叶瑾
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNAi特异性抑制FoxO3a对胰岛素抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌微血管内皮凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 观察FoxO3a基因干扰对胰岛素抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌微血管内皮凋亡的影响。分离培养大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs),建立模拟缺血再灌注模型。分别选用胰岛素、FoxO3a小干扰RNA处理细胞。MTT检测CMECs存活率;TUNEL检测CMECs凋亡;检测细胞的caspase-3活性,Western blot法检测FoxO3a、p-FoxO3a(Thr32)、SVV蛋白的表达。结果显示模拟缺血再灌注+胰岛素+FoxO3a siRNA组FoxO3a总蛋白水平明显减少(P<0.05);与模拟缺血再灌注+胰岛素组相比,模拟缺血再灌注+胰岛素+FoxO3a siRNA组的存活率下降,凋亡率、caspase-3活性增加,FoxO3a、SVV表达减少(P<0.05)。结果 FoxO3a在胰岛素抑制缺血再灌注损伤诱导的心肌微血管内皮凋亡中有一定的作用,且主要通过去磷酸化(失活)调控这一过程。
- 叶瑾司瑞张荣庆郭文怡
- 关键词：胰岛素小干扰RNAFOXO3A
- 胰岛素通过Akt/FoxO/SVV信号通路抑制缺血再灌注损伤诱导心肌微血管内皮细胞凋亡的作用研究
- 2015年
- 目的探讨胰岛素(INS)在抑制缺血再灌注损伤(IRI)诱导的心肌微血管内皮细胞(CMECs)凋亡中的作用及其分子机制。方法分离和培养大鼠CMECs,建立模拟缺血再灌注(SI/R)模型,分别选用INS、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性抑制剂渥曼青霉素(Wort)和Fox O1/3a干扰RNA处理细胞。采用随机数字表法对大鼠CMECs进行分组:SI/R组(5只大鼠的CMECs),SI/R+INS组(5只大鼠的CMECs),SI/R+INS+Wort组(5只大鼠的CMECs),SI/R+INS+Fox O1siRNA组(6只大鼠的CMECs),SI/R+INS+Fox O3asiRNA组(4只大鼠的CMECs)。采用末端转移酶标记技术(TUNEL)检测各组CMECs凋亡率,ELISA法检测各组Caspase-3活性,Western blotting法检测各组p-Akt(Ser473)、p-Fox O1(Ser256)、p-Fox O3a(Thr32)、生存素(SVV)蛋白表达水平。结果与SI/R组比较,SI/R+INS组、SI/R+INS+Fox O1siRNA组、SI/R+INS+Fox O3asiRNA组CMECs凋亡率及Caspase-3活性均降低(P<0.01);而SI/R+INS+Wort组CMECs凋亡率及Caspase-3活性与SI/R组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与SI/R+INS组比较,SI/R+INS+Fox O1siRNA组、SI/R+INS+Fox O3asiRNA组CMECs凋亡率及Caspase-3活性升高(P<0.01);且SI/R+INS+Fox O1siRNA组CMECs凋亡率高于SI/R+INS+Fox O3asiRNA组(P<0.01)。Western blotting检测结果显示:SI/R+INS组p-Akt、p-Fox O1、p-Fox O3a、SVV蛋白表达水平均高于SI/R、SI/R+INS+Wort组、SI/R+INS+Fox O1siRNA组以及SI/R+INS+Fox O3asiRNA组(P<0.01);且SI/R+INS+Fox O3asiRNA组SVV蛋白表达水平低于SI/R+INS+Fox O1siRNA组(P<0.01)。结论 NIS可显著抑制IRI诱导的CMECs凋亡,其机制可能与激活Akt/Fox O/SVV信号通路相关,且主要通过Fox O3a的激活上调SVV蛋白表达水平,从而抑制CMECs凋亡。
- 叶瑾司瑞郝启萌付志诚张荣庆郭文怡
- 关键词：胰岛素信号传导内皮细胞细胞凋亡
- 促红细胞生成素衍生肽抑制缺血/再灌注损伤诱导的大鼠心肌细胞凋亡被引量：6
- 2013年
- 目的:探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)衍生肽又称螺旋B表面肽(helix B surface peptide,HBSP)在大鼠心肌缺血/再灌注损伤(I/RI)中的拮抗作用及其机制。方法:82只200～250 g雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组(n=18)、缺血/再灌注(I/R)组(n=18)、EPO组(n=18)、HBSP组(n=18)及HBSP+LY294002(PI3k特异性抑制剂)组(n=10)。于灌注前5 min,于EPO组及HBSP组大鼠的尾静脉分别注射生理盐水重组人EPO(rhEPO;3 000 U/kg,4 ml/kg)及生理盐水HBSP(60μg/kg,4 ml/kg)。颈动脉插管检测血流动力学指标,采用小动物超声分别检测24 h、1周后大鼠心功能。用TTC-EB双染测定梗死面积,Western blot法检测心肌组织蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt的表达。用TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果:与I/R组相比,EPO组和HBSP组再灌注后大鼠心脏左室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)以及最大下降速率(-dp/dtmax)明显改善(P<0.05),左室射血分数[LVEF(%)]、室间隔厚度(IVSS)及左室短轴缩短率[FS(%)]显著增加(P<0.05),同时心肌梗死面积明显缩小(P<0.05),心肌细胞凋亡显著减少(P<0.05);HBSP组Akt磷酸化水平显著提高(P<0.05)。HBSP+LY294002组与HBSP组相比,Akt磷酸化水平明显降低,心肌细胞凋亡指数显著增高(P<0.05)。HBSP组与EPO组间各项指标均无显著差别。结论:HBSP能够显著抑制I/RI诱导的大鼠心肌细胞凋亡,减少梗死面积,明显改善心功能,其保护作用可能与激活PI3K-Akt通路有关。
- 蒋娜叶瑾党晶艺左惠荣张荣庆司瑞郭文怡
- 关键词：促红细胞生成素多肽缺血再灌注细胞凋亡
- 冠状动脉微血管内皮细胞释放的神经调节蛋白-1对缺血/再灌注心肌的作用及其机制探讨被引量：4
- 2015年
- 目的探讨大鼠缺血/再灌注损伤(I/RI)时,神经调节蛋白-1(NRG-1)在冠状动脉微血管内皮细胞(CMECs)-心肌细胞共培养中的作用及其机制。方法分离培养大鼠CMECs和心肌细胞,建立CMECs-心肌细胞共培养(Coculture)模型和体外模拟缺血/再灌注(SI/R)模型,收集CMECs培养上清。MTT法检测心肌细胞活性,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,Western blot法检测CMECs培养上清中NRG-1表达、心肌细胞p Erb B2、p ERK基因和环氧化酶-2(COX-2)水平,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)酶活性反应心肌细胞凋亡。结果在心肌细胞中,与对照组相比,SI/R(4 h/4 h)组细胞活性明显降低(P<0.01),SI/R+Coculture组细胞活性升高(P=0.02)。CMECs在SI/R 4 h/4 h时,NRG-1的分泌较对照组增加最明显(P<0.01)。心肌细胞SI/R组凋亡指数和Caspase-3酶活性比对照组明显升高(27.97±0.90比3.58±0.23,P<0.01;375.93±11.76比100.00±0.00,P<0.01)。共培养或NRG-1处理细胞后,凋亡指数和Caspase-3酶活性较SI/R组降低(16.82±1.03比27.97±0.90,P<0.01;166.16±15.15比375.93±11.76,P<0.01),且Erb B2和ERK磷酸化水平以及COX-2表达明显增加(均为P<0.01)。用Erb B2或ERK1/2抑制剂预处理心肌细胞后,共培养和NRG-1的作用消失(均为P<0.01)。结论在I/RI过程中,CMECs释放NRG-1,抑制I/RI诱导的心肌细胞凋亡,其保护作用与增加Erb B2、ERK磷酸化和COX-2表达可能有关。
- 郝启萌司瑞叶瑾付志诚王琛邵虹张荣庆郭文怡
