刘纪玉
- 作品数:10 被引量:13H指数:2
- 供职机构:山东省农业科学院更多>>
- 发文基金:山东省优秀中青年科学家科研奖励基金公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 一例仔猪疑似伪狂犬病的诊断分析
- 2017年
- 伪狂犬病(PR)是由a-疱疹病毒引起多种动物共患的一种急性传染病,致病力极强。2周龄以内的哺乳仔猪感染病死率可达100%,随日龄增加,症状减轻,病死率逐渐降低f妊娠母猪感染后可引起流产。产死胎、产木乃伊等繁殖障碍,母猪产后无乳和体温升高,给养猪业带来巨大的经济损失。
- 刘纪玉刘斌孟凡伟杜以军
- 关键词:伪狂犬病哺乳仔猪妊娠母猪疱疹病毒繁殖障碍产后无乳
- HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量:3
- 2013年
- 本试验旨在建立一种用SYBR GreenⅠ荧光染料检测HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR mRNA表达水平的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路中进行初步应用。利用TRIzol法提取总RNA,经Oligo d(T)15进行反转录,利用PCR扩增各段目的基因,并克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经鉴定为阳性的重组质粒作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和熔解曲线,并进行灵敏性、特异性和重复性试验。根据建立的实时荧光定量RT-PCR方法,检测FMDV L蛋白对Ⅰ型IFN效应因子的抑制效果。HeLa细胞在转染FMDV L蛋白真核表达质粒,并受到Ⅰ型IFN刺激后ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR的相对表达量较转染空载体或表达GST的真核表达质粒明显降低。本试验建立了HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的实时荧光定量RT-PCR检测方法,为在mRNA水平上对HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的定量分析奠定了基础,并成功地初步应用于FMDV L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路的研究中。
- 刘纪玉杜以军刘星吴家强李俊丛晓燕赵新华徐绍建孙文博时建立单虎王金宝
- 关键词:实时荧光定量RT-PCRSYBRL蛋白干扰素
- 基因调控型质粒串联表达猪α、γ干扰素及其体外抗PRRSV活性研究
- 前期发现真核表达载体pVAX1■表达的猪α、γ干扰素活性较低。本研究利用兔β-Globin Intron II基因调控序列,改造真核表达载体pVAX1■,构建基因调控型质粒,将猪α干扰素(pIFN-α)和γ干扰素(pIF...
- 杜以军刘纪玉张怡轩吴家强王金宝
- 关键词:猪Α干扰素猪Γ干扰素猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性
- 文献传递
- FMDV 3C蛋白抑制JAK-STAT信号通路的机制研究
- 目前已有研究报道口蹄疫病毒(FMDV)的L蛋白和3C蛋白能够抑制Ⅰ型干扰素的产生.然而,FMDV是否有蛋自抑制Ⅰ型干扰素发挥效应的信号通路未见任何报道.本研究首次发现FMDV的3C蛋白能够抑制JAK-STAT信号通路.3...
- 杜以军闭璟珊孙文博吴香菊刘纪玉吴家强陈蕾王金宝
- 关键词:口蹄疫病毒信号通路免疫机制
- 文献传递
- 基因调控型质粒串联表达猪α、γ干扰素及其体外抗PRRSV活性研究
- 前期发现真核表达载体pVAX1■表达的猪α、γ干扰素活性较低。本研究利用兔β-Globin Intron II基因调控序列,改造真核表达载体pVAX1■,构建基因调控型质粒,将猪α干扰素(pIFN-α)和γ干扰素(pIF...
- 杜以军刘纪玉张怡轩吴家强王金宝
- 关键词:猪Α干扰素猪Γ干扰素猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性
- HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用
- 刘纪玉杜以军刘星吴家强李俊丛晓燕徐绍建孙文博时建立单虎王金宝
- 关键词:实时荧光定量RT-PCRL蛋白干扰素
- FMDV L蛋白真核表达质粒的构建及对IFN效应因子的影响
- 刘纪玉
- 文献传递
- 当前山东省猪群疫病的流行特点及防控对策被引量:8
- 2014年
- 基于对临床发病样本的连续监测,结合流行病学调查发现,当前山东省猪群疫病中存在着混合感染和继发感染十分普遍,呼吸道疾病严重,繁殖障碍疾病长期困扰,免疫抑制性疾病、细菌性疾病的危害加大,猪流行性腹泻多有发生等流行特点。针对这些特点,本文提出了建立健全的生物安全体系,加强饲养管理,制订科学的免疫程序,进行合理的药物保健,对猪群进行血清学监测和发病时病原的正确诊断等综合防控对策。
- 杜以军吴家强刘纪玉郭立辉王金宝
- 关键词:养猪业疫病防控对策
- 基因调控型质粒串联表达猪α、γ干扰素及其体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究被引量:2
- 2013年
- 利用兔β-Globin Intron II基因调控序列,改造真核表达载体pVAX1,构建基因调控型质粒,将猪α干扰素(pIFN-α)和γ干扰素(pIFN-γ)进行串联表达。结果表明,重组质粒pMVAX1-pIFN-α/γ表达的IFN活性相比pVAX1-pIFN-α提高了100倍,比pVAX1-pIFN-γ提高了1 000倍。体外抗病毒活性表明,pIFN-α/γ的量为100 U(稀释度1∶106)以上时,对100 TCID50的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)具有明显的抑制效果,说明串联表达的pIFN-α和pIFN-γ具有高效抗PRRSV效果。本研究将为PRRS的预防治疗提供新的思路和方法。
- 周顺刘纪玉赵红波张怡轩郭立辉吴家强时建立任素芳王金宝杜以军
- 关键词:猪Α干扰素猪Γ干扰素猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性
- 基因调控型质粒串联表达猪α、γ干扰素及其体外抗PRRSV活性研究
- 前期发现真核表达载体pVAX1(C)表达的猪α、γ干扰素活性较低。本研究利用兔β-Globin Intron Ⅱ基因调控序列,改造真核表达载体pVAX1(C),构建基因调控型质粒,将猪α干扰素(pIFN-α)和γ干扰素(...
- 杜以军刘纪玉张怡轩吴家强王金宝
- 关键词:猪Α干扰素猪Γ干扰素抗病毒活性基因调控
- 文献传递