刘小芳
- 作品数：30 被引量：44H指数：4
- 供职机构：新疆农垦科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项新疆生产建设兵团农业科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- 一种自走式籽用瓜联合收获机
- 本实用新型涉及一种自走式籽用瓜联合收获机，包括捡拾器、固定支架、拔瓜除草器、粉碎器、液压油箱、籽瓜筛选器、储籽箱。它具有籽瓜捡拾效率高、仿形效果好、生产效率高的优点。
- 杨怀君阎洪山汤智辉何义川孟祥金卢勇涛张恒斌刘小芳
- 文献传递
- 乌拉尔图小麦NBS-LRR家族生物信息学分析被引量：4
- 2018年
- 乌拉尔图小麦(Triticum urartu)为二倍体小麦,是普通小麦(Triticum aestivum,由A,B,D三个亚基因组成的异源六倍体)A基因组供体。普通小麦基因组庞大,异源六倍体性质导致其基因组研究存在困难。伴随普通小麦供体A基因组和D基因组的测序完成,为小麦A基因组供体NBS-LRR基因家族的研究提供了重要生物信息学数据。目前获得的抗病(R)基因大部分具有NBS(nucleotide-bindingsite)和LRR(leucine-rich-repeat)结构域,属于NBS-LRR基因家族。本研究采用HMMER对乌拉尔图小麦蛋白序列信息进行了NBS-LRR家族基因筛选,通过Paircoi2网站进行coil-coil结构域分析,采用Uniprot和NCBIBlast进行了验证和排除,经Bioedit、MEGA5.1、ClustalW、Jalview等软件进行了NBS-LRR基因序列分析,确定了乌拉尔图小麦的NBS-LRR基因数量、类型、结构特点和系统发育学关系。最终从乌拉尔图小麦中获得485个NBS-LRR基因,占基因组1.503%,其中331个N型,163个CNL型(其中34个CN型),60个NL型,无Tir型。随后经MEME网站筛选获得CNL亚家族中的15个相对保守的motif,N末端结构均保守性较高。此外,PLN00113出现在LRR的位置,在系统进化树的各分支中随机性分布。乌拉尔图小麦NBS-LRR基因的分类、蛋白序列的motif分析和系统进化树的研究为小麦NBS-LRR家族基因的功能研究提供重要依据。
- 刘小芳袁欣聂迎彬张晶
- 关键词：NBS-LRR基因家族生物信息学分析
- ‘小白杏’自交不亲和SFB基因RNAi表达载体的构建被引量：2
- 2016年
- 【目的】应用RNA干扰(RNAi)技术在分子水平调控杏自交不亲和性状,为培育自交亲和杏品种奠定基础。【方法】基于南疆自交不亲和杏品种‘小白杏’(Prunus armeniaca‘Xiaobaixing’)花粉决定子SFB(S-haplotype-specific Fbox protein)基因3’端c DNA全长序列,选取SFB基因变异区上游距起始密码子61 bp处、大小为29 bp的片段作为干扰序列,棉花基因组DNA 242 bp的序列作为间隔片段,利用融合PCR(Fusion PCR)构建SFB基因发卡结构(intron-containing hairpin RNA,ihp RNA),再酶切连接到植物表达载体p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII上,构建SFB基因RNAi表达载体;用冻融转化法将重组质粒转化至农杆菌菌株(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中。【结果】测序结果表明臂长29 bp、茎环242 bp的SFB基因ihp RNA结构融合成功,双酶切检验和PCR验证结果表明,该结构正确地插入p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII的启动子和终止子之间,说明SFB基因的RNAi表达载体p CAMBIA-RNAi-SFB构建成功;PCR验证和测序结果也表明重组质粒已经成功转入农杆菌LBA4404中。【结论】研究结果表明,应用融合PCR结合酶切连接的方法构建SFB基因的RNAi表达载体是可行的,为RNAi技术在果树自交不亲和性状改良上的应用创造了条件。
- 刘海楠冯建荣罗明刘小芳李文慧白茹
- 关键词：自交不亲和
- '库尔勒香梨'SFBB-γ基因全长的克隆与序列分析
- [目的]克隆新疆特色梨品种'库尔勒香梨'花粉SFBB-γ基因全长序列,为梨亚科SFBB基因的功能鉴定提供更多的依据,为进一步探索自交不亲和机制、培育自交亲和品种奠定分子基础.[方法]以新疆轮台国家果树资源圃采集的'库尔勒...
- 吕文娟刘海楠刘小芳李文慧冯建荣
- 关键词：自交不亲和性RACE
- 滴灌棉田棉蚜快速监测与预警方法
- 本发明公开了一种滴灌棉田棉蚜快速监测与预警方法，包括以下步骤：⑴、获取滴灌棉田棉蚜数量，同时获取滴灌棉田气候情况；⑵、根据步骤⑴的滴灌棉田气候，观察连续五日的变化情况，与前3～10年同一期间的气候变化情况进行对比，若两者...
- 吕新张国龙陈剑张泽田敏李新伟王海江冯波刘小芳
- 文献传递
- 库尔勒香梨组织培养的研究被引量：13
- 2016年
- 香梨果实肉质细腻,酸甜可口,是我国重要的出口创汇农产品之一。目前,香梨普遍存在坐果率低、产量不稳定的问题,通过组织培养进行遗传转化改良性状是当前果树高效育种的重要策略。本试验以库尔勒香梨茎段萌发的嫩芽为材料,通过离体组织培养,研究0.1%HgCl_2溶液消毒时间对外植体灭菌效果和褐化的影响,并探讨了适宜的增殖培养基和生根培养基配方。结果表明,库尔勒香梨组织培养过程中,0.1%HgCl_2消毒的适宜时间为5 min;适宜的增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+1.5 mg/L GA3;适宜的生根培养基为1/2MS+0.05 g/L AC+1.0 mg/L IBA。
- 刘小芳冯建荣梁晓桐吕文娟李文慧樊新民
- 关键词：库尔勒香梨消毒时间增殖
- 2个中亚杏S-RNase基因全长的克隆与序列分析被引量：3
- 2015年
- 【目的】克隆中亚杏(Prunus armeniaca)品种自交不亲和花柱S-RNase基因全长序列,为分子手段调控杏自交不亲和性状奠定基础。【方法】以新疆栽培杏品种‘索格佳娜丽’和‘赛买提’为试材,利用RT-PCR克隆2个品种的花柱SRNase基因c DNA片段,RACE技术进行c DNA全长克隆,采用BLAST进行序列比对,Protparam软件分析2个基因的编码蛋白特性,MEGA 5.0构建进化树。【结果】从‘索格佳娜丽’中克隆了S_(52)-RNase(KF951503)基因,从‘赛买提’中克隆了一个新的S_(53)-RNase(KF975455)基因DNA和c DNA全长序列。S_(52)-RNase的DNA全长2 200 bp,c DNA全长765 bp,ORF(开放阅读框)长681 bp,编码226个氨基酸;S_(53)-RNase的DNA全长1 664 bp,c DNA全长907 bp,ORF长732 bp,编码242个氨基酸。BLASTP比对显示:这2个基因都具有保守的RNase-T2基因结构,属于RNase-T2家族。预测相对分子质量分别为26.5 ku和27.5 ku,等电点为9.36和9.03,都属于亲水性蛋白。进化分析表明,S_(52)与李(Prunus salicina,S_7)、S_(53)与大岛樱(Prunus speciosa,S_(13))亲缘关系最近,S_(52)和S_(53)处在2个不同的分支上,表现出较高的序列多态性,表明2个基因亲缘关系较远。【结论】获得了2个中亚杏品种自交不亲和花柱S-RNase基因全长序列。
- 李亚兰刘小芳刘海楠李文慧冯建荣
- 关键词：自交不亲和S-RNASE基因RACE
- ‘小白杏’自交不亲和SFB基因的克隆及其表达载体的构建
- 2015年
- 【目的】利用基因工程技术改良杏自交不亲和性状,为培育自交亲和杏品种奠定基础。【方法】以新疆自交不亲和杏品种‘小白杏’(Prunus armeniaca L.‘Xiaobaixing’)的花粉为材料,通过RT-PCR(Reverse Transcription PCR)和3’RACE(Rapid Amplification of c DNA Ends)技术克隆SFB基因(S-haplotype-specific F-box protein)片段。以克隆载体p MD19-T为基础,结合p BS-T上的酶切位点,利用酶切连接的方法将SFB基因的ORF框正向重组到表达载体p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII的Kpn I和Sac I酶切位点之间,构建SFB基因正义表达载体p CAMBIA-S-SFB;将SFB基因的ORF框反向重组到表达载体的Kpn I和Sal I酶切位点之间,构建SFB基因反义表达载体p CAMBIA-A-SFB;用电击转化法将重组质粒转化至农杆菌菌株(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中。【结果】通过RT-PCR和RACE技术获得了1136 bp SFB基因片段(Gen Bank登录中),其中含912 bp ORF框(Open Reading Frame),由它推导的氨基酸序列与蔷薇科SFB基因高度同源,具有F-box结构域、2个变异区和2个高变区的完整结构;表达载体酶切检验结果表明,SFB基因的ORF框正确地插入p CAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII的启动子和终止子之间,表明SFB基因的正、反义表达载体构建成功;特异引物PCR验证结果也表明重组质粒已经成功转入农杆菌LBA4404中。【结论】研究的结果为利用基因工程技术改良杏自交不亲和性状、培育自交亲和杏品种的遗传转化提供了载体。
- 刘海楠冯建荣李文慧罗明刘小芳孙军利
- 关键词：自交不亲和
- 制干线椒—金线一号
- 2015年
- 金线一号株型整齐,生长势中庸,早熟性突出,产量高,品质好。本文简要介绍了该品种的选育过程、品种特性及主要栽培技术。
- 李娜金玮玲陆新德李建华祝晏兵刘小芳季文龙李姗
- 关键词：选育高产栽培
- 三系杂交小麦种子纯度分子标记及其引物对和应用
- 本发明公开了一种三系杂交小麦种子纯度分子标记及其引物对和应用，其中的分子标记为SSR分子标记，所述分子标记为位于2A染色体上的Wmc474或位于1B染色体上的Barc8。本发明可准确鉴定AL型三系杂交小麦种子纯度。
- 田笑明聂迎彬刘小芳
- 文献传递
