岳丰雄
- 作品数:10 被引量:79H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家科技部农业科技成果转化资金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 检测PCV2、PPV、PRV、PRRSV的多重PCR诊断方法的建立及初步应用
- 本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖呼吸道综合征病毒(PRRSV)的多重PCR诊断方法(mPCR)。设计了4对引物分别用于扩增PCV2 ORF2 35...
- 岳丰雄崔尚金戚亭周盛华冉多良张超范
- 关键词:免疫学检验多重PCR诊断方法
- 文献传递
- PCV2 PPV PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用被引量:32
- 2008年
- 参照GenBank中的猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因序列,设计了4对引物分别用于扩增PCV2 ORF2、PPV NS1、PRV gB、PRRSV N基因的目的片段。通过对反应因素进行优化,建立了检测PCV2、PPV、PRV、PRRSV的多重PCR(mPCR)诊断方法。敏感性和特异性结果显示,该mPCR对4种病毒的最低核酸检测量分别为29.0 pg(PCV2)、17.3 pg(PPV)、36.8 pg(PRRSV)、38.4 pg(PRV),而对猪瘟病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒1型、牛病毒性腹泻黏膜病病毒、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。119份临床样品的多重PCR检测结果显示,有3份样品同时感染PPV和PCV2,68份样品同时感染PRRSV和PCV2,其余样品均为PCV2阳性。表明,建立的多重PCR方法能够对PCV2、PPV、PRV、PRRSV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。
- 岳丰雄崔尚金冉多良张超范
- 关键词:猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪生殖与呼吸综合征病毒
- 胶体金免疫层析技术及其在猪病诊断上的应用被引量:3
- 2010年
- 胶体金免疫层析技术是一种新的免疫检测技术,因其快速简便最近几年在猪病诊断方面得到广泛应用。《胶体金免疫层析技术及其在猪病诊断上的应用》一文详细介绍了胶体金免疫层析技术的基本原理、胶体金及胶体金免疫层析快速诊断试纸条的制备方法,并以猪繁殖与呼吸综合征为例说明胶体金免疫层析快速诊断试纸条在猪病诊断上的应用,可操作性强,值得认真研读。
- 周盛华崔尚金戚亭岳丰雄
- 关键词:免疫胶体金技术葡萄球菌A蛋白猪病免疫球蛋白
- 免疫层析快速诊断试纸条的制备及在养猪业上的应用被引量:1
- 2008年
- 胶体金免疫层析技术是一种微量、特异、简便和结果容易判定的新的检测方法,非常适用于基层兽医和猪场。本文综述了免疫层析快速诊断试纸条的基本原理、制备方法、标记技术以及目前在养猪业上的应用情况。
- 周盛华崔尚金戚亭岳丰雄张超范
- 关键词:胶体金试纸条猪病
- 多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立被引量:9
- 2010年
- 本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。
- 岳丰雄崔尚金冉多良戚亭周盛华
- 关键词:多重PCR方法猪圆环病毒2型猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 猪细小病毒的分子特征、流行现状、诊断与疫苗被引量:2
- 2007年
- 猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)属于细小病毒科细小病毒属,除了引起母猪的繁殖障碍性疾病外,PPV也与猪渗出性皮炎和断奶仔猪多系统衰弱综合征(Post—weaning multistemic wasting syndrome。PMWS)有关。该病毒最早由Mary和Mahncl于1966年发现,接着Cartwright等在1967年对猪的不孕、流产、死产等进行病原学研究时,从病料中分离出了猪细小病毒。
- 谢红玲岳丰雄崔玉东冉多良崔尚金
- 关键词:猪细小病毒分子特征多系统衰弱综合征繁殖障碍性疾病疫苗
- 猪细小病毒细胞适应株的培育及鉴定
- 从临床表现为皮炎消瘦症状的仔猪肝脏中分离到一株病毒,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪细小病毒(PPV),采用仔猪原代肾细胞和传代ST细胞分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育一株ST传代细胞培养适应毒株,命名为PPV-B020...
- 张超范崔尚金戚亭陈长木苗岚飞谢红玲周盛华岳丰雄刘长明刘霓虹
- 关键词:猪细小病毒
- 文献传递
- 猪细小病毒细胞适应株的培育及鉴定被引量:23
- 2008年
- 从临床表现为皮炎消瘦症状的仔猪肝脏中分离到1株病毒,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪细小病毒(PPV),采用仔猪原代肾细胞和传代ST细胞分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育1株ST传代细胞培养适应毒株,命名为PPV-BQ2007株。免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质内。病毒感染细胞可被已知PPV阳性血清中和。免疫电镜可清晰见到聚集成团的大小不一的病毒粒子,近似圆形,无囊膜,直径大小约20nm~22nm。该分离株经ST细胞培养传代,能够产生典型的细胞病变,病毒滴度随代次显著增加,第30代后毒价达107TCID50/mL以上,且毒价和血凝价稳定。测序结果表明PPV-BQ2007株VP2基因与NCBI公布的皮炎型毒株Kresse株的同源性最高,达99.8%,在系统进化分支上处于同一个分支。PPV-BQ2007株传代细胞培养适应株的成功培育和鉴定,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫与诊断研究等奠定了良好基础。
- 张超范崔尚金戚亭陈长木苗岚飞谢红玲周盛华岳丰雄刘长明刘霓虹
- 关键词:猪细小病毒
- 同时检测CSFV、PRRSV的二重RT-PCR方法的建立及其在临床样品检测中的初步应用被引量:2
- 2008年
- 建立了1种一步法RT-PCR用于同时检测典型猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖呼吸道综合征病毒(PRRSV)的多重PCR诊断方法(Multiplex PCR,mPCR)。根据Genbank上公布的CSFV、PRRSV基因组全序列及部分序列,借助DNAStar和Oligo6.0基因序列和引物设计软件,设计2对特异性引物分别用于扩增CFSV、PRRSV病毒777bp和434bp的目的片断。该mPCR由RT反应和PCR反应构成。将病毒核酸连接到PMD18-T载体,提取质粒后,以10倍进行倍比稀释,取每个稀释度的病毒核酸进行mPCR反应,对CSFV、PRRSV的最低检测量分别为8.5pg、8.3×10-2pg。以PCV2、PCV1、PPV、PRV、SIV、E.coil和双蒸水为模板进行mPCR反应,扩增结果均为阴性,表明该mPCR具有较好的特异性。对临床样品的检测表明,本研究建立的mPCR诊断方法能够对CSFV和PRRSV进行快速的诊断,同时对CSFV、PRRSV在猪群中的流行病学调查也具有十分重要的意义。
- 岳丰雄崔尚金冉多良张超范周盛华戚亭
- 关键词:多重PCRPRRSVCSFV
- 鉴别PCV2、PPV、PRV、PRRSV、CSFV多重PCR诊断方法的建立及初步应用
- 参照GenBank中已经发表的序列,利用DNAStar软件和Oligo6.0软件,针对病毒的保守性基因序列,设计5对引物用于扩增猪圆环病毒2型/(PCV2/)、猪细小病毒/(PPV/)、猪伪狂犬病病毒/(PRV/)、猪繁...
- 岳丰雄
- 关键词:猪细小病毒猪伪狂犬病病毒
- 文献传递