吴景文
- 作品数：117 被引量：646H指数：15
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- 应用endostatin蛋白治疗裸鼠SHG44脑胶质瘤的实验
- 2001年
- 目的 克隆小鼠内皮抑素 (endostatin)基因 ,检测其表达蛋白生物学活性 ,应用该蛋白治疗裸鼠 SHG44脑胶质瘤 .方法 从小鼠胶原 c DNA用 PCR法克隆 endostatin基因 ,重组入 p UC19,测序后构建非融合表达载体 p DH- En-dostatin,使其在 DH5 α内经温度诱导表达 ,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性 .经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗其脑内胶质瘤 .结果 成功获得 endostatin基因 ,测序正确 .诱导表达蛋白 Mr为2 0× 10 3 ,具有抑制血管生成的活性 .该蛋白可抑制荷瘤裸鼠脑内胶质瘤生长 .结论 endostatin基因的表达和初步应用 ,为采用抗血管生成方法治疗脑胶质瘤等实体瘤研究奠定了实验基础 .
- 屈延章翔吴景文高大宽郭衍李侠
- 关键词：内皮抑素脑胶质瘤
- 大库容量人源性天然单链抗体库的构建被引量：3
- 2001年
- 目的 构建一个大库容量 (>10 8)的人类天然单链抗体库 .方法 从正常人 40 0 m L外周血分离淋巴细胞 ,提取m RNA后反转录出 c DNA第一链 ,行半套式 PCR扩增 VH和VL 基因片段 ,依次插入含 L oxp和 L oxp5 11序列的 p DAN5 ,电转化 TG1大肠杆菌 ,构建初级库进一步用初级库感染BS136 5使其 VH,VL 发生重组从而获得次级库 .结果 所有VH,VL 亚类基因都得到了扩增 ,sc Fv克隆效率为 99.9% ,重组效率为每个单克隆 BS136 5中含至少 8种不同的 sc Fv基因 .初级库容量为 10 7,次级库容量至少为 10 1 1 .结论 我们采用细胞内重组的方法构建了 10 1 1
- 郭庆东章翔费舟赵爱志王彦刚吴景文李侠张永琴
- 关键词：单链抗体基因工程技术
- Endostatin基因真核表达载体的构建及活性鉴定被引量：3
- 2001年
- 目的 构建 endostatin基因的真核表达载体 ,并将其转染 C6脑胶质瘤细胞 ,探讨其体外抑制血管内皮细胞生长的活性 .方法 利用 PCR法将大鼠血清白蛋白分泌信号连接在 endostatin基因的碳末端 ,构建成真核表达载体 pc DNA3-Sendostatin,利用 L ipofectamine法将其转染 C6脑胶质瘤细胞 ,采用细胞增殖实验进行 endostatin表达蛋白体外活性鉴定 .结果 成功构建了 endostatin基因真核表达载体 ,转染该载体的 C6脑胶质瘤细胞可分泌表达抑制血管内皮细胞增生的 endostatin蛋白 .结论 endostatin是一种有效的血管生成抑制剂 ,可进一步用于在体肿瘤的抗血管生成治疗 .
- 付洛安章翔吴景文高大宽杨利孙屈延
- 关键词：内皮抑素基因真核表达活性鉴定
- 脑胶质细胞瘤体内侵袭性的实验研究被引量：9
- 2001年
- 目的 探讨胶质瘤的体内侵袭和转移特性。方法 利用体外转染有绿色荧光蛋白(GFP)基因的大鼠C6脑胶质瘤细胞移植模型 ,将携有增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的pEGFP N3质粒体外转染C6细胞 ,筛选能稳定表达GFP的瘤细胞克隆 ,并做流式细胞仪和电镜检测。将阳性转染和未转染瘤细胞以立体定向法植入SD大鼠脑实质内 ,建立大鼠移植瘤模型。 4周后处死大鼠并作脑连续石蜡切片 ,相邻切片分别行苏木素 伊红 (HE)及免疫组织化学染色和荧光显微镜 (激发光波长为 488nm)检测。对移植瘤细胞行原代培养 ,以检测荧光基因在体内的保存情况。结果 阳性转染的C6瘤细胞的EGFP在大鼠脑内获得稳定表达 ,在荧光显微镜下较易于区分肿瘤与非肿瘤区 ,并能发现侵袭至远处的单个瘤细胞 ,其敏感性及特异性明显优于HE染色或免疫组化方法。结论 GFP基因体外转染C6胶质瘤细胞并行大鼠脑内移植 ,是一种较好的研究脑胶质瘤侵袭性的体内实验模型。
- 章翔李侠吴景文高大宽梁景文刘先珍王煊
- 关键词：脑肿瘤神经胶质瘤肿瘤侵润
- 神经导航在脑肿瘤手术中的应用被引量：21
- 2001年
- 目的 探讨在神经导航指导下 ,脑肿瘤及周围结构的定位和外科手术治疗效果 .方法 应用 Stealth Station和Vector Vision神经导航系统 ,手术切除 36例脑肿瘤 ,总结治疗效果 ,分析定位准确性与疗效的关系 .结果 36例脑肿瘤共 36个 ,全切除 35个 (97% )、次全切除 1个 (3% ) .出院时患者症状明显改善 2 9例 (81% )、无明显变化 7例 (19% )、本组无症状恶化及死亡 .平均注册误差和 10 cm预期准确性分别为 (2 .0 9± 0 .6 7) mm和 (1.95± 0 .37) mm.术中持续准确性SA1,SA2和 SA3分别为 (2 .0 2± 0 .95 ) ,(1.0 3± 0 .48)和 (1.15± 0 .98) mm.结论 使用 Stealth Station和 Vector Vision神经导航系统 ,在术前可制定脑肿瘤手术计划 ,术中提供瘤体的动态跟踪和实时导航 ,手术定位准确、可靠 ,有助于肿瘤全切除及降低手术并发症 。
- 章翔张剑宁费舟付洛安刘卫平吴景文
- 关键词：神经导航外科手术脑肿瘤
- 绿色荧光蛋白转染胶质瘤细胞的体内实验研究
- 2001年
- 目的 利用体外转染绿色荧光蛋白 (Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因的胶质瘤细胞建立大鼠移植模型 ,并探索利用该模型研究肿瘤体内侵袭的可行性。方法 携有EGFP基因的 p EGFP- N3质粒体外转染 C6胶质瘤细胞 ,筛选稳定表达 GFP的细胞克隆并以立体定向法植入 SD大鼠脑实质内建立肿瘤移植模型。 4周后处死大鼠并制作连续石蜡切片 ,相邻切片分别作 HE、免疫组化染色和荧光显微镜检测。结果 GFP于体内稳定表达 ,在荧光显微镜下可较容易区分肿瘤细胞和非肿瘤细胞 ,并能检测到侵袭至远端的单个肿瘤细胞 ,其检测效率明显高于HE和免疫组化染色。结论 EGFP基因体外转染 C6胶质瘤细胞并建立大鼠脑内肿瘤移植模型 ,是研究胶质瘤体内侵袭的有效模型和方法。
- 李侠章翔吴景文高大宽刘先珍梁景文王煊
- 关键词：胶质细胞瘤绿色荧光蛋白
- 第四脑室血肿铸型的立体定向治疗
- 2001年
- 崔志强章翔修波吴景文孟庆芬
- 关键词：置管引流
- 急性颅脑损伤时的水与电解质问题被引量：18
- 2001年
- 在急性颅脑损伤及其处理过程中，由于原发性脑损伤和继发性病理改变的影响，可造成机体的水分供给、排泄和电解质在血管内外、细胞内外的分布紊乱，发生一系列病理、生理改变，并出现相应的临床症状。
- 章翔吴景文
- 关键词：急性颅脑损伤电解质
- rhBMP-2抑制胶质瘤细胞方式的初步探讨
- 2002年
- 目的 初步探讨BMP 2抑制胶质瘤细胞的作用方式。方法 在培养的人脑胶质瘤细胞系SHG 4 4中加入rhBMP 2 ,测定生长曲线 ,应用流式细胞仪法分析细胞周期 ,用FITC标记的AnnexinV染色法分析凋亡和坏死的比例。结果 经rhBMP 2作用的SHG 4 4细胞G1期所占比例明显升高 (P <0 .0 1) ;10 μg/ml组中 ,完整细胞 (PI /FITC )比例 (35 .6 % )明显低于 5 μg/ml组 (94 .3% )和对照组 (96 .9% ) (P <0 .0 1) ,坏死细胞(PI+ /FITC + )比例 (5 8.0 % )明显高于 5 μg/ml组 (3.1% )和对照组 (0 .5 % ) (P <0 .0 1)。 结论 在rhBMP \| 2抑制胶质瘤细胞SHG 4 4增殖中 ,诱导其坏死是主要作用 ,其中也有凋亡作用的参与 ;AnnexinV染色法较流式细胞仪法可更加准确的区分正常细胞 ,早、晚期凋亡细胞和坏死细胞。
- 荆俊杰章翔吴景文王守森高大宽王如密
- 关键词：RHBMP-2抑制胶质瘤人骨形成蛋白细胞凋亡
- 颅内病变的定位技术被引量：1
- 2004年
- 王旭吴景文刘恩重章翔
- 关键词：颅内病变定位技术立体定向仪手术治疗
