王璞
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：首都师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市教委资助项目更多>>
- 相关领域：生物学动力工程及工程热物理农业科学医药卫生更多>>
- 高质量提取大豆叶片总RNA的改良方法被引量：9
- 2008年
- 豆科植物总RNA的提取相对比较困难,大豆叶片富含多糖、蛋白质,传统方法提取效果均不理想。在总RNA的提取方法Trizol法和热酚-氯化锂沉淀法的基础上,针对大豆叶片的特殊性,做了适当的改良,从而获得了完整性好,高纯度的大豆叶片总RNA,并成功进行了基因片段的RT-PCR实验,结果证实所获得的RNA完全可以适应后续实验要求。
- 姚滢秋陈星王璞梁燕闫梅肖白
- 关键词：大豆RNA
- 基因工程苯丙氨酸解氨酶对多发性骨髓瘤U266细胞的作用研究
- 2008年
- 目的为寻找对多发性骨髓瘤新的治疗方法，从基因工程乳酸乳球菌提纯苯丙氨酸解氨酶（PAL），探讨PAL酶对多发性骨髓瘤U266细胞系的影响作用。方法利用已构建成功的高表达PAL的基因工程乳酸乳球菌，结合物理、化学、生物学等方法，设计一种简便、高效提纯PAL酶的方法。培养人多发性骨髓瘤U266细胞系，在不同浓度基因工程PAL酶作用后，以MTT法检测细胞增生；流式细胞仪检测细胞凋亡；HPLC检测细胞培养液中苯丙氨酸（phe）浓度。结果①用本研究所设计方法从基因工程乳酸乳球菌NZ3900／pNZ8149-pal^art中提取的PAL酶比活性可达同量原菌的92．5％；②0．1～2．0U／ml的PAL提取液作用24h后能显著抑制U266细胞生长，并呈剂量依赖性；③只添加提取过程所用试剂的对照组细胞生长无明显抑制；④0．1U／ml、0．2U／ml、2．0U／ml的PAL酶作用24h后的MM细胞早期凋亡率分别为（21．92±0．95）％、（50．64±0．86）％、（90．86±2．91）％；⑤PAL酶作用24h后细胞培养液中phe浓度随PAL酶活性增加而降低。结论本研究所设计方法可从基因工程乳酸菌高效提取PAL酶；提取过程中的添加试剂对MM细胞生长无明显抑制作用；PAL酶能显著抑制MM细胞体外生长，诱导细胞早期凋亡；PAL酶可降低培养液中的phe水平，且phe浓度与MM细胞生长的抑制作用具有相关性。
- 陈星王璞刘晋纬肖白陈文明刘敬忠
- 关键词：苯丙氨酸解氨酶基因工程多发性骨髓瘤凋亡
- 从基因工程乳酸菌中高效提取苯丙氨酸解氨酶的方法研究
- 2008年
- 为从高表达苯丙氨酸解氨酶(PAL)的基因工程乳酸乳球菌NZ3900/pNZ8149-palart中有效提取所表达的PAL酶,针对乳酸乳球菌的特点,结合各种物理、化学、生物学等方法,探索出一条简便、高效的技术路线。对提取物进行了酶活性测定、分析及细菌活性鉴定。结果表明,该混合法可以完全导致细菌死亡,所提取的酶蛋白结构完整,其酶活性达到了等量活菌的92.5%,且该方法中所用到的各种试剂对体外培养细胞的生长无明显影响,为PAL酶在科研及生物医药领域的应用提供了可靠来源。
- 陈星王璞姚滢秋肖白
- 关键词：乳酸乳球菌
- 高耐毒性酿酒酵母的紫外诱变选育被引量：5
- 2007年
- 木质纤维素生产乙醇已成为世界各国研究开发的热点。但在酿酒酵母对木质纤维素稀酸水解产物的乙醇发酵中,对水解产物中的毒性物质非常敏感。菌种对水解液毒性物质耐受力相对较低是影响木质纤维素乙醇发酵工业化的主要因素之一。利用紫外线对酿酒酵母进行诱变,得到2株高效耐水解液中毒性物质突变株k和n。2株突变株发酵未脱毒的木屑稀酸水解产物的乙醇产量分别达到理论值的71.0%和61.3%,为进一步提高酿酒酵母耐毒性的研究和木质纤维素稀酸水解生产乙醇的工业化提供了基础。
- 王璞田沈王丹张兰波杨秀山
- 关键词：酿酒酵母紫外诱变乙醇发酵
