詹佳
- 作品数：42 被引量：100H指数：6
- 供职机构：武汉大学中南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金武汉市青年科技晨光计划湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 细胞焦亡相关指标与大麻素2型受体表达量的相关性分析
- 2020年
- 目的:探讨在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞焦亡模型中,焦亡相关指标与大麻素2型受体(CB2R)表达量的相关性。方法:体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞株,用不同浓度LPS刺激巨噬细胞建立细胞焦亡模型。用Western Blot和实时荧光定量(RT-PCR)法检测CB2R和焦亡相关指标NLRP3、Caspase-1、Caspase-11和GSDMD的表达,并采用Pearson法分别分析NLRP3、Caspase-1、Caspase-11和GSDMD与CB2R之间的相关性。结果:巨噬细胞在接受LPS刺激后,CB2R和焦亡相关指标NLRP3、Caspase-1、Caspase-11、GSDMD的表达升高,且随着LPS刺激浓度的上升,以上指标的表达均明显上调(P<0.05)。相关性分析显示,NLRP3、Caspase-1、Caspase-11、GSDMD表达均与CB2R呈显著正相关(r>0.9,P<0.01)。结论:在不同浓度LPS作用下,巨噬细胞焦亡与CB2R的表达呈高度正相关,CB2R可能参与了巨噬细胞焦亡的调节过程。
- 刘安鹏张彬刘强胜郑菲袁清红詹佳陈凯
- 关键词：巨噬细胞脂多糖
- 盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时β-抑制蛋白-1表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时β-抑制蛋白-1表达的影响。方法健康雌性昆明小鼠30只，体重18～20g，采用随机数字表法，将其分为3组（n=10）：假手术组（s组）、脓毒症组（CLP组）和盐酸戊乙奎醚组（PHCD组）。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。PHCD组于造模前1h腹腔注射盐酸戊乙奎醚0．45mg／kg，S组和CLP组给予等容量生理盐水。造模后12h，收集肺泡灌洗液（BALF），测定总蛋白浓度；取肺组织，行肺损伤评分，测定肺湿，干重（W／D）比和肌球蛋白轻链激酶（MLCK）、血管内皮钙黏蛋白（VE—cadherin）、β-抑制蛋白-1的表达。结果与s组比较，CLP组和PHCD组肺损伤评分、肺W／D比和BALF总蛋白浓度、肺组织MLCK表达升高，VE—cadherin表达降低，CLP组β-抑制蛋白-1表达降低，PHCD组β-抑制蛋白-1表达升高（P〈0．05或0．01）；与CLP组比较，PHCD组肺损伤评分、肺W／D比和BALF总蛋白浓度、肺组织MLCK表达降低，VE-cadherin和β-抑制蛋白-1表达升高（P〈0．05或0．01）。结论盐酸戊乙奎醚预先给药可通过上调β-抑制蛋白-1的表达，降低肺微血管通透性，从而减轻脓毒症小鼠急性肺损伤。
- 詹佳李进杰肖飞王焱林张宗泽王轶芃
- 关键词：胆碱能拮抗剂抑制蛋白类脓毒症
- Toll样受体4对失血性休克小鼠肺组织血红素加氧酶和诱导型一氧化氮合酶的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察Toll样受体4（TLR4）对失血性休克小鼠所致急性肺损伤（ALI）中肺组织血红素加氧酶-1（HO-1）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的影响。方法TLR4基因突变型小鼠C3H／HeJ和野生型小鼠C3H／HeN（48只），随机分为假手术组和失血性休克（6、24、48h）组。采用小鼠失血性休克致急性肺损伤模型，观察血气分析，HO-1和iNOS蛋白表达，白细胞介素-6（IL-6）水平，肺组织肺湿／干重比和病理形态学改变。结果与假手术组比较，C3H／HeN和C3H／HeJ小鼠失血休克后24h肺组织HO-1蛋白强阳性表达，IL-6含量明显增加为365．38±48，26和300．89±39．34；6h肺组织iNOS蛋白强阳性表达（P〈0．01）。与C3H／HeN小鼠比较，C3H／HeJ小鼠失血休克后24h肺组织HO-1、IL-6含量和W／D明显降低（P〈0．05）；6h肺组织iNOS蛋白显著减少为0．049±0．013。病理学检查显示失血休克后各时点肺组织损伤程度较假手术组明显加重。结论TLR4在失血性休克后ALI过程中被激活，通过影响HO-1和iNOS的表达参与了失血性休克致急性肺损伤的过程。
- 张宗泽陈畅詹佳王焱林
- 关键词：TOLL样受体4血红素加氧酶-1诱导型一氧化氮合酶
- M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高中的作用：与MAPK信号通路的关系
- 2017年
- 目的评价M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高中的作用及其与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的关系。方法将人肺微血管内皮细胞以1×105个/ml的密度接种于6孔板（2 ml/孔）或培养瓶（4 ml/瓶）中，采用随机数字表法分为6组（n＝5）：空白对照组（C组）、M3受体shRNA转染组（shRNA组）、脂多糖组（LPS组）、盐酸戊乙奎醚＋脂多糖组（P＋LPS组）、脂多糖＋M3受体shRNA转染组（LPS＋shRNA组）和盐酸戊乙奎醚＋脂多糖＋M3受体shRNA转染组（P＋LPS＋shRNA组）。shRNA组、LPS＋shRNA组和P＋LPS＋shRNA组以含2.5 nmol/L M3受体shRNA的质粒转染细胞。LPS组和LPS＋shRNA组于孵育24 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1 h；P＋LPS组和P＋LPS＋shRNA组于孵育24 h时加入终浓度为2 μg/ml的盐酸戊乙奎醚，孵育1 h后加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS再孵育1 h。采用Transwell法测定肺微血管内皮细胞通透性，采用Western blot法测定磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）和磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK1/2）的表达水平，采用免疫荧光染色法测定热休克蛋白27（HSP27）的表达水平，采用实时定量PCR法测定M3受体mRNA的表达。结果与C组比较，shRNA组M3受体mRNA表达下调，LPS组细胞通透性增高，p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27、和M3受体mRNA表达上调（P〈0.05）；与LPS组比较，P＋LPS组、LPS＋shRNA组和P＋LPS＋shRNA组细胞通透性降低，p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27和M3受体mRNA表达下调（P〈0.05）；与LPS＋shRNA组比较，P＋LPS＋shRNA组细胞通透性降低，p-p38 MAPK、p-ERK1/2、HSP27和M3受体mRNA表达下调（P〈0.05）。结论盐酸戊乙奎醚减轻内毒素致人肺微血管内皮细胞通透性增高的机制与其下调M3受体表达后抑制MAPK信号通路激活有关。
- 沈石文刘强胜郑菲袁清红王轶芃张宗泽陈凯王焱林詹佳
- 关键词：内皮细胞P38丝裂原活化蛋白激酶类细胞外信号调节MAP激酶类
- 右美托咪定预先给药对单肺通气大鼠海马神经元凋亡的影响被引量：2
- 2016年
- 目的评价右美托咪定预先给药对单肺通气大鼠海马神经元凋亡的影响。方法成年雄性SD大鼠90只，10-11月龄，体重260-300g，采用随机数字表法，将其分为3组（n=30）：双肺通气组（TLV组）、单肺通气组（OLV组）和右美托咪定预先给药组（D组）。D组于单肺通气前45min腹腔注射右美托咪定25μg／kg。气管插管术后行容量控制通气，OLV组与D组行单肺通气90min，然后行双肺通气30min，TLV组行双肺通气120min。每组分别于机械通气后l、3、7d时取6只大鼠，行Morris水迷宫实验，记录游泳速度、目标象限停留时间和穿越平台次数，以评价认知功能；每组于机械通气后即刻取6只大鼠，取海马，测定细胞凋亡情况，计算细胞凋亡指数；每组于机械通气后即刻、1、3、7d时取6只大鼠，取海马，测定磷酸化细胞外调节蛋白激酶1／2（pERK1／2）、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白（pCREB）、Bcl-2和Bax的表达，并计算Bcl-2表达与Bax表达的比值（Bcl-2／Bax比值）。结果与TLV组比较，OLV组目标象限停留时间缩短，穿越平台次数减少，海马细胞凋亡指数升高，海马pERK1、pERK2、pCREB和Bcl-2表达下调，Bax表达上调，Bcl-2／Bax比值降低（P〈0．05或0．01）；与OLV组比较，D组目标象限停留时间延长，穿越平台次数增加，海马细胞凋亡指数降低，海马pERK1／2、pCREB和Bcl-2表达上调，Bax表达下调，Bcl-2／Bax比值升高（P〈0．05或0．01）。结论右美托咪定预先给药可通过激活ERK／CREB信号通路降低单肺通气大鼠海马神经元凋亡，从而减轻认知功能障碍。
- 金哲王焱林陈凯詹佳陈冬玲
- 关键词：右美托咪啶海马
- P38MAPK信号通路在失血性休克复苏诱发急性肺损伤小鼠HO-1表达上调中的作用被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨p38分裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）信号通路在失血性休克复苏诱发急性肺损伤小鼠血红素加氧酶1（HO-1）表达上调中的作用.方法 SPF级野生型小鼠C3H/HeN32只32只,10～12周龄,体重20～25 g,随机分为4组（n=8）,假手术组（S组）：只进行手术操作;失血性休克复苏组（HSR组）：股动脉放血,至MAP为40 mm Hg,通过放血和回输血液维持MAP 35～45mmHg,60 min后回输全部血液和等失血量的乳酸钠林格氏液复苏;FR167653组（FR组）：静脉注射p38MAPK抑制剂FR167653 5 mg/kg;FR＋HSR组：于放血前30 min静脉注射FR167653 5 mg/kg.复苏后6 h处死小鼠,取肺组织,观察病理学结果,并进行病理学评分,计算肺湿/干重比,检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）、IL-10、IL-6和HO-1水平以及p38MAPK的激活水平.结果 与S组比较,HSR组肺组织病理学评分、肺湿/干重比、MPO、IL-6、IL-10、HO-1和p38MAPK的激活水平升高,HSR＋FR组肺组织病理学评分、肺湿/干重比和HO-1表达水平升高（P＜0.01）,FR组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与HSR组比较,HSR＋FR组肺组织病理学评分、肺湿/干重比、MPO、IL-6、IL-10、HO-1和p38 MAPK激活水平降低（P＜0.01）.结论 p38MAPK信号通路介导了失血性休克复苏诱发急性肺损伤小鼠HO-1的表达上调.
- 陈畅张宗泽詹佳彭勉王焱林
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶类血红素加氧酶-1
- 戊乙奎醚预处理对脓毒症小鼠肺损伤时MAPK信号转导通路的影响被引量：8
- 2009年
- 目的探讨戊乙奎醚（PHC）预处理对脓毒症小鼠肺损伤时丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导通路的影响。方法健康雌性昆明小鼠105只，体重20～25g，随机分为3组（n=35）：假手术组（S组）、脓毒症（CLP）组和戊乙奎醚（PHC）组。采用盲肠结扎并穿孔法制备脓毒症模型。PHC组于造模前1h腹腔注射戊乙奎醚0．45mg／k，S组和CLP组于造模前1h注射等容量生理盐水。于造模后即刻测定肺微血管通透性；造模后12h时进行动脉血气分析，观察肺组织病理结果，测定肺组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、细胞外信号调节激酶（ERK1／ERK2）和c—jun氨基末端蛋白激酶（JNK）表达。结果与S组比较，CLP组PaO2、PaO2/FiO2和pH值降低，肺微血管通透性和肺组织MDA含量升高，SOD活性降低，磷酸化的p38MAPK、ERK1／ERK2和JNK表达上调（P〈0．05或0．01）；与CLP组比较，PHC组PaO2、PaO2／FiO2和pH值升高，肺微血管通透性和肺组织MDA含量降低，SOD活性升高，磷酸化的p38MAPK和ERK1／ERK2表达下调（P〈0．05或0．01）。结论戊乙奎醚预处理可通过抑制MAPK信号转导通路（p38MAPK和ERK1／ERK2）的激活，从而减轻脓毒症小鼠肺损伤。
- 刘勇攀王焱林詹佳张宗泽王成夭
- 关键词：胆碱能拮抗剂P38丝裂原活化蛋白激酶类细胞外信号调节MAP激酶类JNK丝裂原活化蛋白激酶类
- M3受体在盐酸戊乙奎醚减轻内毒素诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用被引量：1
- 2018年
- 目的 评价M3受体在盐酸戊乙奎醚(PHC)减轻内毒素(LPS)诱导人肺微血管内皮细胞损伤中的作用.方法 正常人肺微血管内皮细胞和M3 shRNA转染人肺微血管内皮细胞,以1×105个∕ml的密度接种于6孔板(2 ml∕孔)或培养瓶(4 ml∕瓶)中,采用随机数字表法分为5组(n=5):对照组(C组)、LPS组、PHC+LPS组(P+LPS组)、LPS+M3 shRNA转染组(LPS+shRNA组)和PHC+LPS+M3 shRNA转染组(P+LPS+shRNA组).C组不给予药物处理;余各组均加入终浓度为0.1μg∕ml LPS;P+LPS组和P+LPS+shRNA组于加入LPS前1 h加入PHC 2μg∕ml;LPS+shRNA组和P+LPS+shRNA组以含2.5 nmol∕L M3受体shRNA的质粒转染细胞.加入LPS后1 h时,采用流式细胞仪测定内皮细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)的含量;免疫荧光法检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达;Western blot法检测NF-κB p65和IκB的表达;ELISA法测定TNF-α和IL-6的含量;实时定量PCR法分别检测加入LPS后10、30和60 min时M3受体mRNA表达水平.结果 与C组比较,LPS组和P+LPS组F-actin含量降低,VE-cadherin和IκB表达下调,TNF-α和IL-6含量升高,MLCK和NF-κB p65表达上调(P<0.05);与C组比较,LPS组M3受体mRNA表达上调(P<0.05),P+LPS组差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组比较,P+LPS组和LPS+shRNA组F-actin含量升高,VE-cadherin和IκB表达上调,TNF-α和IL-6浓度降低,MLCK、NF-κB p65和M3受体mRNA表达下调(P<0.05);与P+LPS组比较,P+LPS+shRNA组F-actin含量升高,VE-cadherin和IκB表达上调,TNF-α和IL-6浓度降低,MLCK、NF-κB p65和M3受体mRNA表达下调(P<0.05).结论 PHC可通过干扰M3受体,抑制NF-κB介导炎性反应,减轻LPS诱导的人肺微血管内皮细胞损伤.
- 刘强胜颜学滔刘安鹏袁清红沈石文郑菲张宗泽陈凯王焱林詹佳
- 关键词：胆碱能拮抗剂内毒素类内皮细胞
- 盐酸戊乙奎醚对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞黏附分子-1和髓过氧化物酶影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对脓毒症小鼠肺组织血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平、髓过氧化物酶(MPO)活性和β抑制蛋白-1(β-arrestin-1)表达的影响。方法:建立脓毒症小鼠模型,实验动物随机分为假手术组、盲肠结扎穿孔模型组(CLP组)和盐酸戊乙奎醚组(PHC组),每组10只。各组小鼠于造模12h时间点采血检测血乳酸水平,收集肺组织检测VCAM-1水平、MPO活性和β-arrestin-1mRNA的表达。结果:与假手术组比较,CLP组血乳酸值、肺VCAM-1水平和MPO活性升高,β-arrestin-1mRNA表达降低;与CLP组比较,PHC组可降低血乳酸值、肺VCAM-1水平和MPO活性,而增加β-arrestin-1mRNA表达。结论:盐酸戊乙奎醚预处理,可以通过上调β-arrestin-1的表达,从而降低VCAM-1水平和MPO活性,减轻脓毒症小鼠肺损伤。
- 詹佳肖飞李进杰王焱林王轶芃张宗泽
- 关键词：盐酸戊乙奎醚髓过氧化物酶脓毒症
- 激活大麻素2型受体在LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌中的作用及其可能机制被引量：2
- 2019年
- 目的探讨激活大麻素2型受体(Cannabinoid receptor 2,CB2R)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌中的作用及其可能机制。方法将巨噬细胞以1×105/mL的密度接种于6孔培养板(2 mL/孔),采用随机数字表法将其分为4组(n=6):对照组(C组)、LPS组(LPS组)、LPS+CB2R激动剂HU308组(LPS+HU308组)、LPS+CB2R激动剂HU308+3-甲基腺苷组(LPS+HU308+3-MA组)。LPS组、LPS+HU308组和LPS+HU308+3-MA组加入终浓度为1 μg/mL的LPS,孵育15 min时,LPS+HU308+3-MA组加入终浓度为10 mmol/L的3-MA,继续孵育15 min,LPS+HU308组和LPS+HU308+3-MA组加入终浓度为10 μmol/L的HU308孵育24 h。采用ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-18的浓度;采用RT-PCR法检测ICAM-1和NLRP3 mRNA的表达水平,采用western blot法检测LC3和Beclin1的表达水平,并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果与C组比较,LPS组TNF-α[(228.86±10.20) pg/mL vs (140.05±5.54) pg/mL、IL-1β[(363.62±8.14) pg/mL vs (244.82±9.11) pg/mL]和IL-18[(293.28±13.57) pg/mL vs.(202.84±9.54) pg/mL]的浓度升高(均P<0.05),ICAM-1[(5.88±0.32) vs.(1.00±0.03)]和NLRP3[(8.07±0.93) vs.(1.01±0.05)] mRNA表达升高(均P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值[(0.50±0.03) vs.(0.40±0.06)]和Beclin1[(0.51±0.04) vs.(0.16±0.03)]表达上调(均P<0.05);与LPS组比较,LPS+HU308组TNF-α[(165.44±7.07) pg/mL]、IL-1β[(272.09±3.35) pg/mL]和IL-18[(220.41±6.01) pg/mL]的浓度降低(均P<0.05),ICAM-1[(3.21±0.35)]和NLRP3[(1.54±0.30)] mRNA表达降低(均P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值[(0.71±0.03)]和Beclin1[(0.71±0.02)]表达上调(均P<0.05);与LPS+HU308组比较,LPS+HU308+3-MA组TNF-α[(197.06±5.59) pg/mL]、IL-1β[(318.98±11.54) pg/mL]和IL-18[(243.33±8.71) pg/mL]的浓度升高(均P<0.05),ICAM-1[(4.04±0.21)]和NLRP3 [(5.87±0.77)] mRNA表达升高(均P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值[(0.44±0.08)]和Beclin1[(0.32±0.03)]表达下调(均P<0.05)。结论激活大麻素2型受体可抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌,�
- 袁清红刘安鹏刘强胜郑菲张宗泽王焱林詹佳
- 关键词：炎症因子分泌RAW264.7巨噬细胞
