陈大年
- 作品数：32 被引量：123H指数：8
- 供职机构：华西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国医学科学院基金美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 运用PCR－VNTR技术结合银染色检测Rb基因的缺失被引量：1
- 1995年
- 运用ＰＣＲ－ＶＮＴＲ技术结合银染色对视网膜母细胞瘤、肝癌组织Ｒｂ基因进行了检测，发现９例视网膜母细胞瘤组织中有４例（４４．４％），４２例肝癌组织中有８例（１９．０４％）存在Ｒｂ基因的缺失。认为ＰＣＲ－ＶＮＴＲ技术结合银染色是一种快速灵敏检出Ｒｂ基因缺失的方法，适于在临床运用。
- 陈大年罗成仁
- 关键词：视网膜母细胞瘤银染色
- 增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体白细胞介素6(IL-6)表达的研究被引量：9
- 2000年
- 目的 :研究白细胞介素 6(IL 6)在增殖性玻璃体视网膜病变 (PVR)玻璃体中的表达水平 ,分析IL 6在PVR中的作用。方法 :对 3 7例增殖性玻璃体视网膜病变及 1 2例正常对照玻璃体IL 6进行定量测定 ,其中视网膜脱离PVR 2 2例 ,外伤性PVR 1 5例。IL 6的测定采用双抗夹心法 (ELISA)。结果 :3 7例PVR玻璃体IL 6水平为 2 64 87± 1 3 6 4 1 pg/ml,其中 2 2例视网膜脱离并发PVR者玻璃体IL 6水平为 2 61 4 2± 1 3 1 2 7pg/ml,外伤性PVR者玻璃体IL 6水平为 2 97 97± 1 4 1 53 pg/ml。正常对照玻璃体IL 6水平为 3 5 69± 2 0 64 pg/ml。PVR玻璃体IL 6水平显著高于正常对照组 (P <0 0 1 )。IL 6水平在PVRC、D级最高。结论 :白细胞介素 6(IL 6)在PVR中呈上行性表达 ,参与PVR的发生发展。IL 6主要在PVR中晚期发挥作用。
- 胡建斌陈大年樊映川
- 关键词：视网膜疾病玻璃体IL-6
- 视网膜母细胞瘤易感基因（Rb基因）抑制人肝癌细胞的生长被引量：5
- 1994年
- 利用流式细胞学检查及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ、Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交技术对中国人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１进行分析，发现该细胞ＤＮＡ指数为０．８ｌ，为亚倍体细胞。该细胞Ｒｂ基因的５′端存在内部缺失，Ｒｂ基因失活，没有Ｒｂ蛋白产生。将正常人ＲｂｃＤＮＡ正向插入逆转录病毒载体ＤＯＬ，得到重组逆转录病毒载体ＤＯＬＲＢ。用电穿孔转染技术把ＤＯＬＲＢ转入ＳＭＭＣ７７２１细胞，发现Ｒｂ基因导致约７５％的肝癌细胞死亡，另外２５％的肝癌细胞则因外源性Ｒｂ基因突变失活而继续存活。
- 陈大年李岱宗刘超亭姚明李洪年蒋惠秋李安仁黄倩顾健人罗成仁
- 关键词：视网膜母细胞瘤RB基因肝癌细胞
- VEGF与IL-6在视网膜脱离和外伤眼中表达的研究
- 2000年
- 目的:研究细胞因子血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素6(IL-6)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体中的表达,分析它们在PVR玻璃体中的相互关系,探讨它们在增生性玻璃体视网膜病变中的作用。方法:本文共有增生性玻璃体视网膜病变37例,缺血性眼部疾病8例纳入研究,其中视网膜脱离PVR 22例,外伤性PVR 15例;以12例突然死亡的无眼部疾病的成年人作为正常对照。检测病例组、对照组玻璃体VEGF、IL-6水平。VEGF、IL-6的测定采用双抗体夹心法(ELISA)。结果:37例增生性玻璃体视网膜病变玻璃体VEGF水平220.52±101.97pg/ml,IL-6为264.87±136.41pg/ml,其中22例视网膜脱离PVR玻璃体VEGF为238.90±61.24pg/ml,IL-6为261.41±131.27pg/ml;外伤性PVR玻璃体VEGF为193.58±58.17pg/ml,IL-6为297.97±141.53pg/ml。缺血性眼部疾病玻璃体VEGF为850.50±301.32pg/ml,IL-6为329.78±137.56pg/ml。正常对照玻璃体VEGF水平为89.90±36.46pg/ml,IL-6水平为35.69±20.64pg/ml,增生性玻璃体视网膜病变玻璃体VEGF、IL-6水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。VEGF在PVR A、B级水平较高,且随PVR程度增加而降低。IL-6水平在PVR C、D级最高。结论:作为细胞间的传导信号细胞因子VEGF、IL-6均参与PVR的发生发展。VEGF在PVR中呈上行性表达;VEGF不仅在缺血性眼部疾病中有高表达,而且在某些非缺血性眼部疾病表达升高。VEGF主要在PVR早期发挥作用,IL-6主要在PVR中晚期发挥作用。
- 胡建斌陈大年董巍樊映川张国辉
- 关键词：白细胞介素
- 视网膜母细胞瘤裸小鼠移植瘤中nm23基因的表达及意义
- 2001年
- 目的 观察肿瘤转移抑制基因 nm2 3的表达产物二磷酸核苷激酶 (nucleoside diphosphatkinase,NDPK)在裸小鼠玻璃体腔视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma,RB)移植瘤中的表达状态 ,探讨 nm2 3基因的表达产物 NDPK(nm2 3/ NDPK)与 RB的发生发展及浸润生长的相关性。 方法 对 2 0例裸小鼠玻璃体 RB移植瘤进行 nm2 3/ NDPK表达的免疫组织化学染色 ,以正常视网膜组织标本作对照 ,比较 RB移植瘤眼内生长期 ( ～ 级 )及蔓延、扩展浸润期 ( ～ 级 ) nm2 3/ NDPK的表达情况。 结果 正常视网膜组织 nm2 3蛋白表达阴性。 2 0例 RB移植瘤 nm2 3/ NDPK表达阳性 ,阳性细胞数为 48.73± 2 .37,阳性表达率为 10 0 % ;眼内生长期 ( ～ 级 )与蔓延、扩展浸润期 ( ～ 级 ) nm 2 3/ NDPK阳性表达细胞数差异无显著性的意义 (P>0 .0 5 )。 结论 nm 2 3基因不具有抑制 RB移植瘤蔓延浸润的功能 ,而是在其发生发展过程中起一定作用。
- 张晓玮陈大年罗成仁夏瑞南
- 关键词：视网膜母细胞瘤动物模型基因表达NM23基因
- 视网膜母细胞瘤裸小鼠移植瘤中细胞增生凋亡及相关基因的表达被引量：2
- 2001年
- 目的 研究视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞的增殖与凋亡平衡的改变及其细胞凋亡的分子调控机制。方法 应用细胞凋亡原位检测及免疫组织化学法检测２０例裸小鼠玻璃体腔ＲＢ移植瘤中细胞增生指数（ＰＩ），细胞凋亡指数（ＡＩ）及其比值；凋亡相关基因ｐ５３，ｈｃｌ－２，ｂａｘ，ｃ－ｍｙｃ的表达状况及与ＡＩ的关系。结果ＲＢ移植瘤ＰＩ为４８．３２，ＡＩ为３．９２，与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．０１）。ＲＢ移植瘤ＡＩ／ＰＩ为０．０８１，与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．０１）。ＲＢ移植瘤中ｐ５３，ｂｃｌ－２，ｂａｘ及ｃ－ｍｙｃ蛋白表达阳性细胞数分别为４５．３２±０．１８，＜１０％，４０．３２±０．１５，４５．７６±０．２７。ＡＩ与ｂａｘ表达正相关，与Ｐ５３，ｃ－ｍｙｃ表达无关。结论ＲＢ移植瘤细胞增殖的增加和细胞凋亡的抑制共同参与了ＲＢ移植瘤的发生和发展过程。ＲＢ移植瘤中的细胞调亡是ｐ５３非依赖性的由ｂａｘ的过表达所致。突变型ｐ５３蛋白所致的凋亡抑制及其抑制ｃ－ｍｙｃ表达所致的细胞凋亡效应，可能是ＲＢ移植瘤中细胞凋亡受抑制的分子调控机制。
- 张晓玮陈大年罗成仁夏瑞南
- 关键词：视网膜母细胞瘤细胞增生P53蛋白癌基因
- RDS/peripherin表达载体的构建和在COS-1细胞的表达
- 1999年
- 目的构建大鼠ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲＲＤＳ，并观察它在ＣＯＳ１细胞中的表达。方法将全长度的ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎｃＤＮＡ（１．５ｋｂ）插入到真核表达载体ｐＡＬＴＥＲＭＡＸ中，构建了ＲＤＳ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲＲＤＳ。采用电穿孔技术将其转染ＣＯＳ１细胞，转染４８ｈ后，采用ＲＴＰＣＲ检测ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎｃＤＮＡ的表达。结果采用ＲＴＰＣＲ方法可检测到ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎｃＤＮＡ转录的ｍＲＮＡ。结论所构建的ＲＤＳ真核表达载体可在ＣＯＳ１细胞中表达。
- 高玲陈大年罗成仁严密
- 关键词：视网膜变性真核表达载体基因转染
- 视网膜母细胞瘤基因对视网膜母细胞瘤移植瘤细胞周期的影响被引量：1
- 2000年
- 目的 观察外源性视网膜母细胞瘤基因 (Rb基因 )对视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma,RB)移植瘤细胞周期的影响。 方法 在建立裸鼠眼玻璃体腔 RB移植瘤模型及构建 Rb基因的逆转录病毒表达载体 PBabe- Rb的基础上 ,用脂质体 Dosper介导法将 Rb基因导入裸鼠 RB移植瘤 ,流式细胞仪检测 RB移植瘤细胞周期变化。 结果 Rb基因在 RB移植瘤内的表达使 RB移植瘤 G1 期细胞数明显增加 ,DNA指数及 S期百分比值有所降低。 结论 外源性 Rb基因可部分抑制 RB移植瘤细胞周期的进程。
- 陈大年张晓玮罗成仁
- 关键词：视网膜母细胞瘤癌基因细胞周期
- 增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体血管内皮生长因子表达的研究被引量：2
- 2000年
- 目的 研究血管内皮生长因子 (VEGF)在增殖性玻璃体视网膜病变 (PVR)玻璃体中的表达 ,分析VEGF在 PVR中的作用。方法 增殖性玻璃体视网膜病变 37例 ,其中视网膜脱离 PVR2 2例 2 2眼 ,外伤性 PVR15例。以 12例猝死无眼疾的成年人作为正常对照。检测病例组、对照组玻璃体 VEGF水平。VEGF的测定采用对抗夹心法 (EL ISA)。结果 37例增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体 VEGF平均 2 2 0 .5 2± 10 1.97pg/ m l,其中 2 2例网脱PVR玻璃体 VEGF2 38.90± 6 1.2 4pg/ ml,外伤性 PVR玻璃体 VEGF193.5 8± 5 8.17pg/ ml。正常对照组玻璃体VEGF89.90± 36 .36 pg/ ml。PVR玻璃体 VEGF水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。VEGF在 PVRA级、B级水平较高 ,且随 PVR程度增加而降低。有危险因素 PVR,VEGF水平高于无危险因素 PVR(P <0 .0 5 )。结论 作为细胞间的传导信号 ,VEGF参与 PVR的发生发展。VEGF在 PVR中呈上调性表达。VEGF不仅在缺血性眼部疾病中呈高表达 ,而且在某些非缺血性眼部疾病中表达升高。 VEGF主要在 PVR早期发挥作用 ,PVR危险因素可以刺激玻璃体 VEGF上行性表达。
- 胡建斌陈大年董巍樊映川张国辉
- 关键词：血管内皮生长因子增殖性玻璃体视网膜病变病理
- 视网膜母细胞瘤基因治疗的实验研究被引量：6
- 1999年
- 目的观察外源性Ｒｂ基因在视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）移植瘤内的表达情况，及其对ＲＢ移植瘤生长的影响，为进行ＲＢ体内基因治疗提供实验依据。方法建立裸鼠眼玻璃体腔ＲＢ移植瘤模型，构建Ｒｂ基因的逆转录病毒表达载体，用脂质体将Ｒｂ基因导入裸鼠ＲＢ移植瘤，免疫组织化学染色及流式细胞仪间接免疫荧光法检测Ｒｂ基因表达，裸鼠ＲＢ移植瘤生长的活体观察、分级、组织病理形态观察。结果脂质体Ｄｏｓｐｅｒ介导的Ｒｂ基因转染可在ＲＢ移植瘤内表达至少７天，并部分抑制ＲＢ移植瘤的生长，抑制效果与Ｒｂ蛋白表达量、治疗时机有关。结论外源性Ｒｂ基因可在ＲＢ移植瘤内表达并部分抑制ＲＢ移植瘤的生长。
- 陈大年张晓玮罗成仁
- 关键词：视网膜母细胞瘤RB基因基因治疗
