王影
- 作品数：14 被引量：28H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市医学重点学科(专科)建设项目上海市黄浦区科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 无绿藻研究进展被引量：2
- 2017年
- 无绿藻是一种广泛存在于自然界的条件致病菌,感染动物时主要引起乳腺炎,对人的感染则主要表现为皮肤感染、鹰嘴滑囊炎和系统性感染。目前临床上仍将镜检和生化反应作为鉴定该菌的主要方法,但由于耗时长,主观影响较大,加之国内尚对无绿藻的认识不足,导致该菌的检出率较低。为提高对无绿藻的认识,文章对其生物学特性、致病性、流行病学特征、鉴定、耐药性及无绿藻病的临床表现等作一综述。
- 赵悦朱巍巍刘锦燕李文静王影史册项明洁
- 关键词：条件致病菌基因型
- 白念珠菌MRR2基因错义突变C1409A与氟康唑耐药的相关性被引量：2
- 2016年
- 目的研究锌簇转录因子——多药耐药调节因子2(Mrr2)编码基因MRR2错义突变C1409A与白念珠菌氟康唑耐药的相关性。方法利用白念珠菌工程菌株SN152构建MRR2基因敲除菌株,通过一步法克隆及定点突变技术构建MRR2基因C1409A突变型表达质粒,再用高效醋酸锂转染法将质粒片段转染入MRR2基因敲除菌株,异位表达于ADE2位点以构建MRR2基因定点突变菌株。通过体外药物敏感性试验及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析错义突变C1409A与氟康唑耐药的关系。结果氟康唑对MRR2基因C1409A定点突变的白念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)较对工程菌株SN152的MIC增加4倍,CDR1表达上调约3倍。结论 MRR2基因错义突变C1409A可上调白念珠菌CDR1表达并介导白念珠菌对氟康唑的耐药。
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- 关键词：白念珠菌氟康唑耐药错义突变
- 白念珠菌锌簇转录因子编码基因mrr2敲除与鉴定被引量：6
- 2015年
- 目的:构建白念珠菌mrr2基因敲除菌株。方法 :通过长引物PCR方法及融合PCR方法,以SN152菌株基因组DNA、带有筛选标记的质粒DNA为模板构建基因敲除组件;再用高效醋酸锂转染法将敲除组件转染入SN152菌株,并在相应营养缺陷的筛选板上培养生长,再通过2次同源重组的策略敲除mrr2的2条等位基因。结果:成功构建白念珠菌mrr2基因敲除菌株。结论:融合PCR策略可高效、快速构建白念珠菌基因敲除菌株。以SN152菌株为亲本菌的mrr2基因敲除株的构建,为进一步研究白念珠菌耐药机制奠定基础。
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- 关键词：白念珠菌基因敲除
- 融合PCR结合同源重组技术敲除白色假丝酵母菌FLO8基因被引量：2
- 2016年
- 目的运用融合PCR和同源重组技术敲除白色假丝酵母菌FLO8基因,并初步分析敲除菌株药物敏感性(药敏)情况。方法运用融合PCR将FLO8基因的上下游片段与筛选标记融合在一起构成同源敲除组件,再用高效醋酸锂转染法将敲除组件转染入白色假丝酵母菌SN152,在营养缺陷板上进行筛选,通过2次同源重组敲除FLO8的2条等位基因。采用点板法比较FLO8未敲除株与敲除株药敏情况。结果成功构建白色假丝酵母菌SN152 FLO8双等位基因缺失株,且耐药性FLO8^(-/-)>FLO8^(+/-)>SN152。结论融合PCR结合同源重组技术能高效、快速构建白色假丝酵母菌FLO8基因缺失株,白色假丝酵母菌FLO8基因与药敏相关,且FLO8拷贝数越少耐药性越强。
- 李文静刘锦燕史册王影赵悦项明洁
- 关键词：白色假丝酵母菌基因敲除耐药性
- 无绿藻病研究新进展被引量：2
- 2015年
- 无绿藻病是由条件致病菌无绿藻引起的一种较为罕见的疾病。近年来,随着免疫缺陷患者的增多,无绿藻病的发生率有上升趋势。无绿藻病以皮肤型多见,也可表现为鹰嘴滑囊及纤维组织感染或系统性感染。由于已报道的无绿藻病例数有限,其发病机制还不是很清楚,临床表现缺乏特异性,微生物学检查易被误认为酵母菌而漏检。为了提高对无绿藻病的认识,该文分析总结国内外已报道的无绿藻病,就其病因、发病机制、临床表现、诊断特征、治疗及预后等作一综述。
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- 关键词：发病机制
- 白念珠菌FLO8基因高表达菌株构建及鉴定
- 2016年
- 目的 :构建白念珠菌FLO8基因高表达菌株。方法 :将白念珠菌FLO8基因插入p CP20质粒载体ADH1启动子后,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)将ADH1-FLO8-Lox P-ARG4-Lox P-ADE2片段扩增,并通过同源重组技术将该片段整合至SN152的ADE2位点。结果:通过测序鉴定FLO8基因高表达质粒载体构建成功;通过同源重组及实时反转录PCR验证表明FLO8基因整合到SN152菌株的ADE2位点并且表达量增高。结论:以p CP20质粒为载体,通过同源重组等技术,可高效构建白念珠菌FLO8基因高表达菌株。
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- 关键词：白念珠菌
- 常用炎性指标在细菌感染性疾病诊断中的应用被引量：8
- 2015年
- 细菌感染性疾病是住院、急诊和重症监护病房（ICU）患者的常见病,临床表现缺乏特异度,易与其他疾病相混淆,尤其是院内感染,往往不易察觉、病情复杂而凶险,严重时常伴有多种并发症,如：多器官功能障碍综合征、脓毒症、败血症等,甚至危及生命[1]。其诊断常依赖血培养证实,传统的病原学检测耗时长、阳性率偏低,其他如白细胞计数（WBC）、红细胞沉降率（ESR）、体温等的敏感度和特异度均难以满足临床需要,
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- 关键词：细菌感染性疾病炎性指标多器官功能障碍外周循环红细胞沉降
- 无绿藻分子生物学鉴定与分型研究新进展被引量：2
- 2015年
- 以基因序列为鉴定基础的分子生物学方法以其客观、可重复性好等优点,被认为是分子鉴定无绿藻的"金标准"。该文对近年来应用在无绿藻鉴定和分型方面的实时定量PCR(Real-Time Quantitative PCR,RT-PCR)技术、单链构象多态性(Single Stranded Conformation Polymophism,SSCP)分析、限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)分析、高分辨率熔解曲线(High Resolution Melting,HRM)分析、质谱(Mass Spectrometry,MS)分析等分子生物学新技术和新方法进行综述。
- 李文静刘锦燕史册王影孙景勇项明洁
- 关键词：分子生物学质谱
- 白念珠菌唑类药物耐药机制与新型抗真菌药物研发
- 项明洁刘锦燕史册王影李文
- 科学技术领域：
该项目属基础医学领域，涉及临床白念珠菌(又称白假丝酵母)唑类药物耐药机制与新型抗真菌药物研发。
主要内容及特点：
白念珠菌作为条件致病菌，其发病率呈上升趋势，且因氟康唑临床上广泛应用，唑类药物耐药株...
- 关键词：
- 关键词：抗真菌药物分子流行病学
- 白假丝酵母菌唑类耐药相关的转录调控研究进展被引量：2
- 2016年
- 近30年来,白假丝酵母菌已成为导致免疫功能低下患者发病和死亡最常见的条件致病性真菌。随着临床上唑类药物的频繁使用,耐药菌株不断被检出,其耐药机制研究也备受关注。近年来,其在转录调控水平的机制研究也取得了很大进展,明确了耐药相关编码基因的顺式作用元件和反式作用因子,并部分阐述了相应的作用机制。文章就白假丝酵母菌唑类药物耐药相关的转录调控研究进展作一综述。
- 刘锦燕史册王影李文静赵悦朱巍巍项明洁
- 关键词：白假丝酵母菌转录调控外排泵顺式作用元件反式作用因子
