李文静
- 作品数：22 被引量：52H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市黄浦区科技攻关计划项目上海市医学重点学科(专科)建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 无绿藻研究进展被引量：2
- 2017年
- 无绿藻是一种广泛存在于自然界的条件致病菌,感染动物时主要引起乳腺炎,对人的感染则主要表现为皮肤感染、鹰嘴滑囊炎和系统性感染。目前临床上仍将镜检和生化反应作为鉴定该菌的主要方法,但由于耗时长,主观影响较大,加之国内尚对无绿藻的认识不足,导致该菌的检出率较低。为提高对无绿藻的认识,文章对其生物学特性、致病性、流行病学特征、鉴定、耐药性及无绿藻病的临床表现等作一综述。
- 赵悦朱巍巍刘锦燕李文静王影史册项明洁
- 关键词：条件致病菌基因型
- 白念珠菌MRR2基因错义突变C1409A与氟康唑耐药的相关性被引量：2
- 2016年
- 目的研究锌簇转录因子——多药耐药调节因子2(Mrr2)编码基因MRR2错义突变C1409A与白念珠菌氟康唑耐药的相关性。方法利用白念珠菌工程菌株SN152构建MRR2基因敲除菌株,通过一步法克隆及定点突变技术构建MRR2基因C1409A突变型表达质粒,再用高效醋酸锂转染法将质粒片段转染入MRR2基因敲除菌株,异位表达于ADE2位点以构建MRR2基因定点突变菌株。通过体外药物敏感性试验及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析错义突变C1409A与氟康唑耐药的关系。结果氟康唑对MRR2基因C1409A定点突变的白念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)较对工程菌株SN152的MIC增加4倍,CDR1表达上调约3倍。结论 MRR2基因错义突变C1409A可上调白念珠菌CDR1表达并介导白念珠菌对氟康唑的耐药。
- 王影张嵘刘锦燕史册李文静赵悦项明洁
- 关键词：白念珠菌氟康唑耐药错义突变
- 白念珠菌锌簇转录因子编码基因mrr2敲除与鉴定被引量：6
- 2015年
- 目的:构建白念珠菌mrr2基因敲除菌株。方法 :通过长引物PCR方法及融合PCR方法,以SN152菌株基因组DNA、带有筛选标记的质粒DNA为模板构建基因敲除组件;再用高效醋酸锂转染法将敲除组件转染入SN152菌株,并在相应营养缺陷的筛选板上培养生长,再通过2次同源重组的策略敲除mrr2的2条等位基因。结果:成功构建白念珠菌mrr2基因敲除菌株。结论:融合PCR策略可高效、快速构建白念珠菌基因敲除菌株。以SN152菌株为亲本菌的mrr2基因敲除株的构建,为进一步研究白念珠菌耐药机制奠定基础。
- 王影吕权真阎澜刘锦燕史册李文静项明洁
- 关键词：白念珠菌基因敲除
- 融合PCR结合同源重组技术敲除白色假丝酵母菌FLO8基因被引量：2
- 2016年
- 目的运用融合PCR和同源重组技术敲除白色假丝酵母菌FLO8基因,并初步分析敲除菌株药物敏感性(药敏)情况。方法运用融合PCR将FLO8基因的上下游片段与筛选标记融合在一起构成同源敲除组件,再用高效醋酸锂转染法将敲除组件转染入白色假丝酵母菌SN152,在营养缺陷板上进行筛选,通过2次同源重组敲除FLO8的2条等位基因。采用点板法比较FLO8未敲除株与敲除株药敏情况。结果成功构建白色假丝酵母菌SN152 FLO8双等位基因缺失株,且耐药性FLO8^(-/-)>FLO8^(+/-)>SN152。结论融合PCR结合同源重组技术能高效、快速构建白色假丝酵母菌FLO8基因缺失株,白色假丝酵母菌FLO8基因与药敏相关,且FLO8拷贝数越少耐药性越强。
- 李文静刘锦燕史册王影赵悦项明洁
- 关键词：白色假丝酵母菌基因敲除耐药性
- 体外氟康唑诱导光滑念珠菌和近平滑念珠菌耐药及相关机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的:研究光滑念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑耐药的易感性及其诱导耐药株的耐药机制。方法 :选取对氟康唑敏感的光滑念珠菌、近平滑念珠菌临床株各1株以及对氟康唑敏感的光滑念珠菌标准株ATCC2001、近平滑念珠菌标准株ATCC22019,利用浓度递增法,在体外用氟康唑诱导使其成为耐药株,采用实时定量PCR检测外排泵相关基因、其转录因子和靶酶编码基因表达,并对光滑念珠菌PDR1转录因子、近平滑念珠菌MRR1转录因子和ERG11基因进行PCR扩增和测序。结果 :光滑念珠菌较近平滑念珠菌更易被氟康唑诱导为耐药株,CDR1的过度表达为其主要的耐药机制,对PDR1转录因子测序后发现了新的突变位点Y932C、V847F。近平滑念珠菌诱导耐药株的MDR1表达显著增加,其MRR1转录因子中亦存在新的突变位点P295S、I799S。结论 :光滑念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑的耐药易感性不同,耐药机制也存在差异。新发现的转录因子突变位点有待验证其功能。
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- 关键词：念珠菌氟康唑耐药外排泵
- 白假丝酵母菌唑类耐药相关的转录调控研究进展被引量：2
- 2016年
- 近30年来,白假丝酵母菌已成为导致免疫功能低下患者发病和死亡最常见的条件致病性真菌。随着临床上唑类药物的频繁使用,耐药菌株不断被检出,其耐药机制研究也备受关注。近年来,其在转录调控水平的机制研究也取得了很大进展,明确了耐药相关编码基因的顺式作用元件和反式作用因子,并部分阐述了相应的作用机制。文章就白假丝酵母菌唑类药物耐药相关的转录调控研究进展作一综述。
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- 关键词：白假丝酵母菌转录调控外排泵顺式作用元件反式作用因子
- 白念珠菌与生物膜相关的耐药机制被引量：9
- 2017年
- 白念珠菌在医疗植入材料上形成生物膜,导致高死亡率感染。成熟的生物膜具有强耐药性,使得生物膜相关感染难以治愈。文章主要从白念珠菌生物膜外排泵基因、细胞外基质以及压力应答等3个方面探讨白念珠菌生物膜的耐药机制,综述该研究方向的最新进展,为白念珠菌的临床防治策略制定提供参考。
- 孟玲宁刘锦燕李文静赵悦项明洁
- 关键词：白念珠菌生物膜耐药机制细胞外基质
- 一种带有娱乐功能的儿童自动手指抽血装置
- 本发明公开一种带有娱乐功能的儿童自动手指抽血装置：承载底座一端固定儿童座椅、另一端固定卡通外壳单元，卡通外壳单元上设主体机箱，主体机箱内底部固定轨道，轨道上设有抽血单元，主体机箱正对儿童座椅的正面设有娱乐单元，主体机箱的...
- 李文静谢青郭清卢捷李青李自强汪佩芸
- 文献传递
- 无绿藻PCR ITS1-ITS2基因分型法的建立及应用
- 2018年
- 目的建立无绿藻(Prototheca)PCR ITS1-ITS2基因鉴定分型方法,并通过系统发育树以研究各型别无绿藻菌株间的亲缘关系。方法抽提5株无绿藻临床分离菌株的DNA,通过特异性引物扩增ITS1及ITS2区后,根据该区域核苷酸片段的差异进行基因分型,借助MEGA6.0软件建立系统发育树,并通过SSU rDNA测序加以验证。结果 5株菌株中,1株鉴定为P.zopfii hydrocarbonea,2株鉴定为P.wickerhamii。虽然由于数据库中缺乏P.zopfii portoricensis菌株ITS序列导致1、2号菌株不能被鉴定,但ITS区系统发育树中这两株菌仍被归为P.zopfii中独立的一簇,与SSU rDNA系统发育树相近,证明此分型方法无误。结论 PCR ITS1-ITS2基因分型法可作为一种有效基因分型方法用于鉴定和监测无绿藻感染。
- 赵悦朱巍巍刘锦燕孟玲宁王珏婷李文静项明洁
- 关键词：基因型ITS区
- 转录因子Flo8 G723R、T751D突变增强白念珠菌毒力
- 2016年
- 目的研究白念珠菌转录因子Flo8 G723R和T751D突变与毒力的关系。方法比较白念珠菌Flo8野生株SN152、Flo8回复株Flo8SN152、Flo8突变株Flo8^(G723R)和Flo8T751D感染小鼠的致死率和肾脏菌量负担,同时检测各菌株毒力因子的基因表达情况,分析Flo8突变与白念珠菌毒力的关系。结果与SN152和Flo8SN152相比,转录因子Flo8突变株Flo8G723R和Flo8T751D感染小鼠的致死率更高、肾脏菌量负担更高,毒力因子的基因表达也有不同程度的增强。结论转录因子Flo8 G723R和T751D突变使白念珠菌毒力增加,部分毒力因子的基因表达增强。
- 李文静沈韻刘锦燕史册王影赵悦项明洁
- 关键词：毒力白念珠菌
