陈建鹤
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
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- Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病基因诊断与基因突变情况的调查
- 1999年
- （１）建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）的基因诊断方法；（２）寻找具有普遍意义的突变方式，以优化基因诊断。方法：（１）采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ方法，调查ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区突变情况；（２）ＰＣＲ扩增分析微卫星ＳＭ７。结果：将ＡＨ４与１６例患者的基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交后，均显示有正常的１５ｋｂ的杂交片段。对２７例患者ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端ＡＨ４和ＪＨ１４两探针间的５．７２ｋｂ基因组ＤＮＡ行ＰＣＲ扩增后，未发现５．５ｋｂ基因组ＤＮＡ缺失。１０９名正常人ＳＭ７ＰＣＲ扩增显示，其多态信息含量（ＰＩＣ）值为０．７６，３个家系的ＳＭ７等位片段与疾病基因连锁关系明确。结论：在汉族中：（１）ＡＤＰＫＤⅠ基因３′端单拷贝区无常见性大片段基因组ＤＮＡ缺失类突变；（２）ＳＭ７所含ＰＩＣ较高，用其可在７０％～８０％的ＡＤＰＫＤⅠ家系中作出基因诊断。
- 王立明闵志廉朱有华齐隽齐隽缪为民焦炳华
- 关键词：常染色体显性囊性肾基因诊断基因突变
- 重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a突变区的氨基酸序列分析被引量：2
- 1997年
- 目的：对重组人肿瘤坏死因子α衍生物３ａ（ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ）突变区进行氨基酸序列分析。方法：通过ＰＣＲ扩增，获得５＇端含ｒｈ－ＴＮＦαＤ３ａ突变区的半分子。用融合蛋白表达系统对该半分子进行大肠杆菌表达。表达产物经亲和层析法纯化，用Ⅹａ因子酶切，去除载体多肽，然后进行Ｎ末端２０个氨基酸顺序分析。结果和结论：氨基酸序列符合预想突变序列，即发生下列氨基酸替换：８０位Ｉｌｅ→Ｓｅｒ，９０位Ｌｙｓ→Ｈｉｓ，９２位Ａｓｎ→Ｖａｌ。
- 缪为民陈建鹤王梁华周丙荣娄永华焦炳华
- 关键词：肿瘤坏死因子衍生物突变氨基酸
- 重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a突变区的氨基酸序列分析
- 1997年
- 我们根据肿瘤坏死因子α(TNFα)结构和功能的关系,应用巨引物法对位于TNFα分子中部的8个核苷酸同时进行突变,在理论上造成第80、90、92位氨基酸的替换,因此命名为rh-TNFαD3a(中国专利:95113311.X)。实验表明,rh-TNFαD3a的抑瘤活性不变,但其毒性只及原型TNF的1/10。本实验的目的是从氨基酸水平上对rh-TNFαD3a的突变进行验证。 由于目前的氨基酸测序通常是做蛋白质的N端20～40个左右的氨基酸。
- 缪为民陈建鹤王梁华周丙荣娄永华焦炳华
- 关键词：肿瘤坏死因子氨基酸序列分析微生物
- 中国姥鲨软骨源溶菌酶样分子的分离纯化、部分氨基酸序列测定及体内抗肿瘤活性研究被引量：8
- 2000年
- 用含 0 0 2mol/LMES的 1mol/L盐酸胍抽提新鲜中国姥鲨软骨组织 ,抽提物经Mr30 0 0 0PTTK膜超滤、SephacrylS 2 0 0和Superdex 75柱层析获得 1种新的Mr 为 15 2 0 0的高纯度蛋白质 (Sp15 ) ,N 末端序列测定表明其与多种哺乳动物来源的溶菌酶具有相关性 ,并在体外具有显著的溶菌酶活性 ,其比活性高达 2 2 30 0 0U/mg ;Sp15在 10 μg/ml浓度下 ,可显著抑制血管内皮细胞的增殖 ,其抑制率高达 75 % ;在 8mg/kg剂量下 ,对小鼠移植的S180肉瘤的抑瘤率达 33 3% ,并可显著延长荷S180腹水瘤小鼠的生存时间。
- 陈建鹤焦炳华缪为民王梁华冯煜朱玉平娄永华缪辉南
- 关键词：鲨鱼软骨溶菌酶抗肿瘤活性
- 中国姥鲨软骨活性成分及其人同源分子的克隆、表达及活性研究
- 中国姥鲨软骨组织经盐酸肌抽提、超滤、Sephacryl S-200和Superdex 75层析可得到分子量分别为15.2和8.3kDa的活性物质,并分别命名为Sp15和Sp8.Sp8体外可抑制血管内皮细胞增殖,在体内具有...
- 焦炳华陈建鹤缪为民王梁华朱玉平娄永华缪辉南
- 文献传递
- SM7微卫星标记快速多态分析行Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病的基因诊断被引量：1
- 1998年
- 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对４个Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤⅠ）家系２４名个体的ＳＭ７（一种与ＡＤＰＫＤⅠ基因紧密连锁的微卫星标记）多态性进行连锁分析，其中３个家系得到了明确结果，ＰＣＲ扩增条带清晰，致病基因连锁关系明确。认为本法是一种快速、廉价、有效的ＡＤＰＫＤⅠ基因诊断方法。
- 王立明闵志廉朱有华齐隽齐隽缪为民焦炳华
- 关键词：多囊肾基因诊断微卫星标记常染色体显性遗传
- 鲨鱼软骨源蛋白抗肿瘤活性研究
- 恶性肿瘤的快速生长和转移与新生血管生长的关系密切.有效抑制新生血管生长,可望成为防治肿瘤的一种新方法.已有的研究结果表明,鲨鱼软骨中富含新生血管生长抑制活性物质,且这种活性成分主要存在于分子量小于30kD的组份中.该研究...
- 陈建鹤
- 关键词：鲨鱼软骨溶菌酶抗肿瘤活性
- LPS、TNFα刺激PBL诱导TRAIL表达的初步研究被引量：1
- 1999年
- 近来的实验显示从 EST来源的 TRAIL在体外能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡。我们选择人PBL作为人 TRAIL基因的来源 ,抽提细胞在 LPS和 rh- TNFα刺激 2、1 0、1 8h的总 RNA,通过RT- PCR观察 TRAIL基因转录 m RNA的水平 ,然后用 PCR扩增 TRAIL基因 ,并用免疫印迹法分析 TRAIL m RNA翻译蛋白的水平。结果发现 :在 LPS和 rh- TNFα的刺激下可以从 1 0 6 ～ 1 0 7个人 PBL中扩增出 TRAIL基因。提示 LPS和 rh- TNFα刺激细胞并进一步诱导细胞凋亡可能与诱导表达 TRAIL有关。本实验得到了 TRAIL基因 ,为重组表达 TRAIL打下了基础。
- 王梁华朱玉平潘卫娄永华陈建鹤冯煜焦炳华
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体LPS
