吕树军
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
- 供职机构：南开大学医学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 利用同源蛋白的信号肽和前肽序列在CHO细胞中表达重组人BMP6被引量：1
- 2007年
- BMP6属于TGF-β超家族,具有较强的骨诱导作用。主要利用BMP6自身的信号肽、前肽与成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP6;同时利用BMP2的信号肽、前肽与BMP6的成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP2/6。将两种质粒分别瞬时转染Cos7细胞,发现质粒pcDNA-BMP2/6表达rhBMP6的效率高于质粒pcDNA-BMP6。然后将质粒pcDNA-BMP2/6与含二氢叶酸还原酶基因(dhfr)的表达质粒共转染dhfr缺陷型的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞,经G418筛选、氨甲蝶呤(MTX)介导目的基因扩增、亚克隆后得到表达rhBMP6成熟肽的单克隆细胞株。将表达产物rhBMP6初步纯化后,能诱导前成肌细胞系C2C12向成骨细胞方向转化,显示其具有骨诱导作用。
- 闫继东杨爽吕树军雷荣悦朱天慧
- 关键词：骨诱导作用
- 重组人骨形态发生蛋白2在CHO细胞中的表达、鉴定及活性分析被引量：9
- 2006年
- 构建真核表达载体pCDNA3.1(+)-hBMP-2,与质粒pSV2-dhfr共转染CHO-dhfr-细胞,以含有700μg/mLG418的IMDM进行选择性培养,筛选抗性克隆,并用MTX扩增,提高rhBMP-2的表达量。收集的rhBMP-2蛋白进行Westernblot检测,还原蛋白样品电泳产生一条大小约为18kD的特异性条带,非还原蛋白样品电泳产生一条大小约为30kD的特异性条带,提示表达的rhBMP-2是经过糖基化修饰的,且以同源二聚体形式分泌表达。单细胞分离培养得到14株rCHO(hBMP-2)单克隆细胞株,ELISA法检测rhBMP-2表达水平,最高可达7.83μg/24h/106cells。活性分析结果表明,表达的rhBMP-2具有很强的生物学活性。
- 张道永杨爽吕树军闫继东朱天慧
- 关键词：人骨形态发生蛋白2CHO共转染C2C12
- 基因工程生产rhBMP-6成熟肽
- 朱天慧阳菊华杨爽吴双庆赵丽吕树军
- 该课题在国内首先建立了hBMP-6成熟肽及GST-BMP6成熟肽融合蛋白的原核表达系统，并依据其特性建立一套较完善、合理的纯化方案，获得纯度达90%以上的目的蛋白。经体外活性分析均具有较高的诱导成骨细胞分化的功能，从而为...
- 关键词：
- 关键词：蛋白纯化活性分析
