任艳萍
- 作品数:18 被引量:15H指数:2
- 供职机构:遵义医学院基础医学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划广西壮族自治区自然科学基金广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 乳腺组织染色质免疫共沉淀方法的改进
- 2014年
- 作为研究基因表达调控的重要方法,近年来染色质免疫共沉淀(ChIP)得到了越来越广泛的应用,但有关将乳腺组织作为ChIP材料的研究及其方法尚未见报道。采用传统的组织ChIP试剂盒处理乳腺组织时,存在样品回收率低、乳脂/乳蛋白影响杂交效率和超声积热等问题,针对以上问题对乳腺组织ChIP方法进行改进。新方法省略组织均一化步骤、用酶切-超声法代替超声法进行染色质片段化、在细胞裂解和酶切步骤间增加洗涤步骤。结果显示,与脾脏组织相比,乳腺组织不适合进行组织均一化处理。酶切-超声法比超声法更适于对乳腺组织进行染色质片段化。采用改进后的ChIP方法获得的DNA样品中,靶序列得到显著的富集,所得的DNA样品能够满足测序(ChIP-Seq)要求。结果说明,改进后的方法适用于乳腺组织染色质免疫共沉淀,并为研究乳腺组织基因表达调控奠定了基础。
- 任艳萍罗婵黄章虎黄时海石德顺李湘萍
- 关键词:表观遗传学CHIP乳腺NUCLEASE
- 徒手克隆工具自制及改进被引量:1
- 2011年
- 徒手克隆技术(handmade somatic cell cloning,HMC)解决了由于昂贵设备对核移植技术应用的制约问题。通过徒手克隆刀的自制,不但进一步节省了成本,且更能符合使用者的习惯,提高总的切割效率。试验结果表明,利用自制克隆刀进行半卵法去核,可以达到每小时切割496枚卵母细胞的切割速度和88.14%的存活率;自制聚集针具有制作简单,可以打磨、效果好等特点,可以进一步简化和降低徒手克隆技术的成本,提高克隆效率。
- 黄章虎任艳萍谭世俭
- 徒手克隆工具的自制及改进
- 徒手克隆技术(HMC)解决了由于昂贵设备对核移植技术应用的制约问题。通过徒手切割去核刀的自制,不但进一步节省了成本,而且更能符合使用者的习惯,提高了总的切割效率。实验结果表明,利用自制切割刀半卵法去核,可以达到每小时切割...
- 黄章虎任艳萍谭世俭孙洪亮
- 文献传递
- 乳腺特异性表达水牛PRL基因载体、构建及其应用
- 本发明公开了一种乳腺特异性表达水牛PRL基因载体、构建及其应用,利用β-酪蛋白启动子启动水牛PRL基因,构建了乳腺特异性表达水牛PRL基因载体,并将该载体转入动物基因组中获得乳腺特异性表达水牛PRL蛋白的转基因动物,其乳...
- 刘庆友石德顺任艳萍李湘萍陆凤花
- 水牛卵母细胞孤雌激活方法的优化
- 2011年
- 为了研究离子霉素(Ion)在不同环境下对水牛孤雌激活效果的影响及水牛卵母细胞在6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)液中以聚集激活或分离激活方式对激活效果的影响。试验对比了水牛卵母细胞在25℃室温环境和38.5℃CO2培养箱环境下的Ion激活效果,还比较了水牛卵母细胞在6-DMAP液中进行聚集激活和分离激活的孤雌激活效果。结果表明:试验组8-细胞胚胎率(54.11%)和囊胚率(31.51%)均高于对照组的8-细胞胚胎率(51.68%)和囊胚率(27.52%),但无统计学差异;在6-DMAP液中分离激活组(1组)的囊胚率明显优于聚集激活组(2组)的囊胚率。
- 黄章虎祝晓丽任艳萍范晓明谭世俭
- 关键词:水牛卵母细胞孤雌激活
- 电转染水牛胎儿成纤维细胞方法的建立
- 电转染法获得转基因动物绌胞是转基因克隆动物研究的重要技术环节。本研究探讨了利用电转染法制备水牛转基因体细胞作为供体,生产转基因克隆胚胎的可行性。采用组织块贴壁法分离培养得到水牛胎儿成纤维细胞,经核型分析表明得到的细胞具有...
- 罗婵陆凤花陈施蓓李楠任艳萍李辉刘庆友石德顺
- 关键词:转基因细胞克隆
- 文献传递
- 水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织miRNAs表达谱鉴定及差异表达分析被引量:2
- 2017年
- 旨在鉴定分析水牛乳腺泌乳期和非泌乳期miRNA的表达谱和差异作用机制。采集水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织,利用Solexa测序技术构建2个时期miRNAs表达谱,鉴定前体miRNAs、成熟miRNAs和新miRNAs,分析miRNAs的第一偏好性核苷酸和染色体分布,发掘水牛泌乳期和非泌乳期高表达及差异表达miRNAs。结果显示,本研究构建了水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织2个miRNA表达谱,分别获得12 768 110和12 569 467条18~31nt的高质量序列。测序确认了归属259个miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个pre-miRNAs及5个水牛特有的miRNAs。U是19和25nt miRNAs的5′端最普遍的核苷酸。bbu-let-7b、bbu-let-7a、miR-26a和miR-21等miRNAs在2个时期均呈现高表达;bbu-miR-148a、143、200c、200a和bbu-let-7f等miRNAs在非泌乳期特异性高表达。bbu-miR-125b、29a和bbu-let-7c等miRNAs在泌乳期特异性高表达。bbu-miR-148a、143、200a、141和30a-5p等miRNAs在泌乳期的表达量下降为非泌乳期的1/2以下。而bbu-miR-26a、29a、125b、99a和bbulet-7c等miRNAs在泌乳期表达量大于或等于2倍非泌乳期丰度。本研究构建了水牛泌乳期以及非泌乳期乳腺组织2个miRNAs表达谱,测序确认了259个水牛miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个前体miRNAs,5个水牛特有miRNAs和10个高差异表达miRNAs,为进一步阐明奶水牛泌乳关键miRNAs作用机制奠定了基础。
- 蔡小艳鲍正攀古景开邓凯张晓溪任艳萍沈朋雷石德顺刘庆友
- 关键词:水牛乳腺组织信号通路
- 转PRL基因小鼠模型的构建与Stat5a的乳腺发育调控机理研究
- 催乳素(prolactin,PRL)是一种多肽类激素,具有促进乳腺发育、启动并维持泌乳的功能。PRL的生理功能主要通过PRLR-JAK/Stat5信号通路介导,而PRL、PRLR、Stat5a、Stat5b基因是介导乳腺...
- 任艳萍
- 关键词:乳腺细胞催乳素
- 水牛卵母细胞化学定向去核的初步研究
- 目的探讨通过化学定向去核方法对核成熟前水牛卵母细胞的去核,以简化水牛手工克隆技术程序。材料与方法实验用卵为体外成熟培养后,挑选出已排出第一极体成熟卵母细胞后剩余的核未成熟水牛卵母细胞(下称剩余水牛卵母细胞)。对比了卵母细...
- 黄章虎任艳萍谭世俭
- 文献传递
- 针对不同章节内容进行组织学与胚胎学混合式教学被引量:8
- 2018年
- 随着教学改革的推进,各种教学模式层出不穷,极大促进了学生的学习兴趣,提高了组织胚胎学教学质量;然而不同章节内容适应不同的教学方法,不能生搬硬套强行施用一种教学模式,而应灵活运用多种教学模式来匹配组织胚胎学不同的章节内容,根据实际的教学因素进行教学模式的调整。
- 易晓东任艳萍柳琼友陆祥陈伟
- 关键词:组织胚胎学教学模式混合式教学