袁玉兰
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：北京生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 6株金黄色葡萄球菌菌株的鉴定被引量：5
- 2014年
- 目的对6株金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus,简称金葡菌）菌株进行鉴定,为研制相关疫苗提供参考。方法将稀释的6株疫苗研制用备选金葡菌菌株49521、12602、49525、12605、55804、10832及质控菌株25923、12228菌悬液划线接种TSA平板及Columbia血平板,观察菌落形态,并涂片染色镜检;利用API Staph生化试剂盒、staphylase test血浆凝固酶检测试剂盒及30μg头孢西丁药敏纸片对菌株进行鉴定;利用PCR法鉴定菌株16S r RNA基因、荚膜基因型及mec A基因;用系列稀释的菌悬液经腹腔注射BALB/c小鼠,初步测定菌株毒力。结果6株金葡菌经平板培养,可见圆形、凸起、不透明、有光泽的菌落,Columbia血平板培养的菌落周围可见透明溶血环,镜检结果为革兰阳性球菌,呈单、双或葡萄串状排列。6株菌株的生化反应结果相同,且与质控菌株25923反应结果一致;6株菌株的凝固酶试验结果均为阳性,均对头孢西丁敏感,均未扩增出mec A基因片段,为甲氧西林敏感菌株（methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA）。6株菌株均扩增出1 544 bp的16S r RNA基因片段,与Gen Bank中的参考序列NR_075000.1的同源性均为99%;菌株49521、12605、55804、10832均扩增出340 bp的cap5基因片段,与Gen Bank中序列U81973.1的同源性为99%-100%;菌株12602、49525均扩增出171 bp的cap8基因片段,与Gen Bank中序列U73374.1的同源性均为100%。6株菌株的半数致死量（LD50）均在2.5×10^8-2.5×10^9 CFU之间。结论对6株疫苗研制用备选金葡菌进行了鉴定,为疫苗研制中菌株鉴定及不同荚膜型菌株的选择提供了参考。
- 郭京蓉袁玉兰周继唯林海涛焦小玲
- 关键词：金黄色葡萄球菌毒力
- 几株b型流感嗜血杆菌多糖结合物的免疫原性检定
- 2012年
- 目的从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，研究不同菌株荚膜多糖结合物的免疫原性。方法提取基因组，通过型特异和荚膜型基因特异引物，利用PCR检定b型流感嗜血杆菌；不同纯化多糖分别与破伤风类毒素（TT）进行耦联结合，结合物原液经稀释免疫小鼠，通过两针免疫，采血进行免疫效力测定。结果5株b型流感嗜血杆菌通过PCR法均能获得预期大小的型特异（482bp）和荚膜型（343bp）基因片段，BLAST分析显示，各菌之间型特异和荚膜型序列比对，其同源性均为100％，各菌型特异和荚膜型序列分别与GenBank X78559．1和M19995．1序列比对，同源性分别为99％和100％；ELISA检测显示，4株不同菌株来源的荚膜多糖结合物（PRP-TT）的小鼠免疫效力差异无统计学意义。结论通过PCR法从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，纯化的不同荚膜多糖结合物小鼠免疫原性基本一致。可供不同Hib多糖结合物免疫原性的研究参考数据。
- 袁玉兰郭京蓉周继唯高华
- 关键词：流感嗜血杆菌荚膜多糖免疫原性
