公共文化服务平台

洪炜龙: 作品数：27 被引量：66H指数：5; 供职机构：温州医科大学更多>>; 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

miR-222通过MMP1对增生性瘢痕成纤维细胞的调控机制研究被引量：1: 2017年; 目的观察成纤维胶原酶1(MMP1)和miR-222在增生性瘢痕(HS)成纤维细胞中的表达水平,探讨miR-222对HS发生、发展的调控机制。方法选取36例HS患者的HS组织,并各留取HS旁正常组织作为对照。分离培养出HS组织与正常组织的成纤维细胞;采用RT-PCR法检测成纤维细胞MMP1 m RNA和miR-222表达水平;采用Western blot法检测成纤维细胞MMP1蛋白表达水平;采用MTT法检测成纤维细胞增殖情况;采用双荧光素酶报告实验检测miR-222是否可调控MMP1基因。结果与正常组织比较,HS组织成纤维细胞MMP1 m RNA、蛋白表达水平均下调(均P<0.05),miR-222表达水平上调(P<0.05)。与空白对照成纤维细胞比较,HS组织转染MMP1过表达质粒后的成纤维细胞MMP1 m RNA、蛋白表达水平均上调(均P<0.05),增殖速度明显减慢(P<0.05);转染antagomiR-222质粒后的成纤维细胞miR-222表达水平下调(P<0.05),MMP1 m RNA表达水平上调(P<0.05),增殖速度明显减慢(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果表明miR-222能与MMP1基因的3′-UTR区相结合,从而调控其表达。结论 miR-222在HS组织中存在过表达,miR-222或通过负调控其靶基因MMP1的表达而发挥其调控成纤维细胞增殖和凋亡的作用。; 张谊张璃张启瑜洪炜龙林孝华; 关键词：增生性瘢痕基质金属蛋白酶1

环杷明对马兜铃酸诱导的肾上皮细胞表型转化及Hedgehog通路的影响被引量：2: 2015年; 目的:探讨环杷明干预Hedgehog(HH)信号对马兜铃酸(AA)致肾小管上皮细胞表型转化和基质累积的影响。方法:根据干预措施将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E分为溶剂对照组、AA损伤组(分别用终浓度为1、5和10 mg/L的AA处理细胞)和环杷明干预组(10 mg/L AA基础上加入1、5和10μmol/L环杷明)。细胞培养24 h后,用real-time PCR检测HH信号关键分子Ptch1和Smo、表型转化相关分子α-SMA和E-cadherin、ZO-1、BMP-7和基质成分I型和III型胶原mRNA的表达;ELISA法检测Shh和TGF-β1的含量;细胞免疫荧光染色检测Ptch1、Smo、E-cadherin、α-SMA和III型胶原蛋白表达。结果:AA不仅增加了TGF-β1、α-SMA和III型胶原的表达,降低了E-cadherin和ZO-1的表达,而且诱导了Shh和Smo mRNA表达的升高和Ptch1 mRNA表达的下降,提示AA促进小管上皮细胞表型转化和胶原累积,同时也激活了HH信号通路。环杷明干预AA作用后,Smo mRNA或蛋白表达下调,Ptch1 mRNA表达升高,这说明环杷明抑制了AA诱导的HH信号通路的活化。此外,环杷明也降低TGF-β1、α-SMA、I型和III型胶原的表达,提高BMP-7、ZO-1和E-cadherin的表达,这提示环杷明抑制了AA所致的上皮细胞的表型转化和基质累积。结论:环杷明可抑制AA所致的肾小管上皮细胞表型转化和基质累积,可能是通过靶向抑制HH信号的活化来实现的。; 洪炜龙陆红吴存造林成成梁勇王斯璐陈必成白永恒; 关键词：马兜铃酸表型转化

垂盆草提取物对马兜铃酸致大鼠肾小管上皮细胞损伤的改善作用被引量：7: 2013年; 目的研究马兜铃酸(AA)致肾小管上皮细胞损伤的分子机制及垂盆草提取物(SSBE)对AA损伤的干预机制。方法将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E加入AA 1,5,10,50和100 mg·L-1;或AA 10 mg·L-1+SSBE 10,50,100,500和1000 mg·L-1,培养24 h后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;Hoechst 33258染色和流式细胞仪检测NRK-52E细胞凋亡;ELISA和免疫细胞荧光染色检测巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达;实时荧光定量RT-PCR和Western蛋白质印迹法检测凋亡相关基因c-Myc和p53 mRNA和蛋白的表达。结果随着AA浓度的增加,NRK-52E细胞损伤愈加明显。与正常对照组相比,AA 10和50 mg·kg-1诱导细胞凋亡,并促进了c-Myc和p53明显表达(P<0.05);AA 10和50 mg·kg-1损伤肾小管上皮细胞后,MIF的分泌和表达量明显增加(P<0.05)。与AA 10 mg·L-1组相比,SSBE 1000 mg·L-1不仅减轻了AA所致的损伤,而且明显下调了MIF的表达(P<0.05)。同时,SSBE1000 mg·L-1也明显抑制了c-Myc和p53的表达(P<0.05)。结论 AA损伤肾小管上皮细胞,诱导细胞凋亡,并促进MIF的表达,进而影响炎症应激反应过程中巨噬细胞的浸润和活化。SSBE的干预可明显降低AA所致的损伤,这可能与MIF的表达下调有关。; 陆红陈必成胡丽萍洪炜龙林成成白永恒; 关键词：垂盆草植物提取物马兜铃酸巨噬细胞巨噬细胞游走抑制因子

肾小管上皮细胞表型转化在大鼠输尿管梗阻及再通中的意义被引量：1: 2013年; 目的:探讨肾小管上皮细胞表型转化(EMT)在大鼠输尿管梗阻及再通中的意义。方法:将24只SD大鼠随机分成假手术组(Sham,n=3)与单侧输尿管梗阻组(UUO,n=9),双侧输尿管梗阻组(BUO,n=3)与双侧输尿管梗阻后再通组(RBUO,n=9)。HE和Masson染色观察肾间质纤维化程度,qRT-PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、钙粘附蛋白(E-cadherin)和紧密连接蛋白(ZO-1)mRNA的表达,免疫组织化学染色检测α-SMA和E-cadherin蛋白的表达。结果:HE和Masson染色显示,随梗阻时间延长肾纤维化病变加剧,再通后纤维化程度明显减轻;α-SMA和vimentin mRNA蛋白在梗阻肾中表达增高,但Ecadherin和ZO-1表达明显下降;输尿管再通后,α-SMA和vimentin mRNA或蛋白表达随再通时间延长而下调,但E-cadherin和ZO-1表达明显升高。结论:输尿管梗阻可促使肾小管上皮细胞出现EMT,形成肌成纤维细胞,最终导致纤维化发生;输尿管再通可有效缓解EMT和间质纤维化程度。; 林成成陆红梁勇洪炜龙郑少玲陈必成白永恒; 关键词：输尿管梗阻表型转化纤维化

Sonic hedgehog信号通路在单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中的表达变化及意义被引量：10: 2012年; 目的:探讨Sonic hedgehog(Shh)信号通路在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织中的表达变化及意义。方法:将48只SD大鼠随机分为UUO模型组(n=24)和假手术组(n=24),梗阻术3、7和14 d后取其梗阻侧肾脏组织。用HE和Masson染色检测肾间质纤维化程度,免疫组织化学染色检测Shh通路分子Shh、Ptch1、Smo、Gli1及Ⅲ型胶原的蛋白表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肾组织中TGF-β1和Shh含量,real-time RT-PCR检测TGF-β1、I和Ⅲ型胶原及Shh通路分子mRNA表达。结果:HE和Masson染色显示,梗阻侧肾组织出现明显的纤维化病变,且随时间延长而加剧。TGF-β1、I和Ⅲ型胶原含量在梗阻肾中表达明显增高(P<0.05)。同时,Shh信号通路分子Shh、Smo和Gli mRNA和蛋白在梗阻肾中表达明显升高(P<0.05),而Ptch1 mRNA和蛋白的表达下调(P<0.01),提示Shh信号被激活。相关分析表明,Shh信号起始信号Shh水平的升高与TGF-β1含量增加呈明显的相关。结论:UUO大鼠诱导肾间质纤维化发生过程中,Shh信号通路分子被激活,推测可能的机制是活化的Shh信号通路诱导TGF-β1表达和释放,导致肾间质纤维化。; 白永恒陆红周琴林成成梁勇洪炜龙郑少玲陈必成; 关键词：HEDGEHOG 单侧输尿管梗阻转化生长因子Β

白藜芦醇对TGF-β1介导的肾小管上皮细胞表型转化和Hedgehog信号的影响被引量：4: 2015年; 目的探讨白藜芦醇(Res)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞(NRK-52E)表型转化(EMT)的影响及其分子机制。方法体外培养肾小管上皮细胞,分为对照组、诱导组(TGF-β1:5μg/L)、干预1组(TGF-β1+Res10μmol/ml)和干预2组(TGF-β1+Res100μmol/ml)。采用细胞免疫荧光和qRT-PCR技术检测EMT、细胞外基质和Hedgehog信号相关分子表达水平。结果 TGF-β1作用NRK-52E细胞后,不仅促进其受体TGF-β1R表达(P<0.05),且肌成纤维细胞标志物(α-SMA)和基质成分Ⅲ型胶原的表达增加,上皮细胞标志物(E-cadherin)表达下降。应用Res干预后,不仅抑制甚至逆转了上述结果,且抑制了TGF-β1介导的MMP-2/TIMP-2比值下降(P<0.05),促进基质成分降解。此外,Res也抑制TGF-β1诱导的PCNA表达上调(P<0 05),以及增殖相关的Hedgehog信号(Shh、Ptch1和Gli 1)活化(P<0.05)。结论 Res可能通过拮抗Hedgehog信号来抑制TGF-β1所诱导的NRK-52E细胞增殖、EMT和细胞外基质累积。; 王斯璐吴存造潘晓东洪炜龙林成成陈必成白永恒; 关键词：白藜芦醇转化生长因子-Β1 表型转化肾小管上皮细胞

Sonic hedgehog信号通路在单侧输尿管梗阻大鼠模型诱导肾间质纤维化中的表达及意义: 背景肾小管-间质纤维化(Tubulointerstitial fibrosis,TIF)几乎是所有慢性肾脏疾病发展到后期的病理学特征,TIF程度是反映肾功能下降严重程度和判断预后最重要的指标。因此,研究TIF的分子机制,...; 白永恒林成成梁勇洪炜龙陈必成陆红郑少玲徐玉兰; 关键词：信号通路; 文献传递

M1/M2型巨噬细胞极化参与肾组织炎症损伤和修复进程被引量：13: 2017年; 目的:研究M1/M2型巨噬细胞在肾组织炎症损伤和修复进程中的分布趋势及作用。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为缺血再灌注损伤(IRI)组和单侧输尿管梗阻(UUO)组两部分。IRI组分为假手术(sham)组及术后0、6、24和72 h组;UUO组分为sham组及梗阻3、7和14 d组;每个时相5只大鼠。全自动生化分析仪检测血肌酐和尿素氮水平;HE与免疫组织化学染色分别观察肾组织损伤及CD68的表达;流式细胞术检测M1(CD68+、F4/80+和CD16/32+)和M2(CD68+、F4/80+和CD206+)型巨噬细胞的分布;ELISA检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:IRI早期,肾组织损伤程度随再灌时间延长而加剧,并与CD68+巨噬细胞浸润呈一致性变化趋势;至24 h,组织损伤与巨噬细胞浸润最为严重;但之后随时间延长,损伤和巨噬细胞浸润反而减轻。UUO组中,肾损伤随梗阻时间延长而加剧,14d时纤维化明显;而巨噬细胞浸润第7天最为严重,之后又有减轻。流式细胞术分析显示IRI和UUO损伤早期浸润的巨噬细胞以M1型为主,i NOS表达较高;IRI和UUO损伤后期巨噬细胞均向M2型极化,Arg-1水平明显增加;巨噬细胞这种变化趋势与肾组织在不同时间节点出现损伤与修复表征存在明显相关性。深入分析发现,M1型巨噬细胞可通过诱导TNF-α高表达促进早期炎症损伤,M2型巨噬细胞通过提高TGF-β1水平促进后期纤维增生性修复。结论:UUO和IRI过程中均存在巨噬细胞极化:M1型巨噬细胞可诱导早期损伤,M2型巨噬细胞则参与损伤后期的纤维性修复。M1和M2型巨噬细胞在损伤修复过程中的极化特征可为临床治疗提供指导。; 吴莲凤陆红洪炜龙张行刘乐平白永恒; 关键词：输尿管梗阻缺血再灌注损伤 M2型巨噬细胞极化

基于特定基因系统发生树与单核苷酸多态性分析技术进行多瘤病毒基因分型研究: 洪炜龙林成成白永恒潘晓东王斯璐郑少玲杨亦荣陈必成

引物第3位引入突变的扩增阻滞法检测MDR1单核苷酸多态性: 本发明公开了可用于对MDR1rs1045642与rs2032582单核苷酸多态性(SNPs)进行分型的一组引物、反应程序和聚合酶链反应(PCR)试剂盒。试剂盒包括：试剂A、试剂B、含引物的PCR反应管、单核苷酸多态分型用...; 周蒙滔陈必成白永恒林成成梁勇郑建建张行刘乐平王斯璐谢洁雅洪炜龙; 文献传递

洪炜龙

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

洪炜龙

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈