贺明
- 作品数：7 被引量：24H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省中医药管理局科研基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠SOCS3腺病毒的构建及鉴定
- 2011年
- 目的:构建大鼠细胞因子信号途径抑制物3(SOCS3)腺病毒载体,并对腺病毒感染后的HEK293细胞的SOCS3表达情况进行观察。方法:提取大鼠腹腔巨噬细胞中总RNA,克隆出SOCS3基因,亚克隆于含有GFP报告基因的穿梭质粒pAdtrack-CMV,通过pAdeasy-1腺病毒系统将含有目的基因的穿梭质粒和骨架质粒共转入BJ5183感受态细胞。线性化重组的病毒转染入HEK293细胞,并在其中对重组的腺病毒进行包装及扩增。结果:构建的大鼠SOCS3腺病毒能够高效率的感染HEK293细胞,mRNA和蛋白水平均证实SOCS3表达显著增加。结论:大鼠SOCS3腺病毒载体构建成功,可用于体内转染或细胞试验的进一步研究。
- 梁潇贺明陈涛惠智艳袁祖贻
- 类风湿关节炎患者外周血单个核细胞核因子-κB表达及改善病情抗风湿药对其表达影响的研究
- 何岚苏佩合李伟贺明蒲丹吕晓虹
- 普洱茶通过降低NF-κB活性促巨噬细胞凋亡改善动脉粥样硬化被引量：6
- 2019年
- 目的探讨普洱茶通过降低NF-κB表达及活性,促进巨噬细胞凋亡,发挥抗动脉粥样硬化的作用机制。方法载脂蛋白E缺陷(ApoE^-/-)小鼠喂饲普洱茶提取物8周和16周,观察主动脉斑块CD68阳性率及脂质斑块面积;细胞凋亡检测试剂盒检测巨噬细胞凋亡;实时定量PCR、Western blot检测主动脉斑块内及巨噬细胞内P65、IκB-βmRNA及蛋白表达;检测主动脉斑块内各炎症因子mRNA表达变化;电泳迁移率变化(EMSA)分析NF-κBDNA结合活性。结果ApoE^-/-小鼠经普洱茶提取物干预16周组脂质斑块面积分数及脂质成分面积较对照组明显降低(P均<0.05)。普洱茶提取物干预8周、16周组斑块内CD68阳性率较对照组降低(P<0.05);主动脉斑块中巨噬细胞凋亡率增加(P<0.05)。普洱茶提取物干预8周、16周组巨噬细胞中p65mRNA及蛋白表达较对照组降低(P<0.05);16周干预组IκB-βmRNA及蛋白表达降低(P<0.05),主动脉组织中IL-6、IL-12和TNFα的相对表达水平分别较对照组下降(P均<0.05);IL-8、IL-18、MMP9、ICAM和VCAM的表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。8周、16周干预组NF-κBDNA结合活性平均灰度值均较对照组降低(P<0.05)。结论普洱茶可能通过抑制NF-κB表达及活性而非通过IκB介导,促进巨噬细胞凋亡,同时降低体内炎症水平,进而发挥抗动脉粥样硬化作用。
- 肖懿慧贺明舒娟袁祖贻
- 关键词：动脉粥样硬化普洱茶巨噬细胞NF-ΚB
- 胶原诱导性关节炎小鼠存在血管内皮功能失调——类风湿关节炎加速动脉粥样硬化的新证据被引量：1
- 2011年
- 目的类风湿关节炎(RA)患者易患动脉粥样硬化(AS),而RA是否会造成内皮功能障碍,并通过该途径触发或者加速AS是我们的研究重点。方法观察胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠及同期对照小鼠的主动脉对于乙酰胆碱及硝普纳诱导的血管舒张率并进行对比,及CIA与对照小鼠血管组织iNOS及eNOS表达水平的检测。结果对照小鼠的主动脉组织中,对于乙酰胆碱的诱导,血管舒张率为88.70±22.90%,CIA显著下降为53.90±18.40%(p<0.01)。对于硝普纳的诱导则未见差异。CIA小鼠血管组织中eNOS表达下调,iNOS表达升高。结论 CIA小鼠存在内皮细胞功能障碍且与关节炎严重程度呈正相关。
- 贺明梁潇文雯赵思嘉陈涛袁祖贻
- 关键词：类风湿关节炎动脉粥样硬化内皮功能失调ENOS
- RAW264.7细胞M1/M2亚型的诱导和鉴定被引量：13
- 2011年
- 目的诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7分化为M1/M2亚型,并分别根据其标志物的表达情况进行鉴定。方法干预前一天以105个/ml密度铺好细胞,用不同浓度的IFN-γ+LPS干预,刺激分化为M1亚型;用不同浓度IL-4干预,刺激分化为M2亚型。分别于干预后12h提取细胞的总RNA。用realtime PCR方法对M1/M2亚型的标志物iNOS,CD86/MR(CD206),I型精氨酸酶(ArginaseI,Arg-I)进行mRNA水平表达量的鉴定,最终选择最合适的刺激浓度进行后续试验。结果 (1).不同浓度干预试剂刺激12h后,大剂量干预组RAW264.7的细胞状态差,死亡细胞数多,中小剂量组细胞状态良好,完全贴壁,但细胞的形态发生改变;(2).2.5ng/ml IFN-γ+200ng/ml LPS共同作用12h后,RAW264.7的iNOS和CD86表达量最高,较基础水平有明显差异;(3).10ng/ml IL-4作用12h后,RAW264.7的MR(CD206)和ArgI的表达量最高,较基础水平有明显差异。结论用适当浓度的IFN-γ+LPS/IL-4刺激RAW264.7细胞12h,可使其分化为M1/M2亚型。
- 陈涛梁潇贺明乌宇亮袁祖贻
- 关键词：RAW264.7细胞炎症动脉粥样硬化
- 17β-雌二醇通过SOCS3抑制泡沫细胞形成的机制初探被引量：2
- 2019年
- 目的明确雌激素是否能够调节动脉粥样硬化斑块泡沫细胞中的胆固醇流出。方法在体研究通过对5周龄载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)-/-小鼠进行双侧卵巢切除术(OVX,n=16)或假卵巢切除术(Sham组,n=8),将卵巢切除的小鼠分为2组:OVX+E2组(n=8)小鼠皮下注射溶于丙酮的17-β雌二醇(E2)5μg/d,OVX组(n=8)注射丙酮作为对照。观察2组动脉粥样硬化斑块形成、脂质沉积和胆固醇流出情况的差别;体外研究通过干预RAW264.7细胞,观察其胆固醇流出的水平。结果与OVX组相比,Sham组和OVX+E2组血清总胆固醇和甘油三酯水平均下降,差异有统计学意义(P<0.01~0.05)。与OVX组相比,Sham组和OVX+E2组斑块面积分别减少22.03%和21.84%,脂质沉积分别下降20.57%和30.36%(P均<0.01)。E2增加了斑块中ABCA1和SOCS3的表达。在细胞RAW264.7中,E2能够逆转janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)ABCA1表达的抑制,但这种逆转作用在SOCS3受抑制的细胞中未发现。SOCS3过表达能够通过抑制JAK2/STAT3的磷酸化提高ABCA1的表达。结论E2能够上调巨噬细胞ABCA1的表达,并可通过上调SOCS3进而调控胆固醇流出。
- 殷艳蓉袁炜贺明田雨灵乌宇亮袁祖贻梁潇
- 关键词：雌二醇细胞因子信号转导抑制因子3胆固醇流出
- SOCS蛋白的多重作用:SOCS1和SOCS3在动脉粥样硬化中的差异表达被引量：2
- 2019年
- 目的明确动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)进展中,细胞因子信号抑制物(SOCS)表达水平的变化及SOCS表达与胆固醇水平之间的关系。方法使用载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠,分别以高脂与正常饮食喂养,在不同年龄段检测其主动脉斑块中SOCS1和SOCS3的蛋白及mRNA表达水平;还采集18例无冠心病男性的外周静脉血,提取外周血单核细胞(PBMC)检测其SOCS1和SOCS3的mRNA表达水平。结果在ApoE^(-/-)小鼠中,SOCS1的表达先升高后下降,但高脂饮食组表达峰值前移;SOCS3的表达随喂养时间的增加而增加,该趋势在喂养高脂饮食组中更为明显;SOCS1/CD68和SOCS3/CD68的表达与高脂饮食持续时间增加呈相反的趋势;在高脂饮食喂养的ApoE^(-/-)小鼠中,白细胞介素-6(IL-6)在主动脉中的表达也随着喂养时间的延长而增加;在无冠心病人群的PBMC中,血浆总胆固醇水平与SOCS3 mRNA表达水平呈正相关(r=0.433,P=0.012)。结论 SOCS1和SOCS3在AS中呈差异化表达,SOCS3与IL-6可能促进AS的发生与发展。
- 梁潇贺明田雨灵乌宇亮袁祖贻
- 关键词：动脉粥样硬化炎症胆固醇巨噬细胞
