孟丽平
- 作品数：14 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国农业大学动物医学院国家动物海绵状脑病检测实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金北京市科委项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪内源性反转录病毒囊膜糖蛋白基因在大肠杆菌中的表达及初步分析
- 根据国内外已发表的PERV囊膜基因的核苷酸序列,设计并合成了扩增PERV-env全基因及其编码穿膜蛋白PERV-TM(gp15)和外膜蛋白PERV-SU(gp70)基因的引物.应用PCR的方法从已建立的含有PERV-en...
- 孟丽平
- 关键词：猪内源性反转录病毒囊膜基因克隆多克隆抗体
- 文献传递
- 慢性消耗性疾病进展
- 2005年
- 孟丽平赵德明
- 关键词：慢性消耗性疾病传染性海绵状脑病朊病毒病食欲发病
- 梅花鹿朊蛋白基因(PRNP)的克隆及序列分析被引量：3
- 2006年
- 根据GenBank中鹿朊蛋白基因序列设计特异性扩增引物,采用PCR方法从中国梅花鹿基因组中扩增得到梅花鹿的朊蛋白基因,采用PCR产物直接测序,并将其克隆到pGEM-TEasy载体中测序进行进一步确认,通过分析表明所克隆的梅花鹿朊蛋白基因的ORF基因片段包含771bp,编码256个氨基酸的前体蛋白,相对分子质量约为28200。与已报道的其他品种鹿朊蛋白基因序列进行对比分析,核苷酸及氨基酸序列的同源性均在98%以上。本试验为进一步研究中国梅花鹿朊蛋白的多态性提供了数据。
- 孟丽平赵德明杨建民徐广贤马李颖
- 关键词：梅花鹿朊蛋白朊蛋白基因
- 实时荧光定量PCR检测PrP基因表达标准品质粒和标准曲线的构建被引量：14
- 2005年
- 对金黄地鼠PrP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RTPCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,表明PrP基因保守区段已经成功克隆.将107～102拷贝/反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,10次重复Ct值平均分别为17.50±0.5、21.38±0.2、25.29±0.7、29.12±0.7、31.34±0.4、33.89±0.1,系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系,回归系数为0.998.对动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,该标准曲线的灵敏度为102拷贝/反应.荧光PCR PrP基因表达检测标准品质粒和标准曲线的建立,为检测PrP基因的组织特异性表达和动物传染性海绵状脑病发生的分子机理奠定了基础.
- 宁章勇赵德明杨建民崔亚利孟丽平吴长德秦秀慧马李颖
- 关键词：实时荧光定量PCR重组质粒
- RNA干扰和病毒基因沉默
- 2003年
- RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是正常动植物体内的一种通过双链RNA来沉默基因的自然现象。细胞内存在的双链RNA(dsRNA)被特异性的内切酶切割成为一种由长约21nt～23nt的小分子干扰RNA(siRNAs),有时它在正常的细胞中就存在,这种小分子干扰RNA和一些相关蛋白质组成RNA诱导沉默复合体我们称为来发挥作用。主要通过与特定基因编码的信使RNA(mRNA)作用来高效特异地阻断特定基因的表达。RNAi具有高效性和高度特异性,可能成为阻断病毒入侵和关闭基因的新技术,在基因功能研究和疾病基因治疗中发挥重要作用。
- 孟丽平赵玉军
- 关键词：动物RNA干扰基因表达病毒入侵接种疫苗药物治疗
- 海豚Prion基因的克隆与序列分析
- 2007年
- 孙艳明赵德明孟丽平崔亚利吴长德杨建民周向梅
- 关键词：慢性消耗性疾病牛海绵状脑病N基因致病因子
- 疯牛病和羊痒病Western blotting检测方法的建立被引量：4
- 2007年
- 以朊蛋白单抗AH6和碱性磷酸酶标记的马抗鼠酶标二抗建立了疯牛病和羊痒病的Western blotting检测方法。对Western blotting各种反应条件进行摸索,并确定了最佳工作条件,结果表明:匀浆缓冲液为RIPA时的最佳反应条件包括浓缩胶电泳电压为恒压90V,分离胶电泳电压为恒压160V,转印的最佳电压和时间为恒压100V1.5h;封闭液为3%BSA时,封闭15min,封闭效果最好;AH6的最佳稀释度为1∶4000,4℃下孵育过夜,马抗鼠二抗的最佳稀释度1∶1000,室温下孵育30min。采用已确立的反应条件对样品进行检测并与Prionics-Check WEST-ERN进口试剂盒的检测结果比较,发现其敏感性为100%,特异性为99.4%,与进口试剂盒(100%,100%)无显著差异,这为国产试剂盒研制提供了条件。
- 王辉暖赵德明宁章勇杨建民吴常德郝俊峰白玉王传武孟丽平
- 关键词：疯牛病羊痒病WESTERNBLOTTING
- 金黄地鼠PrP基因组织特异性表达的研究被引量：5
- 2005年
- 金黄地鼠是研究动物传染性海绵状脑病的理想模型动物之一,我们利用实时荧光定量RT PCR技术,构建标准重组质粒制备标准曲线,对中枢神经系统的4个不同部位及外周6个组织提取总RNA,反转录后进行PrP基因表达的定量。结果发现,脑的四个检测部位都呈现高的表达量;在外周器官中,淋巴结的表达量和全脑相当,脾脏、心脏、肝脏和肺脏呈现中等程度的表达,肾脏的表达量最低。本研究的结果对于探讨朊蛋白的基本功能和不同组织在传染性海绵状病理发生中的作用,提供了基础数据。
- 宁章勇赵德明杨建民崔亚利孟丽平吴长德秦秀慧马李颖
- 关键词：金黄地鼠朊蛋白基因表达
- 中国梅花鹿和猪朊蛋白基因序列分析及其在猪体内的定量表达研究
- 朊病毒病(PrionDiseases)或称传染性海绵状脑病(Transmissiblespongiformencephalopathies，TSEs)是一类传染性、致死性的神经退行性疾病，该病能够感染人和多种哺乳动物，主...
- 孟丽平
- 关键词：朊蛋白基因传染性海绵状脑病序列多态性荧光定量PCR朊病毒病
- 文献传递
- 意大利兽医行业性质和特性分析
- 2005年
- ANMVI是意大利的国家兽医机构，它成立于四年前，是一个专业的兽医机构，包含15个意大利培养和科研分支机构，隶属于UEPV(欧盟兽医总局)，代表总数超过一万个意大利兽医从业者。
- P．Bossi孟丽平
- 关键词：兽医行业职业教育
