雷荣悦
- 作品数：4 被引量：18H指数：1
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- 相关领域：生物学理学医药卫生更多>>
- 应用SDS-PAGE技术分析重组蛋白的聚集性被引量：1
- 2007年
- 应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳技术分析重组蛋白质的表达水平以及纯化的结果时,发现其结果可以判定重组蛋白质的聚集状况,对聚集产生的原因及意义进行了讨论。
- 乔玉欢雷荣悦杜君朱天慧
- 利用同源蛋白的信号肽和前肽序列在CHO细胞中表达重组人BMP6被引量：1
- 2007年
- BMP6属于TGF-β超家族,具有较强的骨诱导作用。主要利用BMP6自身的信号肽、前肽与成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP6;同时利用BMP2的信号肽、前肽与BMP6的成熟肽基因序列构建了表达质粒pcDNA-BMP2/6。将两种质粒分别瞬时转染Cos7细胞,发现质粒pcDNA-BMP2/6表达rhBMP6的效率高于质粒pcDNA-BMP6。然后将质粒pcDNA-BMP2/6与含二氢叶酸还原酶基因(dhfr)的表达质粒共转染dhfr缺陷型的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞,经G418筛选、氨甲蝶呤(MTX)介导目的基因扩增、亚克隆后得到表达rhBMP6成熟肽的单克隆细胞株。将表达产物rhBMP6初步纯化后,能诱导前成肌细胞系C2C12向成骨细胞方向转化,显示其具有骨诱导作用。
- 闫继东杨爽吕树军雷荣悦朱天慧
- 关键词：骨诱导作用
- rhBMP-6在大肠杆菌中可溶表达、纯化及活性分析
- BMP-6是BMPs家族中的一员，是一种调节成骨细胞和成软骨细胞分化的骨诱导因子。在临床上主要应用于脊柱融合、长骨缺损、选择性骨折的修复。有诱骨活性的BMP-6是多二硫键的二聚体，疏水性极强容易聚集沉淀。
本研...
- 雷荣悦
- 关键词：骨形态发生蛋白MBP蛋白纯化碱性磷酸酶活性
- 文献传递
- 重组人BMP6在大肠杆菌中可溶表达、纯化及活性分析被引量：16
- 2008年
- BMP6是一种调节成骨细胞和成软骨细胞分化的骨诱导因子,在修复各种骨缺损方面具有很好的应用潜力。有诱骨活性的BMP6是多二硫键的二聚体蛋白,疏水性极强容易聚集沉淀。为了在大肠杆菌中可溶表达具有生物活性的重组人BMP6(rhBMP6),构建了具有TRX、GST、MBP、CBD融合标签和His6标签的rhBMP6成熟肽原核表达载体,调节诱导温度和IPTG浓度,比较不同融合标签和诱导条件对目的蛋白表达量和溶解性的影响。结果表明,MBP最能有效的增强rhBMP6的溶解性,诱导条件对溶解性影响较小。大肠杆菌BL21 trxB(DE3)这种硫氧还蛋白还原酶缺陷菌株为rhBMP6二硫键在胞质中形成提供了合适的氧化还原环境。MBP和BL21 trxB(DE3)相结合在细胞质中高效可溶表达出了BMP6融合蛋白二聚体。表达产物经亲和层析和凝胶排阻层析纯化后,能诱导成肌细胞系C2C12向成骨细胞方向转化。
- 雷荣悦乔玉欢闫继东杨爽朱天慧
- 关键词：MBPBL21可溶性
