孙丽亚
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株转移相关microRNAs的筛选研究被引量：2
- 2011年
- 背景与目的微小RNA(microRNAs,miRNAs)参与调节肿瘤发生发展的多个过程,包括细胞的分裂增殖、细胞周期、凋亡、血管形成、侵袭和转移等。本研究应用miRNA芯片检测具有高低不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株L9981和NL9980的miRNA表达谱,从中筛选出与大细胞肺癌转移相关的miRNAs。方法收集L9981和NL9980细胞,抽提总RNA进行CY3标记,将标记RNA在miRNA芯片上进行杂交反应。通过数据统计分析,筛选出表达明显差异的miRNAs。应用Real-timePCR验证芯片结果,并应用生物信息学方法预测靶基因。结果在不同转移潜能人大细胞肺癌L9981和NL9980细胞株中共筛选到22个表达明显差异的miRNAs。与NL9980相比,在L9981中有13个miRNAs表达上调,9个表达下调。Real-timePCR验证miR-125a-3p在细胞中的表达水平与芯片结果趋势一致,预测其靶基因可能为胰岛素样生长因子2。结论筛选得到与大细胞肺癌转移相关的miRNA表达谱。
- 鲁为山李书军刘彬李洋罗猛孙丽亚尤嘉琮周清华
- 关键词：肺肿瘤细胞系微小RNA
- 不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株转移相关基因的筛选和鉴定
- 与目的:肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,肺癌的总治愈率仅有13％～15％,肺癌的远处转移是病人治疗失败的最主要原因.肿瘤的转移是一个多步骤、多阶段发生、多因素参与调控的极其复杂的过程.细...
- 郭善娴吴志浩陈军万海粟孙丽亚刘红雨徐克梁永刚周清华
- 关键词：大细胞肺癌
- NM23-H1基因调控肺癌侵袭转移相关基因的研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究与NM23-H1基因有关的肺癌侵袭转移相关基因。方法在抑制消减cDNA文库的基础上制备基因表达谱芯片。经芯片杂交、克隆测序及同源性分析得到人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1各差异表达基因的信息,再以实时荧光定量PCR技术对筛选出的差异基因作进一步的验证。结果成功制备了人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1差异表达基因的基因表达谱芯片。经测序及同源性分析发现19个差异表达基因。经荧光定量PCR验证发现转染NM23-H1后,L9981细胞中PSMA7、SBDS、ODC1、YARS、CSDA、PTP4A1、SHPRH和TOMM7 8个基因的mRNA表达上调,PKM2和GMNN基因的mRNA表达下调。结论 NM23-H1基因可能为转移相关的上游调节基因,它可通过对下游一系列基因进行调节而实现对肺癌转移潜能的抑制作用。
- 蔡春季叶苏娟朱文孙丽亚万海粟冯志华马力李璐
- 关键词：肺癌NM23-H1基因差异表达基因
- Plumbagin抑制IL-6/STAT3信号通路抗大细胞肺癌的作用研究
- 背景与目的:为研究Plumbagin在大细胞肺癌中的抗肿瘤作用及机制,探索其作为抗肺癌药物的前景和可行性,本课题第一部分应用不同浓度的Plumbagin对人大细胞肺癌NL9980和L9981细胞系进行干预,检测其抑制肿瘤...
- 于涛李永文Allen C.Goa周清华孙丽亚万海粟吴志浩闫惠琴吴蘅王竟王伟强朱彧
- 吉非替尼对肺腺癌获得性耐药机制的研究
- 研究背景与目的:分析吉非替尼敏感人肺癌细胞株和获得性耐药人肺癌细胞株的差异表达基因,筛选吉非替尼获得性耐药相关基因,验证基因芯片结果,分析相关基因mRNA差异表达与耐药性之间的联系,分析不同细胞株EGFR基因序列及其下游...
- 董明吴志浩万海粟刘红雨吴蘅孙丽亚陈军朱大兴周清华
- Raf全长及氨基端、羧基端真核表达载体的构建和表达
- 2008年
- 背景与目的Raf是Ras-Raf-MEK-ERK信号转导通路中的关键分子,在多种人类肿瘤中存在高度活化,然而其生物学功能和详细调节机理目前尚未完全明了。本研究旨在构建人Raf基因全长(Raf-1),氨基端(N-Raf)及羧基端(C-Raf)真核表达载体,并观察其在293T细胞中的表达情况。方法通过PCR方法扩增Raf-1,N-Raf和C-Raf目的片段,利用基因重组技术构建pCMV-Tag2b-Raf-1,pCMV-Tag2b-N-Raf和pCMV-Tag2b-C-Raf真核表达载体,并进行酶切和测序鉴定。鉴定正确的克隆瞬时转染293T细胞,Western blot检测目的蛋白的表达。结果酶切和测序结果均证实pCMV-Tag2b-Raf-1,pCMV-Tag2b-N-Raf和pCMV-Tag2b-C-Raf真核表达载体的序列和编码框均正确无误,转染后的293T细胞经Western Blot检测可正确表达目的蛋白。结论本研究成功构建了pCMV-Tag2b-Raf-1,pCMV-Tag2b-N-Raf和pCMV-Tag2b-C-Raf真核表达载体并可在293T细胞中表达,为今后进一步研究Raf基因的生物学机理奠定了基础。
- 王卓敏陈军万海粟刘红雨朱文肖文范羽李永文孙丽亚周清华
- 关键词：RAF基因重组真核表达
- nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株抑制消减cDNA文库的构建被引量：2
- 2008年
- 背景与目的已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因,本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆与nm23-H1转移相关的基因奠定基础。方法利用抑制消减杂交(suppressive subtractive hybridization,SSH)技术构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)间差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库,经蓝白菌落筛选克隆,并PCR反应鉴定。结果成功构建了该两株细胞株差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库。经蓝白菌落筛选,正向消减文库总共获得约300个白斑克隆,反向消减文库总共获得约400个白斑克隆,从正反向消减文库中各挑选96个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段,结果显示在挑选的正向文库中有84个克隆有插入片段,反向文库中有83个克隆有插入片段,其片段大小范围为(300-750)bp。结论抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,我们应用SSH法和T/A克隆技术成功建立了nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库。nm23-H1基因在肺癌细胞中的表达可能影响某些转移相关基因的差异表达。
- 叶苏娟冯志华朱文蔡春季李潞孙丽亚万海粟马力周清华
- 关键词：肺肿瘤NM23-H1基因抑制消减杂交CDNA文库转移相关基因
- 人肺癌细胞中BAG-1基因的功能及相关信号通路的研究
- 与目的:细胞凋亡是细胞在细胞外或细胞内信号诱导下发生的主动自杀死亡过程.目前认为,肿瘤的发生发展不仅是细胞增殖失控、分化异常的结果,而且与细胞凋亡失衡有关.因此,研究肿瘤中与凋亡相关基因的功能及机制,具有十分重要的意义....
- 梁永刚陈军刘红雨万海粟吴志浩孙丽亚郭善娴周清华
- 关键词：肺癌细胞抗凋亡蛋白信号通路功能分析
- 慢病毒介导的稳定沉默nm23-H1基因的肺癌细胞株的建立及生物学行为改变被引量：6
- 2012年
- 背景与目的 nm23-H1基因是重要的肿瘤转移抑制基因。前期研究发现利用化学合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制nm23-H1基因的表达可明显增强肺癌细胞的侵袭力。为了进一步研究nm23-H1基因沉默后的分子生物学机制,本研究利用慢病毒介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)建立nm23-H1基因稳定沉默的肺癌细胞株。方法将表达特异性抑制nm23-H1基因shRNA的慢病毒转染人大细胞肺癌细胞株NL9980和肺腺癌细胞株A549,通过嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。逆转录PCR、定量PCR及Western blot法检测nm23-H1基因表达,并通过shRNA抵抗的nm23-H1基因重组质粒转染拯救实验验证,侵袭小室实验检测侵袭力改变。结果逆转录PCR、定量PCR和Western blot法检测稳定转染细胞株NL9980-99和A549-99中nm23-H1基因在mRNA和蛋白水平表达均明显降低;shRNA抵抗的nm23-H1基因重组质粒转染拯救实验重现nm23-H1的正常表达;侵袭小室实验显示NL9980-99和A549-99细胞侵袭力明显增强。结论成功建立nm23-H1基因稳定沉默的人大细胞肺癌细胞株NL9980-99和人肺腺癌细胞株A549-99,nm23-H1基因沉默后使NL9980-99和A549-99细胞的侵袭力明显增强。
- 罗猛朱大兴弓磊邱小明祖玲玲孙丽亚吴志浩周清华
- 关键词：肺肿瘤慢病毒RNA基因
