唐广立
- 作品数:3 被引量:17H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 农杆菌侵染小麦的优化方案被引量:4
- 2007年
- 本实验选用优质高产小麦品种洛阳8716和绵阳19幼胚愈伤作为受体材料,以pCAMBIA3301为载体,GV3101,EHA105,LBA4404农杆菌为供体材料进行侵染过程的优化研究。采用3种菌株,4个浓度梯度:OD600=0.2,0.5,0.7,1.0;3个时间参数:10min,30min,60min;一共36个处理,每个处理4个重复。结果显示,农杆菌GV3101和EHA105,OD6001.0×10min和OD6000.5×30min两个侵染处理结果比较好,瞬时表达率达到50%~70%。以小麦幼胚愈伤组织为受体,预培养3~5d,在24±1℃下,共培养3 ̄4d和350mg/L羧苄青霉素除菌及5mg/LPPT筛选处理后,转化效果较好,平均转化率为0.45%。
- 陈明利刘香利唐广立徐波李彦杰郭蔼光
- 关键词:小麦幼胚农杆菌侵染
- 百脉根高频再生体系的建立及兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因的转化被引量:11
- 2007年
- 以MS为基本培养基,通过调整激素种类与浓度等培养条件,按正交试验设计的原则,建立了百脉根高频再生体系。结果表明MS+2,4-D2.0mg/L+KT2.0mg/L培养基可高效诱导愈伤组织的形成,MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基可高效诱导芽的分化,MS+NAA0.1mg/L培养基可快速诱导根的生成,形成再生植株。通过构建植物表达载体VP60-pBI121,研究了根癌农杆菌介导的兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60基因对百脉根遗传转化的影响因素,建立了百脉根快速高效遗传转化体系,结果表明,以农杆菌LBA4404为介导菌株、以下胚轴为外植体,预培养3d,在OD600为0.6的菌夜中浸染20min,共培养3d,以及300mg/L羧苄青霉素脱菌浓度和50mg/L卡那霉素筛选浓度为最佳转化条件。为利用百脉根生产动物口服型疫苗建立了技术基础。
- 唐广立李传山陈明利张忠品郭蔼光
- 百脉根高频再生体系的建立及兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因的转化
- 百脉根/(Lotus corniculatus Linn/)又名牛角花、五叶草和鸟趾草,是豆科百脉根属多年生草本植物,原产于欧、亚温暖地带。适应性广,产量高,营养含量居豆科牧草首位,在成熟收获后,蛋白质含量仍可达17.4...
- 唐广立
- 关键词:百脉根兔出血症病毒根癌农杆菌
- 文献传递