崔丽华
- 作品数：9 被引量：77H指数：6
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 植物染色体微分离、微克隆及其DNA文库的构建
- 1999年
- 陈正华王兰岚胡赞民周奕华党本元崔丽华王槐
- 关键词：单染色体植物染色体微克隆微分离DNA文库扩增产物
- 王百合单条染色体和染色体片段的分离被引量：39
- 1997年
- 本研究利用显微操作器建立了简单、有效地分离王百合单条染色体和染色体片段并将其放人Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中的方法。与前人方法相比，主要改进之处在于：（１）制片简单。不需要对盖片硅化处理，压片在截片和盖片之间进行。（２）所需设备简单。不需要倒置显微嵕担恍枰胍牵⑾覆Ａд肟稍诰凭莆⒒鹕侠啤＃ǎ常┎僮骷虻ィ矢摺Ｔ诒瓯旧霞訊一滴无菌水即可将染色体挑出。在２ｈ之内。
- 胡赞民崔丽华王兰岚李良才陈正华
- 关键词：染色体
- 几种植物染色体微分离微克隆的研究及B染色体实验体系的建立
- 该研究以蚕豆(Vicia faba)为实验材料,对大M染色体进行了显微分离.用DOP-PCR(degenerate oligonucleotide-primed PCR)以及LA-PCR(linker adapt...
- 崔丽华
- 关键词：黑麦还阳参B染色体
- 王百合单染色体DNA文库的构建被引量：30
- 1998年
- 以王百合为模式植物建立了简单快速分离植物单染色体及扩增和克隆其DNA的方法 ,即显微操作分离单个染色体并放入Eppendorf管中 ,经Sau 3A酶切后在染色体DNA片段两端加上Sau 3A寡核苷酸人工接头 ,然后以寡核苷酸人工接头中的一条链为引物进行两轮PCR扩增 .PCR产物为 30 0～ 2 50 0bp ,多数为10 0 0bp左右 ,经Southern杂交证实PCR产物来自王百合基因组DNA .对单染色体第二轮PCR产物进行克隆 ,构建单染色体DNA文库 ,得到约 10 0 0 0 0个重组子 .对其中 84个重组子进行分析 ,插入片段为 30 0～180 0bp ,平均为 780bp .与以往方法相比 ,此方法避免了在纳升体积内酶解、连接等操作 ,扩增底物只需一条染色体而不是以往的几十条 ,而且克隆片段 (平均 780bp)大于以往的报道 (平均 6 50bp) .
- 党本元胡赞民周奕华崔丽华王兰岚李良材陈正华
- 关键词：单染色体DNA文库遗传育种
- 蚕豆大M染色体的显微分离与DNA文库的构建被引量：1
- 1999年
- 崔丽华胡赞民
- 关键词：蚕豆显微分离DNA文库
- 染色体微切割、微分离与微克隆技术研究进展被引量：7
- 1998年
- 本文详细介绍了染色体微切割、微分离与微克隆技术在动物、人类及植物中的创立与发展，评述了不同染色体微切割、微分离与微克隆方法的优缺点，总结了这项技术在遗传学研究中的应用，提出了利用这项技术在植物分子遗传学研究中的新方向。
- 胡赞民崔丽华陈正华
- 关键词：染色体显微切割显微分离微克隆
- 玉米单染色体的分离和体外扩增被引量：40
- 1998年
- 建立了玉米单染色体的分离及体外扩增的方法。取95％乙醇固定后经果胶酶和纤维酶酶解的根尖制备染色体标本，用自制的微细玻璃针在倒置显微镜下挑取目的染色体。染色体DNA经Sau3A酶切后与人工合成的Sau3A连接接头连接，经两次PCR扩增获得足以用于构建单染色体DNA文库的扩增产物。片段大小为0．3～5kb，多数为0．5～3．5kb．与前人研究方法相比，所需底物量少（只需1条染色体），扩增片段大，为植物中小型染色体分离、体外扩增进而进行单染色体DNA文库构建奠定了基础。
- 胡赞民党本元周奕华崔丽华王兰岚张铁汉李良材陈正华
- 关键词：玉米染色体DNA扩增
- 黑麦1R染色体的显微分离与回收被引量：10
- 1997年
- 建立了利用显微操作技术分离植物单个染色体的方法。以黑麦(Secale cereale L.)为材料,以其标准染色体组型图为依据,识别出黑麦含抗病基因的1R染色体。经显微操作,将单条1R染色体放入Ep-pendorf管中。研究表明,用α-溴奈饱和液对细胞进行预处理,可快速鉴别出黑麦1R染色体。采用去壁低渗制片技术,可明显地改善显微分离单染色体的条件。
- 崔丽华胡赞民王兰岚李良材陈正华
- 关键词：黑麦显微分离回收
- 大豆单染色体的显微分离及体外扩增被引量：28
- 1998年
- 采用玻璃针分离法，通过显微操作器成功地分离到大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘＬ．）单染色体。将分离到的两条大豆染色体分别放入两个０．５ｍＬＥｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，经Ｓａｕ３Ａ酶切，并在染色体ＤＮＡ片段两端加上Ｓａｕ３Ａ人工接头后，进行两轮ＰＣＲ扩增，得到０．３～３ｋｂ之间的ＤＮＡ片段。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明，这些大豆单染色体扩增片段与大豆基因组ＤＮＡ之间有同源性，从而证明两条单染色体ＤＮＡ确实已被成功地扩增了，同时表明两条不同的大豆单染色体扩增产物存在一定的差异。在常规的倒置显微镜下对小型染色体进行了显微分离，为小型单染色体ＤＮＡ的体外扩增及微克隆奠定了基础。
- 周奕华党本元胡赞民崔丽华李良材陈正华
- 关键词：大豆显微分离单染色体体外扩增
