闫梅
- 作品数：25 被引量：115H指数：7
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金首都医学发展科研基金国家教育振兴行动计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高质量提取大豆叶片总RNA的改良方法被引量：9
- 2008年
- 豆科植物总RNA的提取相对比较困难,大豆叶片富含多糖、蛋白质,传统方法提取效果均不理想。在总RNA的提取方法Trizol法和热酚-氯化锂沉淀法的基础上,针对大豆叶片的特殊性,做了适当的改良,从而获得了完整性好,高纯度的大豆叶片总RNA,并成功进行了基因片段的RT-PCR实验,结果证实所获得的RNA完全可以适应后续实验要求。
- 姚滢秋陈星王璞梁燕闫梅肖白
- 关键词：大豆RNA
- 血友病A患者凝血因子Ⅷ基因内含子1倒位的检测被引量：2
- 2008年
- 目的检测中国血友病A（HA）患者中凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因内含子1倒位（inv1）的发生频率，并和国外相关资料相比较，明确部分中国HA患者的发病机制。方法用一期法检测158例无关家系HA患者的FⅧ活性（FⅧ：C），进行HA表型诊断；分别采用长距离和双管多重PCR技术检测内含子22倒位（inv22）和inv1；直接测序法进行FⅧ基因全长序列分析。结果在158例无关家系的HA患者中发现有2例（家系）inv1阳性，检出率为1．26％；对其中1例阳性患者家系进行调查，发现1例罕见女性HA患者为inv1携带者。对女性患者另一条染色体FⅧ基因进行全长测序，未发现有新基因突变。结论inv1在中国HA人群中发生率相对较低。女性HA患者为inv1杂合子，其发病考虑为与X染色体非随机失活有关。
- 闫振宇梁燕闫梅范连凯肖白华宝来刘敬中赵永强
- 关键词：血友病A基因内含子倒位
- 用SYBR-GreenⅠ实时荧光PER结合融解曲线分析法诊断α-地中海贫血被引量：7
- 2007年
- 目的建立自动化、高通量、准确快速检测缺失型α-地中海贫血基因型的技术。方法应用SYBR-Greenl进行两个实时荧光聚合酶链反应（real-time fluorescence polymerase chain reaction with SYBR-Green 1，SYBR-PCR），检测左缺（-α^4.2）、右缺（-α^3.7）等位基因，同时进行融解曲线（dissociation calve，DC）和Tm（melting temperature）值分析。PCR产物重组到pCR2．1，重组子梯度稀释作为模板检测灵敏度，确定两种等位基因型（-α^4.2，-α^3.7）的检测下限，并对110份DNA样品进行检测。结果检测-α^4.2和-α^3.7的PCR产物长度分别为1．65kb、1．9kb，Tm分别为（81．5±0．5）℃、（82．5±0．5）℃，检测下限分别为9×10^2个拷贝、4．3×10^2个拷贝。该检测技术的灵敏度较常规PCR结合琼脂糖凝胶电泳法高10倍。结论SYBR-Greenl实时荧光PCR结合融解曲线分析及Tm分析可以灵敏、准确地检测-α^4.2、-α^3.7、αα（包括α^Tα）及--^SEA4种等位基因，从而为各种缺失型α-地中海贫血做出基因诊断。该技术具有自动化程度高，不需荧光标记探针，成本低，易质控，防污染，高通量等优点，适于临床推广应用。
- 闫梅王立荣王战勇周艳梁燕肖白刘敬忠
- 关键词：实时聚合酶链反应Α-地中海贫血
- 运用SYBR-Green1实时PCR结合融解曲线分析诊断α-地中海贫血2
- 本文建立了运用SYBR-Green1进行的实时荧光定量PCR技术,结合融解曲线分析,灵敏准确快速地检测右缺(-α3.7),左缺(-α4.2)及无任何缺失的αα等位基因,从而为α-地贫2、α-地贫1,HbH病等各种缺失型α...
- 闫梅刘敬忠王立荣王战勇周艳肖白
- 关键词：Α-地中海贫血基因诊断聚合酶链反应
- 文献传递
- 运用实时荧光PCR技术诊断Bart’s水肿胎儿及——SEA携带者
- 目的运用新近建立成功的高度自动化的实时荧光 PCR 技术结合融解曲线分析进行α-地中海贫血基因诊断,携带者检查。方法运用 SYBR Greenl 进行4个实时荧光 PCR(SYBR-PCR),同时进行融解曲线分析(D．C...
- 闫梅王战勇梁燕范新萍肖白刘敬忠孙念怙王立荣
- 关键词：Α-地中海贫血实时聚合酶链反应基因诊断
- 文献传递
- 北京汉族群体21号染色体上4个STR位点的遗传多态性被引量：3
- 2005年
- 目的研究人类21号染色体上唐氏综合症关键区域内或附近的4个短串联重复序列(D21S1432、D21S2039、D21S1414、D21S1270)在中国汉族人群中的遗传多态性。方法应用Chelex法提取北京地区无血缘关系汉族253份个体血样DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增,非变性聚丙酰胺凝胶电泳或ABI鄄310电泳分型结合测序进行STR分型。结果得到4个STR基因座等位基因频率、各基因座的杂合度、个体识别率、多态信息含量等群体遗传学数据。4个位点基因型分布均符合Hardy鄄Weinberg平衡定律。结论21号染色体上4个STR位点多态性较好,基因型分布符合Hardy鄄Weinberg平衡定律,具有较高的个体识别率,在法医学及唐氏综合征的基因诊断和产前基因诊断研究中具有较高的应用价值。
- 朱金玲陈震斌刘敬忠梁燕闫梅肖白
- 关键词：遗传多态性21号染色体产前基因诊断唐氏综合症汉族群体STR位点
- 血友病甲基因分析技术的改进及其在产前诊断中的应用被引量：9
- 2007年
- 目的对血友病甲基因分析技术进行改进并应用于携带者检查和产前诊断。方法长距离聚合酶链反应方法直接检测凝血因子Ⅷ第22内含子倒位，对非倒位家系用FVH基因内限制酶切位点XbaI、HindⅢ、二核苷酸重复序列多态性位点STR13和STR22，以及基因外可变数目串联重复序列DXS52（St14）位点进行基因连锁分析。结果52个家系共检出71位携带者。21个家系为第22内含子倒位，28个家系经连锁分析得到明确诊断，3个家系无法诊断，可诊断家系占94．2％。为18个家系做胎儿产前诊断，其中10例诊断为血友病甲胎儿；诊断7例正常男胎和1例携带者女胎，随访1年发育正常。结论应用长距离聚合酶链反应和多位点基因连锁分析技术可以快速有效地进行血友病甲携带者检查和产前诊断。
- 梁燕赵耘王战勇闫梅肖白刘敬忠
- 关键词：血友病甲产前诊断
- 肾移植术后微嵌合的研究被引量：4
- 2000年
- 目的 探讨肾移植术后微嵌合的出现与移植肾功能、排斥反应间的关系。 方法 采用对人类性别决定基因SRY扩增的多重PCR方法 ,对 89例男性供肾的女性肾移植患者外周血的微嵌合进行检测分析。 结果 此方法的特异性为 10 0 % ,灵敏度为 1∶10 4 ～ 1∶10 5,总的微嵌合发生率为 5 5 .1% (49/ 89) ,6个月内微嵌合的发生率为 37.0 % ,6～ 18个月内发生率为 5 1.5 % ,18个月以上发生率为 75 .8% ,三组间比较差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。 12例患者术后 10天至 6个月连续观察发现 :微嵌合出现成波纹式动态变化 ,嵌合阳性病人的肾功能Cr值好于阴性病人 ,但二者在排斥反应发生次数上差别无显著性意义 (P >0 0 5 )。 结论 随着生存时间延长 ,微嵌合的发生率升高。微嵌合反映了供受体间移植物抗宿主反应 (GVH)和宿主抗移植物反应 (HVG)的动态平衡 ,与排斥反应及免疫耐受间的关系尚不明确 ,它可能是免疫耐受最终表现的结果。
- 王建文高居忠闫梅刘敬忠管德林许建军朱章菱
- 关键词：肾移植移植肾功能排斥反应
- 荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA被引量：20
- 2001年
- 目的 建立检测HBV病毒DNA的荧光定量PCR法 (FQ PCR) ,并与运用常规凝胶电泳技术观察特异扩增带检测的结果加以比较。方法 合成扩增HBVDNA 314bp特异保守序列的 1对引物及 1条带 2个荧光基团的寡核苷酸探针。用PE 5 70 0型定量PCR仪完成PCR反应及产物的荧光定量检测。同时PCR产物经琼脂糖凝胶电泳 ,EB染色 ,UVP(凝胶成像仪 )检出有 314bp带者为阳性或弱阳性。结果 建立了检测HBVDNA的荧光定量PCR技术 ,用已知HBV阳性模板不同拷贝数的标准溶液测得标准曲线Ct,原始拷贝数在 10 5 ml以上者为阳性 ,用定量及定性PCR 2种方法检测 6 98例血清标本的结果表明 :用FQ PCR技术共检测出 2 0 4例为阳性 ,阳性率 2 9.2 % ;用定性PCR观察到 193例有阳性特异带 ,阳性检出率为 2 7.6 5 %。没有发现用定性PCR检测为阳性而用FQ PCR检测为阴性者。结论 FQ PCR检测HBVDNA较普通定性PCR技术具有操作简便、灵敏度更高 ,减少发生污染可导致假阳性结果的可能性及自动化程度高等优点 。
- 刘敬忠谭淑珍吴燕何蕴韶肖白周艳雷箴闫梅邵伟
- 关键词：聚合酶链反应乙型肝炎病毒DNA乙型肝炎
- 中国北方汉族人群哮喘患者受体基因多态性研究被引量：4
- 2001年
- 邢军王辰刘敬忠闫梅黄克武肖白
- 关键词：哮喘受体汉族
