陈春霞
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
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- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 清道夫受体SR-PSOX基因定点突变的研究
- 2010年
- 目的构建清道夫受体SR-PSOX点突变体,揭示该受体与脂质结合的关键位点,为确定SR-PSOX在脂质摄取、泡沫细胞形成中的作用提供模型。方法利用分子克隆及PCR定点突变技术,构建不同突变点的片段并克隆到pEGFP-N3中,形成含有SR-PSOX各联合突变的pEGFP-SR-PSOX突变体质粒。转染293T细胞后采用流式检测受体表达情况。结果从THP-1源性的巨噬细胞中成功克隆SR-PSOX受体并在真核表达载体pEGFP-SR-PSOX基础上获得了SR-PSOX三种突变体(R78、R82H85、R78R82H85)。测序结果表明SR-PSOX序列中发生了预期的突变,使SR-PSOX受体中第78位精氨酸单点突变,第82位精氨酸、第85位组氨酸双点突变,第78、82位精氨酸和第85位组氨酸三点突变,均突变为丙氨酸,并将所有pEGFP-SR-PSOX突变体在293T细胞膜表面成功表达。结论定点突变PCR可以成功构建SR-PSOX受体的3种突变体,使之在293T细胞表面获得表达,为进一步研究SR-PSOX的功能奠定了基础。
- 刘威威尹岚张琪敏陈春霞戴亚蕾
- 关键词：清道夫受体定点突变转染
- TARC和MDC在日本血吸虫感染小鼠Th2应答及肝纤维化中的作用
- 2012年
- 目的探讨胸腺活化调节趋化因子（ thymus activation regulated chemokine, TARC）和巨噬细胞来源的趋化因子（ macrophage-derived chemokine, MDC）对日本血吸虫感染宿主Th2应答及肝脏纤维化的影响。方法建立日本血吸虫感染小鼠模型，取肠系膜淋巴结及肝脏，胞内细胞因子染色法和ELISA法检测Th2应答；实时荧光定量RT—PCR法检测TARC和MDC的mRNA表达；通过测定肝脏羟脯氨酸含量以反映其纤维化水平。结果宿主肝脏Th2应答趋势与肠系膜淋巴结一致，但感染7周时肝脏局部浸润T细胞中IL-13＋Th2约为5．3％，高于肠系膜淋巴结T细胞中IL-13＋Th2水平（3％）；肝脏羟脯氨酸含量在感染第5、7、10周分别为2．9μg／mg、5．1μg／mg和8．3μg／mg，随感染进程呈进行性加剧。感染第7周时宿主肠系膜淋巴结中的TARC和MDC的表达分别为对照组的0．5倍和0．4倍，而此时宿主肝脏中TARC和MDC的表达则显著增高，分别为对照组的12．8倍和8．2倍，并且在感染进入慢性期时仍维持较高水平，分别为对照组的3．8倍和4．4倍。结论血吸虫感染刺激宿主肝脏产生Th2类趋化因子TARC和MDC，促进Th2从外周淋巴器官向肝脏局部募集从而参与肝脏病理变化。
- 孙琳黄金伶李军陈春霞尹岚董晨
- 关键词：日本血吸虫趋化因子肝脏纤维化
- 体外研究人LOX-1受体功能的细胞模型建立被引量：3
- 2009年
- 目的研究LOX-1受体在早期动脉粥样硬化中的作用,建立体外LOX-1高表达细胞模型,用于探讨LOX-1与Ox-LDL的相互作用及参与泡沫细胞形成的机制。方法根据人类cDNA文库设计引物,采用巢式PCR技术用人单核细胞转化的巨噬细胞中扩增出LOX-1完整编码区,克隆至pEGFP-C1重组真核表达载体,经测序证实后,用脂质体转染法转染至293T细胞,采用RT-PCR鉴定外源基因的表达,倒置荧光显微镜检测质粒转染效率和融合蛋白的细胞膜上定位情况,流式细胞技术检测EGFP-LOX-1融合蛋白表达情况以及其对Ox-LDL的结合能力。结果pEGFP-LOX-1重建质粒经测序证实克隆的LOX-1序列完整,插入方向正确,转染后实验组LOX-1 mRNA大量表达,融合蛋白正确定位在细胞膜表面,并显示结合配体Dil-Ox-LDL的功能提高到6.3倍。表明所克隆的LOX-1受体具有特异性结合Ox-LDL的功能,从而建立了高表达LOX-1受体的细胞。结论成功克隆人类LOX-1基因,使其在293T细胞中高度表达并获得了相应的功能,为进一步研究LOX-1提供有利工具。
- 徐婷戴亚蕾尹岚杨红田菲陈春霞
- 关键词：LOX-1基因克隆真核表达
- 白细胞介素10对血管内皮细胞E选择素和血凝素样低密度脂蛋白受体1表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究白细胞介素10对人血管内皮细胞表面黏附分子E选择素、细胞间黏附分子1及血凝素样低密度脂蛋白受体1表达的影响,探讨白细胞介素10抗动脉粥样硬化可能的机制。方法将人脐静脉内皮细胞随机分为四组进行不同处理24 h:即空白对照组、氧化型低密度脂蛋白组、白细胞介素10组和白细胞介素10与氧化型低密度脂蛋白联合刺激组。采用流式细胞术检测细胞表面黏附分子E选择素和细胞间黏附分子1表达的变化;采用实时定量PCR和Western Blotting分别检测血凝素样低密度脂蛋白受体1的mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组比较,细胞经氧化型低密度脂蛋白刺激24 h后,其表面的黏附分子E选择素表达量显著增加了20%,血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达量也显著增加了25%,而同时加入白细胞介素10联合刺激组E选择素和血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达量与氧化型低密度脂蛋白组比较均出现显著下降(分别为20%和40%),回到基线水平。而单独使用白细胞介素10对E选择素及血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达没有影响;本实验未能检测到氧化型低密度脂蛋白对细胞间黏附分子1表达的影响。结论抗炎因子白细胞介素10能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,对血管内皮细胞发挥保护作用;同时降低血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达,减少氧化型低密度脂蛋白对内皮细胞活化,这些可能是白细胞介素10抗动脉粥样硬化的机制之一。
- 姬果尹岚刘威威戴天耘陈春霞戴亚蕾
- 关键词：血管内皮细胞氧化型低密度脂蛋白白细胞介素10细胞间黏附分子1E选择素
- 系统性免疫学实验教学中培养医学生科研能力的探讨被引量：1
- 2009年
- 为了适应八年制临床医学专业教学计划的要求以及培养具有科研意识的医学生，同济大学医学院免疫学教研室对免疫学实验教学进行了改革，重新设计了一项贯穿整个学期的系统性免疫学实验，以验证“弗氏佐剂增强免疫应答”这一经典的免疫学现象并探讨其机制，旨在帮助学生通过实验更好地理解免疫学理论；同时，培养学生科研思维能力及学习用论文方式来总结及讨论实验结果的方法。此项教学改革在2004级和2005级八年制临床医学专业学生免疫学实验教学中进行了尝试，受到了学生的好评。
- 尹岚李佳和云鹍陈春霞池丰丽陈小平
- 关键词：免疫学实验教学
