范必勤
- 作品数：109 被引量：503H指数：15
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 受精和人工激活诱导的小鼠卵内游离钙离子变化(英文)被引量：2
- 1996年
- 目的:研究哺乳类动物卵母细胞激活机制。方法:将休止于第二次成熟分裂中期的小鼠卵母细胞负载Fura 2-AM后用乙醇,钙离子载体,电脉冲或受精等激活;采用Spex AR-CM-MIC阳离子检测系统测定卵激活过程中细胞内游离Ca^(2+)浓度变化;电镜下检测卵激活后皮质颗粒释放。结果:在含Ca^(2+)(1.7mmol·L^(-1))的IVF液中,精子受精诱发卵内Ca^(2+)浓度波动,这种Ca^(2+)波动持续达3—4h直至受精卵发育至原核期消失。当外Ca^(2+)升高至5.0mmol·L^(-1)时Ca^(2+)波动加快;去除外Ca^(2+)后Ca^(2+)波动很快消失;将卵移入含Ca^(2+)IVF后又恢复Ca^(2+)波动。出现Ca^(2+)波动的卵随后均排出第二极体并形成原核。胞内注射Ca^(2+)螯合剂依他酸(200μmol·L^(-1))抑制受精诱导的Ca^(2+)波动则阻止卵激活。胞内注射肝素(MW=3500,100μmol·L^(-1))不能阻止受精Ca^(2+)波动。乙醇,钙离子载体和1次电脉冲刺激诱导卵内Ca^(2+)浓度升高1次并且仅诱导大龄卵(>18h CG)激活。刚排出卵的激活则需要[Ca^(2+)]_i多次升高诱导。人工激活诱导卵出现与受精相似的皮质颗粒释放。卵内注射Ca^(2+)螯合剂抑制[Ca^(2+)]_i升高则阻断卵激活的一系列反应。结论:细胞内游离Ca^(2+)升高是诱导卵激活的重要信号;受精与人工激活诱导的[Ca^(2+)]_i升高及Ca~(
- 邓满齐范必勤
- 关键词：卵母细胞受精电刺激
- 猪卵母细胞体外成熟与冷冻附睾精子的体外受精被引量：10
- 1991年
- 由屠宰母猪卵巢分离得到505枚卵母细胞,经成熟培养,其中468枚卵丘细胞扩张,成熟率为92.7％。采用冷冻的附睾精子授精,受精率为41.9％(57/136),其中单精受精率36.8％(50/136),多精受精率5.1％(7/136)。授精卵体外培养24和48小时后的卵裂率分别为5.3％(15/258)和12.9％(30/232)。把35枚早卵裂期胚胎和250枚未见卵裂的1-细胞期受精卵移入4头受体母猪的输卵管内,其中2头妊娠,分别于1990年4月10日和29日正常分娩,共生产仔猪21头。
- 江金益钟声熊慧卿范必勤
- 关键词：体外成熟体外受精冷冻精子
- 牛胚胎的多代克隆
- 2001年
- 牛胚胎多代克隆的目的是通过重复细胞核移植产生大量的胚胎和牛犊。现已建立了一些重要的方法 ,例如 :采用体外成熟的卵母细胞为胞质受体 ;第二次减数分裂末期去核的先进技术 ;采用体外成熟、体外受精和体外培养形成的胚胎以及经冷冻保存的胚胎为核供体 ;核移植胚体外培养可发育至囊胚期 ;克隆胚可冷冻长期保存等。迄今已连续克隆 6代获得囊胚期胚胎 ,移入受体母牛产生了第 1至 3代的克隆牛。从 1枚牛胚胎通过 3代克隆获 43枚胚胎 ,通过 4代克隆获 54枚胚胎。由此可见 。
- 范必勤
- 关键词：牛胚胎细胞核移植
- 波尔山羊的品种标准介绍兼论引种意义被引量：15
- 1998年
- 波尔山羊的品种标准介绍兼论引种意义范必勤（江苏省农业科学院南京２１００１４）波尔山羊（ｔｈｅｉｍｐｒｏｖｅｄＢｏｅｒｇｏａｔ）是体型外貌和生产性能较为稳定的世界著名肉用山羊，原产南非，现已分布于澳大利亚、新西兰、德国、美国和非洲的一些国家。从１９９５...
- 范必勤
- 关键词：波尔山羊
- 猪胚胎冷冻保存的研究进展被引量：1
- 1996年
- 一、引言自1972年小鼠胚胎冷冻首次取得成功以来,胚胎的冷冻技术已逐渐应用到多种哺乳动物。现在包括牛、绵羊在内的多种家畜物种的胚胎冷冻保存已经成为一种常规的技术。然而利用冷冻保存的胚胎生产出活的仔猪仍然处在摸索阶段。
- 刘红林范必勤王公金
- 关键词：胚胎冷冻保存
- 早期转基因兔胚的培养及外源基因滞留的研究被引量：2
- 1994年
- 用显微注射法导入外源SMTPGH基因的早期兔胚进行体外培养,并用PCR技术对单个胚中的外源基因进行了检测,以探讨SMTPGH基因在早期兔胚中的滞留情况。研究结果表明早期转基因兔胚在Tc199+10％FCS培养液中有75％发育到囊胚期;其外源基因在8细胞期前没有丢失,随后有逐渐丢失的现象。到胚胎的发育后期,其外源基因的滞留率接近于整合率。
- 陈清轩刘雷宋德秀范必勤王斌
- 关键词：体外培养
- 克隆动物研究进展被引量：6
- 2000年
- 本文介绍了世界上和中国采用细胞核移植技术克隆动物的研究历史。综述了细胞核移植的程序、方法和影响因素 ,包括受体卵母细胞的去核、供体细胞核的制备、核移植、激活、受体细胞与供体细胞的融合、重组胚的体内和体外培养以及胚胎移植产生克隆动物。对克隆动物研究和应用前景进行了讨论。近期的研究结果表明 ,多代克隆可产生大量遗传性相同的动物 ,不久的将来克隆技术在商业上的应用将成为现实。
- 范必勤
- 关键词：哺乳动物克隆动物细胞核移植无性繁殖
- 小鼠腔前卵泡体外发育研究被引量：1
- 2001年
- 目的 :通过小鼠腔前卵泡 (preantralfollicles)体外培养 ,探讨白蛋白、血清、FSH对腔前卵泡体外发育的影响。方法 :在培养液中添加白蛋白、血清或血清 +FSH ,观察其对小鼠腔前卵泡体外生长发育的影响。结果 :白蛋白组、血清组、血清+FSH组腔前卵泡体外存活时间分别为 2 .6 4± 1.37d、4.83± 1.6 8d和 6 .72± 3.87d ,3组间有极其显著性差异 (P <0 .0 0 1)。血清 +FSH组中腔前卵泡出现卵泡腔的比率为 14.86 % (2 5 / 16 8) ,排卵率为 17.2 6 % (2 9/ 16 8) ,卵母细胞成熟率为 48.2 8% (14/2 9)。血清组和血清 +FSH组均有卵泡聚集现象。结论 :血清和FSH均能显著延长小鼠腔前卵泡体外存活时间 ,促进生长发育 ,并能引起卵泡的聚集。FSH在卵泡腔的形成中有决定性的作用。
- 施旭东孙贝加王衡王公金糜祖煌王金锋汪河海曹步凯范必勤陈杰
- 关键词：小鼠腔前卵泡体外培养
- 猪多能干细胞的分离、鉴定与应用前景被引量：1
- 2005年
- 多能干细胞来源于着床前的囊胚内细胞团或早期胎儿的原生殖细胞,具有分化为多种特定细胞类型的能力;可在体外适宜培养条件下无限增殖并保持未分化状态,并且具有正常的核型。本文重点讨论猪多能干细胞分离建系的研究现状及其应用前景,并对嵌合体形成及生殖系传递能力的实验进展情况进行了分析。
- 芮荣范必勤
- 关键词：多能干细胞嵌合体
- GnRH─A缓释胶囊诱导泰和鸡母鸡排卵的生殖内分泌特性被引量：8
- 1996年
- 应用辐照酶固定化技术制备的促性腺激素释放激素类似物［（Ｄ－Ｌｅｕ６，Ｐｒｏ９）－Ｇｎ－ＲＨＮ－乙酰胺，简称ＧｎＲＨ－Ａ］缓释胶囊是一种激素药剂。将其用于促进青年泰和鸡母鸡性早熟和刺激排卵的研究，结果表明：在ＧｎＲＨ－Ａ胶囊恒定释放ＧｎＲＨ－Ａ过程中，试验组鸡群开产期比对照组提前７天，且产蛋率增高，产蛋高峰期尤为显著（Ｐ＜０．０１），但试验组平均蛋重比对照组略低。试验组血浆孕酮（Ｐ４）浓度显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），两组鸡群开产前和产蛋高峰期出现两个浓度峰，而开产后至产蛋高峰期前血浆孕酮浓度维持在较低水平。试验组血浆雌二醇（Ｅ２）浓度开产前明显高于对照组，而产蛋高峰期显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），其余期间两组间无显著差异。ＧｎＲＨ－Ａ胶囊埋植期间诱发出两个促乳素释放高峰，分别出现在开产期和产蛋高峰后期，试验组两个峰值均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。上述结果提示，该胶囊长期缓慢释放ＧｎＲＨ－Ａ可有效地调控泰和鸡母鸡血浆孕酮和雌二醇浓度变化，并影响促乳素的分泌，刺激母鸡生殖器官发育。
- 王公金黄夺先赵伟赵伟范必勤朱建辉
- 关键词：泰和鸡母鸡GNRH-A缓释胶囊诱导排卵
