闫露
- 作品数：24 被引量：78H指数：6
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人骨形成蛋白-7基因增强的组织工程化骨修复骨缺损被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨腺病毒介导人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)与聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)生物材料复合后修复兔桡骨缺损的效果。方法:制备含hBMP-7基因的重组腺病毒Ad-BMP-7并感染MSCs。制备新西兰大白兔桡骨1.3cm缺损模型,修复实验分为4组,BMP-7基因转染的MSCs-PLGA复合物组(A组)、未经转染的MSCs复合PLGA修复组(B组)、单纯PLGA修复组(C组)和对照组(D组)。分别于术后8、12周进行大体观察、X线检测和组织学检测。结果:定量检测分析结果证实经转染的MSCs修复骨缺损的成骨速度和成骨量均优于未转染组,单纯PLGA组和对照组均未见骨缺损得到骨性修复。结论:hBMP-7基因转染能够提高MSCs形成组织工程化骨组织和修复骨缺损的能力。
- 闫露鱼兵范清宇文艳华
- 关键词：骨疾病骨缺损骨形态发生蛋白
- 不同前药联合HSV-tk自杀基因系统对喉癌细胞体外杀伤效应的比较研究被引量：2
- 2003年
- 目的 观察并比较不同前药与自杀基因HSV -tk共同作用对喉癌细胞Hep -2的体外杀伤作用。方法 构建tk基因逆转录表达载体pL(tk)SN ,在LipofectAMINETM2 0 0 0介导下转染PA3 17包装细胞 ,G418筛选 ,直至出现抗性克隆 ,扩大培养 ,用NIH3T3测定病毒滴度 ,将重组病毒分别感染人喉癌细胞Hep -2 ,G418筛选出抗性克隆命名为Hep/tk ,以RT -PCR及Southernblot检测tk基因的整合及表达。通过观察tk基因修饰细胞生长状况及比较不同前药对喉癌细胞杀伤效应以探讨不同前药作用机理。结果 RT -PCR及Southernblot分析证明tk基因在人喉癌细胞系Hep -2中有整合及表达 ;Hep/tk与未转基因的原肿瘤细胞相比 ,二者生长速度及形态结构无明显差别 ;在不同前药敏感性试验中 ,Hep/tk显示出对GCV的高敏感性 ,而tk阳性和tk阴性细胞均显示对ACV和BVdU相对不敏感 ,tk基因修饰细胞与不同比例亲本细胞混合后经GCV治疗均显示出明显旁观者效应。结论 人喉癌细胞系Hep -2对HSV -tk/GCV系统高度敏感 ,并且有明显的旁观者效应 ,可望成为喉癌基因治疗的新途径。
- 闫露栗艳沈敏
- 关键词：喉癌HSV-TK基因
- 灵芝-912对小鼠移植性肿瘤的抑制作用被引量：8
- 2003年
- 目的 :探讨灵芝 - 912 (1z- 912 )对小鼠移植性肿瘤的抑制作用 ,及其对小鼠免疫功能的影响。方法 :采用小鼠移植性肿瘤艾氏腹水癌 (ECA) ,肉瘤180 (S180 ) ,肝癌 (HCA) ,Lewis肺癌模型 ,5 -Fu为阳性对照组 ,观察不同浓度 1z - 912的抗肿瘤作用 ,并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察Iz～ 912对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果 :不同浓度lz- 912对体外ECA肿瘤细胞的兰染率分别为 10 0 % ,10 0 % ,85 % ,6 1%和37% (P <0 .0 1) ;lz - 912对S180 ,HCA和Lewis小鼠移植瘤的抑制率分别达 4 5 .1%～ 5 6 .7% ,33.3%～5 2 .7%和 4 8.1%～ 5 6 .6 % (P <0 .0 1) ;对腹水型HCA和腹水型肉瘤180 小鼠的生命延长率为 110 .0 %～134.0 % (P <0 .0 1) ;与 5 -Fu组比较 ,lz - 912对荷瘤小鼠免疫功能无抑制作用。结论 :lz - 912具有显著抗肿瘤作用 ,并对荷瘤小鼠免疫功能无影响。
- 梁军李予蓉孙纪元栗燕闫露王四旺
- 关键词：移植性肿瘤抗癌药抗肿瘤作用
- 地塞米松诱导联合骨形成蛋白2基因修饰兔骨髓间质干细胞的成骨转化(英文)被引量：2
- 2008年
- 背景:骨髓间质干细胞在地塞米松等骨诱导剂的作用下能够向成骨细胞分化;同时骨形成蛋白2在骨修复过程中促进细胞增殖分化和基质分泌,在体内外均可诱导骨形成,以上二者联合应用可能会产生一定的协同效应。目的:分析体外经地塞米松诱导是否能增强骨形成蛋白2基因修饰的骨髓间质干细胞的成骨转化能力。设计:随机化配对设计。单位:解放军第四军医大学西京医院。材料:实验于2004-02/2004-08在解放军第四军医大学全军骨肿瘤研究所完成。选用2月龄新西兰白兔20只,由解放军第四军医大学实验动物中心提供(许可证号:军动管字第2005C00117号)。室温、常湿,正常喂食。双侧取材,左侧肢体来源骨髓间质干细胞为地塞米松诱导组,右侧为对照组(未经诱导)。方法:将地塞米松诱导组和对照组兔骨髓间质干细胞分别转导含有人骨形成蛋白2基因的复制缺陷重组腺病毒Ad-BMP-2后,以反转录-聚合酶链反应和免疫组化方法检测细胞中骨形成蛋白2的表达情况。观察骨髓间质干细胞的生长情况,并应用碱性磷酸酶检测试剂盒及骨钙素放免试剂盒测定Ad-BMP-2转导5d后两组骨髓间质干细胞的碱性磷酸酶活性和骨钙素含量。主要观察指标:①骨髓间质干细胞中骨形成蛋白2的表达情况。②骨髓间质干细胞的形态学变化。③骨髓间质干细胞中碱性磷酸酶活性和骨钙素含量。结果:①转导后骨形成蛋白2基因在地塞米松诱导组和对照组兔骨髓间质干细胞中均有表达。②骨髓间质干细胞经地塞米松成骨诱导后形态较不规则,呈三角形、多角形改变,较基础培养基培养细胞生长缓慢。基因转导后细胞形态无明显改变。③转基因5d后,地塞米松诱导组骨髓间质干细胞培养上清中碱性磷酸酶活性高于对照组[(134.36±8.84,104.02±7.83)nkat/L(t=3.3506,P<0.01,n=20)];地塞米松诱导组骨髓间质干细胞骨钙素�
- 栗艳闫露沈敏
- 关键词：间质干细胞骨形态发生蛋白质类骨生成
- 桉叶苷的分离和结构被引量：4
- 2000年
- 目的 研究垂枝赤桉Eucalyptuscamaldulensisvar.pendulaBlak .etJacobs叶的化学成分。 方法 采用各种色谱技术进行分离纯化 ,用IR ,MS ,1HNMR ,13CNMR(DEPT) ,1H 1HCOSY ,13C 1HCOSY ,COLOC和X 射线单晶衍射鉴定化合物。结果 分离得到了 5个化合物 :三十烷醇 (I) ,β 谷甾醇 (II) ,对羟基苯甲酸 (III) ,胡萝卜苷(IV) ,5 ,7 二羟基 2 甲基 苯骈吡喃酮 7 O β D { 6 O [4R (1 甲基 1 羟基 ) 乙基环己 1 烯 ] 甲酰基 } 吡喃葡糖(V)。结论 所有化合物均为首次从该植物中分得 ,V为一个新化合物 ,命名为桉叶苷 (camaldulenside)
- 顾正兵梁华清陈海生徐一新闫露张卫东
- 关键词：中药
- 地塞米松诱导促进BMP-2基因转染的兔MSCs的成骨转化被引量：1
- 2005年
- 目的: 研究地塞米松诱导对BMP 2基因修饰的rMSCs的增殖和分化表型的影响.方法: 将地塞米松诱导和未经诱导的兔MSCs分别转导BMP 2基因后,以RT PCR和免疫组化方法检测转导后细胞BMP 2的表达;通过观察细胞生长及碱性磷酸酶活性和骨钙素含量的测定,分析地塞米松诱导对BMP 2基因修饰的rMSCs的增殖和分化表型的影响.结果: 转导后BMP 2基因在两组rMSCs中均有表达,定量分析显示诱导组细胞碱性磷酸酶活性 ( 134 36±8 84 )nkat/L较对照组(104 02±7 83)nkat/L明显增高;诱导组细胞骨钙素含量(14 68±0 73)μg/L较对照组(6 52±1 21)μg/L明显增高.结论: 转导前地塞米松诱导能够促进BMP 2基因修饰的rMSCs的增殖和成骨转化.
- 栗艳闫露沈敏
- 关键词：骨髓细胞地塞米松成骨转化
- 人骨形成蛋白-7基因重组腺病毒的构建及其在兔骨髓间充质干细胞中的表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :克隆人骨形成蛋白 7(BMP 7)基因并构建其重组腺病毒 ,观察其在兔BMSc中的表达 .方法 :用RT PCR方法从人胎肾组织中克隆人BMP 7基因全长cDNA并测序 ;将BMP 7基因cDNA克隆到穿梭载体形成转移质粒pAd Track CMV BMP 7,经PmeI酶切线性化后与骨架质粒感受态细胞AdEasier 1Cells经电穿孔法同源重组得到腺病毒质粒pAdBMP 7并酶切鉴定 ,PacI酶切线性化后转染 2 93细胞包装后获得复制缺陷型重组腺病毒AdBMP 7,将AdBMP 7体外感染兔BMSc后 ,以RT PCR方法及观察AdEasy系统上的绿色荧光蛋白表达鉴定BMP 7基因的表达 .结果 :用RT PCR方法从胎肾组织中克隆出 1 2 96bp的cDNA ,测序证实为人BMP 7基因 ;酶切鉴定表明BMP 7基因已插入到 pAd Track CMV穿梭质粒且腺病毒重组质粒 pAdBMP 7构建成功 ;经 2 93细胞包装 3d后可观察到绿色荧光蛋白表达(GFP) ,氯化铯梯度离心法最终获得约 3× 1 0 9efu/L滴度的重组病毒 ;体外感染兔BMSc后RT PCR方法及荧光显微镜证实BMP 7基因可在兔BMSc中表达 .结论 :成功克隆人BMP 7基因并构建其重组腺病毒 ,证实了其在BMSc的表达 。
- 鱼兵范清宇马保安周勇张明华龙华闫露
- 关键词：腺病毒基因克隆
- 人骨形成蛋白-7基因在人骨髓间充质干细胞中的表达和对其分化表型的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 :观察人骨形成蛋白 7(BMP 7)基因在人骨髓间充质干细胞 (hMSC)中的表达及对其成骨表型的影响。 方法 :利用AdEasy腺病毒表达系统构建人BMP 7基因表达腺病毒AdB7V ,体外感染hMSC后观察绿色荧光蛋白(GFP)表达及RT PCR、免疫组化方法鉴定外源基因的表达 ,通过对感染细胞的碱性磷酸酶 (ALP)染色和钙盐染色鉴定其成骨分化表型。 结果 :hMSC经AdB7V感染后 72h可观察到GFP表达 ,RT PCR、免疫细胞化学方法证实外源性BMP 7在hMSC中表达 ,感染细胞的ALP染色和钙盐染色均为阳性。 结论 :外源性的人BMP
- 鱼兵范清宇闫露栗艳文艳华刘云燕
- 关键词：骨髓间充质干细胞腺病毒成骨分化
- 单克隆抗体3A5-复方中药安迪偶联物的肝癌导向治疗被引量：7
- 2003年
- 目的:探讨单克隆抗体3A5-复方中药安迪粉针剂偶联物(3A5-Andi)的肝癌导向治疗作用。方法:用单克隆抗体3A5与安迪粉针剂(Andi)制备偶联物,ELISA检测3A5-Andi偶联物保持对人肝癌BEL-7 402细胞的免疫反应性;采用小鼠/裸鼠移植性肿瘤模型,5-FU为阳性对照组,观察12、24和50mg/kg的导向治疗作用。结果:克隆生成法显示,3A5-Andi具有比Andi更强的细胞毒性,二者的IC_(50)分别为2.8 mg/L和5.1 mg/L(P<0.01)。24 mg/kg和50 mg/kg 3A5-Andi ip对小鼠移植性腹水型H_(22)肝癌的生命延长率(LPR)分别为133％和167％(P<0.05);而12mg/kg和24mg/kg Andi的LPR分别为112％和138％(P<0.05)。24 mg/kg 3A5-Andi和12 mg/kg Andi iv对裸鼠移植性人肝癌BEL-7402细胞瘤的瘤重抑制率分别为63.5％和52.2％(P>0.05)。24 mg/kg 3A5-Andi和12 mg/kg Andipt对BEL-7402人肝癌的抑制率分别为75.4％和61.0％(P>0.05)。结论:3A5-Andi偶联物具有一定的肿瘤导向治疗作用;3A5-Andi与Andi比较,3A5-Andi对裸鼠移植人肝癌BEL-7402具有较强的治疗作用;pt方式3A5-Andi比iv疗效更好。
- 梁军孙纪元谢艳华栗燕闫露王四旺
- 关键词：中药偶联物肝癌免疫反应性肿瘤模型克隆
- Stathmin基因反义核酸对人肝癌细胞系的生长抑制作用被引量：7
- 2004年
- 目的 :探讨Stathmin基因反义核酸 (AS ODN)对人肝癌细胞系的生长抑制作用。方法 :以高表达Stathmin基因的人肝癌细胞系SMMC 772 1为靶细胞、反义Stathmin (AS ODN)为阻断剂 ,通过RT PCR观察AS ODN对肝癌细胞Stathmin基因表达的抑制 ,MTT试验观察AS ODN对肝癌细胞的生长抑制作用 ,流式细胞仪分析细胞增殖周期的影响。结果 :AS ODN明显抑制了肝癌细胞SMMC 772 1的生长及Stathmin基因的表达 ,P <0 0 5。SMMC 772 1在AS ODN作用下 ,细胞分裂阻滞在分裂期的中期 ,并诱导细胞发生凋亡。结论 :Stathmin基因的反义核酸 (AS ODN)对肝癌细胞的生长可能起十分重要的作用 。
- 张志伟师建国闫露马慧霞
- 关键词：细胞系
