姜长宏 作品数:20 被引量:99 H指数:6 供职机构: 南方医科大学珠江医院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 广东省科技攻关计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
侵袭性曲霉感染特异性抗体的筛选及其初步临床应用研究 被引量:3 2010年 目的 筛选出可用于侵袭性曲霉感染实验室早期诊断的特异性单克隆抗体.方法 应用单克隆抗体技术制备针对不同曲霉抗原的特异性抗曲霉单克隆抗体,根据单抗识别表位不同,初步筛选出两组灵敏度高、特异性强的单抗组合,并分别建立了双抗体夹心ELISA检测法.通过检测常见临床和环境分离曲霉株、马尔尼菲青霉及念珠菌培养液,感染动物模型标本,临床标本,初步评估检测方法的敏感性和特异性.并应用WB对抗体所识别靶标进行初步鉴定.结果 获得32株稳定分泌曲霉单抗的杂交瘤细胞株,建立了2种双抗体夹心ELISA法,第1种方法可识别环境和临床分离的19种曲霉.第2种方法仅特异性识别临床和环境分离的烟曲霉,与其他曲霉抗原无交叉.对同一种烟曲霉培养液而言,第1种方法可检测稀释度为第2种方法的10倍.WB分析显示该组单抗识别的靶标为相对分子质量在25 000~75 000之间的甘露聚糖蛋白.结论 本研究获得了可用于侵袭性曲霉感染实验室诊断的特异性单克隆抗体,单抗识别的抗原为相对分子质量在25 000~75 000之间的甘露聚糖蛋白.该抗原是侵袭性曲霉感染早期诊断的潜在标志物. 江凌晓 王艳芳 郝卫 丘立文 蔡建飘 潘玉先 陈文霞 姜长宏 林丽娟 车小燕关键词:曲霉 标志物 泌尿系统感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌同源性分析 被引量:2 2013年 目的:对泌尿系统感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的同源性进行分析,为临床合理治疗产ESBLs大肠埃希菌引起的感染和控制院内感染提供依据。方法:对珠江医院临床分离的12株产ESBLs的大肠埃希菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析其同源性。结果:12株产ESBLs大肠埃希菌试验菌株中,经PFGE指纹图谱分析,除第9株和第11株相似系数达到82.7%,其余菌株相似系数均低于70%;所有菌株之间不同的条带超过7条以上,12株菌株被证明不存在亲缘关系。结论:该研究尚不能证明存在产ESBLs大肠埃希菌暴发流行性感染,提示可能存在院内感染产ESBLs大肠埃希菌的优势克隆。PFGE是研究临床菌株流行情况、菌株间分子分型的有效手段。 龙军 刘锋 江凌晓 方艳平 姜长宏 林丽娟关键词:Β内酰胺酶类 产超广谱Β-内酰胺酶 大肠埃希菌 脉冲场凝胶电泳 B群链球菌CAMP阴性株的表型及分子特征初步分析 被引量:2 2019年 目的初步分析B群链球菌(GBS)CAMP因子缺失株的生物学特征以及基因组序列特征。方法首先通过CAMP实验筛选CAMP实验阴性的GBS临床分离株,然后测定并绘制CAMP实验阴性株和阳性株在不同温度、不同pH环境下的生长曲线,再通过与Hep.2、RAW264.7共培养及流式细胞术,比较分析上述菌株在黏附、抗吞噬及吞噬细胞内存活能力、与人白细胞相互作用的差异,同时应用下一代测序技术检测CAMP实验阴性株和阳性株基因组序列,对15个已知的毒力相关基因进行初步比较分析。结果从407株GBS中分离出1株CAMP阴性株,与4株CAMP阳性菌相比,5株菌在不同温度及不同PH环境中的生长无显著差异,CAMP阴性菌对Hep-2的黏附力最强,与RAW264.7作用后吞噬率最高且吞噬细胞内存活能力差。流式细胞分析显示,新鲜人全血中性粒细胞、单核细胞对CAMP阴性株的吞噬率均高于其他4株CAMP阳性菌株。下一代测序技术分析表明CAMP阴性株cfb基因缺失,其他已知毒力相关基因(fbsA、fbsB、scpB、lmb、bca、hylB、cyl、gbcA、neuA、neuB、neuC、neuD、rib、sip)在5株菌中均有检出。结论CAMP因子在GBS的黏附、抗吞噬细胞吞噬及吞噬细胞内存活过程中起作用。 邓颖颖 孔银波 姜长宏 邓间开 江凌晓关键词:GBS 毒力基因 艰难梭菌在腹泻患者中感染情况的调查 被引量:7 2015年 目的:通过检测腹泻患者粪便中的艰难梭菌A&B毒素(CDAB),了解某院腹泻患者艰难梭菌的感染情况。方法:收集该院2013年7-12月腹泻患者粪便标本137份。首先筛查最常见的腹泻病原菌——沙门菌,再检测CDAB,然后再对CDAB阳性患者的流行病学信息进行分析,同时利用改良的方法进行厌氧培养。结果:排除7例检出沙门菌的标本,对剩余的130例粪便标本利用酶联荧光免疫分析技术检测CDAB,共检出8例阳性,阳性率为6.15%。按科室分布分析,2例来自消化科,2例血液科,2例来自儿科门诊,1例来自肾内科,1例来自器官移植科。按年龄段分布分析,3例来自儿童,3例中青年,2例老年人。厌氧培养结果显示8例毒素阳性的标本中有6例培养出艰难梭菌,2例未检测到艰难梭菌。结论 :艰难梭菌感染易感人群正在发生变化,酶联免疫荧光技术检测CDAB素简单、快速,适合对腹泻患者进行艰难梭菌感染的筛查。 王瑞莲 林丽娟 付亮 方艳平 姜长宏 江凌晓关键词:腹泻 污蝇解壳杆菌相关的伤口感染1例 2023年 患者中年男性,因“左足踇趾磨损破溃10余天,逐渐出现左足肿胀、发黑,伴嗜睡1 d”于2020年9月5日入住南方医科大学珠江医院。伤口分泌物病原学检查提示为污蝇解壳杆菌、粪肠球菌混合感染。病情发展迅速,经抗感染治疗后患者仍死于感染性休克。污蝇解壳杆菌感染少见,与卫生条件差、慢性开放性伤口相关,需使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱或16S核糖体RNA基因测序进行菌种鉴定。建议选用头孢菌素类或碳青霉烯类抗生素作为一线用药,血流感染预后不佳。 欧阳津 李紫岩 包秉弘 傅俊方 姜长宏 丁新 龙军关键词:伤口感染 致病力 耐药性 肺炎支原体抗体检测与培养法、PCR法在诊断肺炎支原体感染的比较 目的:比较实验室常用的检测肺炎支原体感染的三种方法的性能及结果一致性:肺炎支原体培养、荧光定量PCR和肺炎支原体抗体检测;描述肺炎支原体抗体产生的动力学。方法:收集珠江医院2015年4月至2015年10月疑似肺炎支原体感... 姜长宏 沈永棋 赵崇泉 林丽娟 余楠关键词:肺炎支原体 培养法 抗体检测 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱快速鉴定沙门菌临床分离株 被引量:16 2016年 目的评估基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在沙门菌鉴定中的临床应用,并研究其影响因素。方法用传统血清学方法鉴定沙门菌的血清型,用MALDI-TOF MS对哥伦比亚血平板、HE平板、SS平板和麦康凯平板分别培养24h、72h、120h和168h的179株沙门菌进行鉴定。结果 179株沙门菌可分为38种血清型,肠炎沙门菌(21.2%)、斯坦利沙门菌(17.3%)和Ⅰ4,5,12:i:-沙门菌(16.2%)居前3位。所有菌株在血平板、HE平板、SS平板和麦康凯平板分别培养24h和72h均能被MALDI-TOF MS准确鉴定为沙门菌。MALDI-TOF MS的耗材成本约为微生物自动生化鉴定系统(Vitek 2)的1/3,检测时间约为Vitek 2的1/7。结论在血平板、HE平板、SS平板和麦康凯平板培养3d以内的沙门菌,MALDI-TOF MS均可以准确鉴定。与Vitek 2相比,MALDI-TOF MS检测的速度更快,消耗的成本更低,并且可以直接鉴定生长在选择性培养基的沙门菌。 梁达炜 梁权辉 方艳平 姜长宏 龙军 曾念宜 林丽娟 江凌晓关键词:沙门菌 肺炎支原体抗体检测与培养法、PCR法在诊断肺炎支原体感染的比较 被引量:6 2017年 目的比较实验室常用的检测肺炎支原体感染的三种方法的性能及结果一致性:肺炎支原体培养、荧光定量PCR和肺炎支原体抗体检测;描述肺炎支原体抗体产生的动力学。方法收集珠江医院2015年4月至2015年10月疑似肺炎支原体感染者痰标本及对应系列血清。培养法和PCR荧光探针法检测痰标本,被动凝集法检测血清肺炎支原体抗体。描述肺炎支原体感染者血清抗体随发病天数变化情况。结果 qPCR法、培养法和被动凝集法的检测灵敏度分别:21.43%(95%CI:10.30~36.81)、100.00%(95%CI:91.59~100.00)、83.33%(95%CI:68.64~93.03),特异性分别为:95.83%(95%CI:85.75~99.49)、37.50%(95%CI:23.95~52.65)、81.25%(95%CI:67.37~91.05)。qPCR法特异性最高,培养法灵敏度最高,抗体法灵敏度和特异性居中,差异有统计学意义(P<0.05)。结论三种方法间一致性差,需研究改进。 姜长宏 沈永棋 赵崇泉 林丽娟 余楠关键词:肺炎支原体 培养法 抗体检测 多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染同源性分析 被引量:6 2013年 目的:对多重耐药鲍曼不动杆菌(multiple drug resistance acinetobacter baumannii,MDR-Ab)同源性进行分析,为临床合理治疗MDR-Ab引起的感染和控制院内感染提供依据。方法:对某医院脑外科重症病房分离的12株MDR-Ab,进行脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)分析其同源性。结果:12株MDR-Ab试验菌株中,经PFGE指纹图谱分析,可分为A、B、C、D、E、F 6个基因型,其中A型和B型是主要流行基因型。结论:该研究证明该院脑外科患者感染的鲍曼不动杆菌呈多克隆系并存,但尚不能证明存在鲍曼不动杆菌医院感染爆发流行,PFGE是研究临床菌株流行,菌株分型的有效手段。 方艳平 张耀康 江凌晓 姜长宏 林丽娟 付亮 龙军关键词:多重耐药 鲍曼不动杆菌 脉冲场凝胶电泳 2015年广州珠江医院细菌耐药性监测 被引量:2 2017年 目的了解南方医科大学珠江医院2015年临床分离菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法进行细菌药物敏感性试验。结果收集2015年1-12月临床分离菌共4 229株,革兰阳性菌1 541株(36.4%),革兰阴性菌2 688株(63.6%)。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株检出率分别为47.2%和76.4%。甲氧西林耐药株(MRSA和MRCNS)对β内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率均显著高于甲氧西林敏感株(MSSA和MSCNS)。94.0%MRSA菌株对甲氧苄啶-磺胺甲唑敏感;83.1%MRCNS菌株对利福平敏感。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。肠球菌属中粪肠球菌对多数抗菌药物的耐药率显著低于屎肠球菌,未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的菌株。大肠埃希菌和克雷伯菌属中产超广谱β内酰胺酶(ESBL)株分别为52.6%和39.7%,产ESBL株对测试药物的耐药率均比非产ESBL株高。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,绝大多数菌株耐药率低于4.0%。不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为69.2%和71.2%。结论该医院细菌耐药性仍呈增长趋势,多重耐药和广泛耐药菌株检出率的增加对临床抗感染治疗构成严重威胁,需及时采取有效的感控措施。 付亮 江凌晓 龙军 姜长宏 林丽娟 方艳平 曾念宜 余楠关键词:细菌耐药性监测 药物敏感性试验 多重耐药菌 耐甲氧西林葡萄球菌 碳青霉烯酶