程金华
- 作品数：39 被引量：250H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 一种鉴别牛及其早期胚胎性别的方法
- 通过改善传统PCR反应的技术参数，本发明建立了一种操作时间短、污染几率低、结果准确可靠的牛性别，特别是牛早期胚胎性别的鉴定方法。首先将传统PCR方法的三温度循环改变为两温度循环，并且减少每个温度的反应时间。具体地说，本发...
- 朱化彬王栋郝海生王宗礼程金华杨波
- 文献传递
- 鲁西黄牛体细胞克隆保种技术的研究被引量：1
- 2006年
- 以体外培养的鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞作核供体,研究利用体细胞克隆技术保存我国地方黄牛优良品种的技术方法。通过组织块培养法建立的鲁西黄牛(1♂,4♀)成纤维细胞系,作为核移植供体细胞,利用屠宰场母牛卵巢卵母细胞经体外培养成熟后作为核受体进行核移植,试验结果表明:重构胚的融合率为62.5%(242/387),分裂率为63.6%(154/242),体外培养第7天囊胚发育率为42.9%(66/154)。体外培养第7天的囊胚的内细胞团细胞(ICM)与滋养层细胞数平均为37和47,ICM占44.2%。体外发育到7 d的囊胚新鲜胚胎的移植妊娠率(新鲜胚胎)移植受体10头,60 d妊娠率为20%(2/10)。
- 朱化彬程金华孙秀柱王栋戴蕴平龚国春万荣郝海生
- 关键词：鲁西黄牛成纤维细胞系体细胞克隆
- 一种检测牛CVM携带者的特异性扩增引物
- 本发明提供了一种荷斯坦奶牛脊柱畸形综合征(CVM)携带者的检测引物，该引物针对荷斯坦奶牛脊柱畸形综合征致病基因，通过PCR错配技术设计而成，其具有SEQ ID No.1&2所示核苷酸序列，通过该引物可以扩增出10...
- 朱化彬王栋王帅郝海生杜卫华程金华王宗礼
- 文献传递
- 牦牛Y染色体PCR扩增产物的克隆和测序
- 本试验采用牛的一对Y染色体特异引物对牦牛基因组进行PCR扩增,检测到了牦牛公牛的一条特异性产物,经过克隆测序,得到一条长141bp的核苷酸序列,采用BLASTN软件在GenBand中比对,没有发现与其相似的同源序列.该序...
- 王栋杨波朱化彬郝海生程金华罗应荣
- 关键词：牦牛Y染色体PCR扩增同源性克隆测序
- 文献传递
- 鉴定牛早期胚胎性别PCR反应体系的建立及优化研究被引量：2
- 2006年
- 根据牛Y染色体特异重复序列设计了一对引物,同时设计了一对牛常染色体引物作内标引物,研究了引物浓度、dNTP浓度、M g2+浓度、酶浓度、退火温度以及循环次数等因素对PCR方法鉴定牛胚胎性别的影响。试验结果表明,引物浓度、退火温度和循环次数对该反应体系影响较大,而dNTP浓度、T aq酶含量以及M g2+浓度的影响较小。
- 杨波朱化彬程金华仲跻峰王栋郝海生
- 关键词：多重PCR性别鉴定
- 奶孕酮放射免疫测定改善奶牛受胎力被引量：9
- 1998年
- 对北京郊区５个奶牛场的１２２４头繁殖母牛进行了放免测定。从产犊后第１次配种开始，每一发情周期采集３个奶样（０ｄ、输精后１０～１２ｄ和２２～２４ｄ），取回实验室用放免法测出奶样中孕酮浓度，判断出母牛的生理状态：妊娠（５２０％）、未受精（２２７％）、卵巢静止（５８％）、持久黄体（３８％）、配种不适时（７１％）或周期不正常（８６％）等。将测定结果和判断意见及时反馈给奶牛场的配种员和兽医，使他们据此并对照直肠检查结果作出正确诊断，从而采取措施，使母牛尽早受胎。本试验共监测了１８０１个发情周期。
- 蔡正华卢雁平程金华宣柏华方雁军王运亨郑明国张云孙永芳
- 关键词：奶牛放免测定繁殖状态
- 哺乳动物X、Y精子间差异膜蛋白的研究进展
- 在精子形成过程中,存在性染色体特异基因的表达,这是X、Y精子膜蛋白差异形成的基础.尽管细胞间桥使精子细胞间共享了基因表达产物,但雄性传递偏移现象和性别偏移现象的发生又证明两类精子间非共享蛋白的存在,同时H-Y抗原表位的成...
- 王栋程金华朱化彬郝海生王振铃
- 关键词：精子基因表达性染色体
- 文献传递
- 一种鉴别牛及其早期胚胎性别的方法
- 通过改善传统PCR反应的技术参数，本发明建立了一种操作时间短、污染几率低、结果准确可靠的牛性别，特别是牛早期胚胎性别的鉴定方法。首先将传统PCR方法的三温度循环改变为两温度循环，并且减少每个温度的反应时间。具体地说，本发...
- 朱化彬王栋郝海生王宗礼程金华杨波
- 文献传递
- 鉴别牛早期胚胎性别PCR方法引物的设计与筛选被引量：9
- 2005年
- 根据牛Y 染色体特异重复序列、睾丸特异蛋白基因以及性别决定基因序列设计合成5对公牛Y 染色体特异引物, 依据牛骨胳肌α肌动蛋白前体基因和微卫星 DNA 序列设计合成 4 对牛 DNA特异引物(内标引物)。单重PCR扩增牛基因组DNA,筛选出4对牛Y 染色体特异引物和1对牛DNA特异内标引物。将不同的 Y 染色体特异引物与内标引物组合,多重PCR扩增牛基因组DNA、已知性别的牛成纤维细胞和克隆胚胎,筛选出 2 个可用于牛早期胚胎性别鉴别的PCR引物组合: B34/A12 和B78/A12。
- 王宗礼王栋程金华杨波朱化彬郝海生郭燚
- 关键词：性别鉴别Α肌动蛋白早期胚胎特异蛋白
- 切割取样后胚胎的冷冻保存技术的研究被引量：3
- 2006年
- 研究了切割取样后小鼠胚胎和牛胚胎冷冻-解冻的技术方法。结果表明:(1)分别以10%甘油、10%乙二醇作为冷冻液以及在以上两种冷冻液中分别添加10%葡聚糖+0.1 mol/L蔗糖作为冷冻液常规方法冷冻切割后的小鼠胚胎,冷冻-解冻后体外培养72 h总发育率分别为56.9%(259/455)、81.8%(604/738)、84.8%(540/637)和59.5%(308/518)。(2)取样后胚胎体外短暂培养(0~4 h)并不能提高切割取样后小鼠胚胎冷冻-解冻体外培养发育率。(3)切割取样小鼠胚胎在25%甘油+0.25 mol/L蔗糖+20%的血清为冷冻液,在-100^-110℃左右熏蒸2 min快速冷冻后体外培养发育率为73.3%(33/45),切割取样牛胚胎快速冷冻-解冻移植妊娠率为57.1%(4/7)。
- 程金华朱化彬王栋郝海生
- 关键词：小鼠胚胎冷冻保存
