原因.该工作即从这两方面入手.采用PCR法克隆到了与苏氨酸分泌有关的RHTB,RHTC基因,将RHTB克隆于...; 沈琼; 关键词：苏氨酸大肠杆菌; 文献传递网络资源链接

林可霉素生物合成缺陷的同源重组菌鉴定被引量：1: 2003年; 以 S.lincolnensis B48为对照 ,分别测定两个染色体上含 lmb I基因灭活拷贝的菌株 YY1(同源交换 )、YY2 (同源整合 )的抗菌效价 ,其中 YY1在其整个生物周期中均无明显抗菌效价 ,而 YY2的效价与 B48相比也明显偏低。进一步通过 PCR反应验证这两株基因工程菌 lmb I基因灭活情形 ,结果发现 YY 1染色体上 lmb I基因的两个拷贝均因同源交换而被灭活 ,而 YY2可能是因单拷贝发生同源整合而仅被部分灭活。; 沈琼吴海珍唐雅珺张惠展; 关键词：林可霉素生物合成效价

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沈琼