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人γ干扰素/β肿瘤坏死因子融合蛋白原核细胞高效表达研究被引量：2: 1998年; 利用ＤＮＡ重组技术，在构建人γ干扰素突变体（ｈＩＦＮγ１３４Ｘ１３）表达质粒，取得高效表达的基础上，再将人β肿瘤坏死因子（ｈＴＮＦβ１４３，Ｎ端缺失２３ａａ）的ＤＮＡ片段亚克隆到该质粒外源编码序列的３′端，构建成人γ干扰素／β肿瘤坏死因子融合蛋白（ｈγＴＮＦβ）的重组基因表达质粒，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）。含有ｈγＴＮＦβ重组基因的阳性菌经温度（４２℃）诱导，在λＰＲＰＬ启动子的控制下，高效表达了ｈγＴＮＦβ。ＳＤＳＰＡＧＥ结果显示，在理论分子量３０ｋＤ处出现特异的目的蛋白表达带，表达量约占全菌蛋白的１８％。表达产物主要以不溶性的包涵体（ＩＢｓ）形式存在，通过分离纯化ＩＢｓ产物及复性处理，表达产物的抗病毒比活性与细胞毒比活性分别达到５０～５８×１０７ｕ／ｍｇｐ和４２～４９×１０７ｕ／ｍｇｐ。; 周晴马志章冯根生冯根生张惟杰陈常庆; 关键词：融合蛋白 TNF 干扰素原核细胞

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冯根生