张喆
- 作品数：9 被引量：28H指数：4
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技统筹创新工程计划项目陕西省重大科技创新专项计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HCV-RNA阳性236例临床与实验室特征分析被引量：6
- 2013年
- 目的:对HCV-RNA阳性患者血清中抗-HCV、ALT、AST、AFP、ALP、GGT定量指标与HCV-RNA含量进行比较分析,探讨其相关性及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR检测236例肝病患者血清标本HCV-RNA含量,生化定量指标用生化自动分析仪检测,抗-HCV定量采用时间分辨法检测,AFP采用电化学发光法检测。结果:HCV-RNA含量与抗-HCV、ALT、AST、AFP、ALP、GGT各指标的异常率呈正相关,但与各指标含量无相关性。结论:抗-HCV异常率和HCV-RNA含量呈正相关,提示在丙型肝炎的诊断和预后判断中具有重要意义,二者同时检测可以提高临床对丙型肝炎的诊断效率;将抗-HCV、HCV-RNA、ALT、AST、AFP、ALP、GGT等多项指标有机结合起来,在正确诊断和预测肝脏损伤及疗效观察中具有重要的临床意义。
- 刘昕阳李锐成代瑛张喆张惠中
- 关键词：丙型肝炎丙型肝炎抗体转氨酶类甲胎蛋白
- 不同截短型癌基因AEG-1启动子活性分析
- 2016年
- 目的:分析不同截短型癌基因AEG-1启动子活性,证实与E6/E7表达相关的转录调控因子对AEG-1启动子活性的影响。方法:以宫颈癌He La细胞基因组DNA为模版,扩增AEG-1启动子全长序列(-2710/-491),并应用本实验室改造的启动子活性研究专用绿色荧光蛋白报告载体构建p GL3-basicEGFP/AEG-1质粒,通过转染He La细胞及血管内皮细胞ECV304检测启动子活性。同时,根据AEG-1启动子序列上与E6/E7作用相关的转录调控因子结合位点位置,设计不同截短型AEG-1启动子序列引物,应用p GL3-basic-EGFP载体构建不同截短型AEG-1启动子载体,并分别转染细胞检测启动子活性。结果:AEG-1启动子全长序列p GL3-basic-EGFP/AEG-1载体转染He La细胞可见明显绿色荧光蛋白表达,而在血管内皮细胞ECV304中表达为痕量。包含不同转录调控因子C-Myc、SP1、NF-κB、E_2F结合位点的不同截短型AEG-1启动子载体在肿瘤细胞中有活性但存在差异。结论:AEG-1启动子为肿瘤特异性启动子,含有与E6/E7表达相关的转录调控因子NF-κB、E_2F结合位点的启动子序列为影响AEG-1基因启动子活性的关键区域。
- 代瑛龙敏张喆刘丽张惠中董轲
- 关键词：C-MYCSP1E2F
- siRNA沉默HepG-2细胞B7-H3对细胞行为学影响的研究被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨siRNA方法沉默HepG-2细胞中B7-H3基因表达对细胞周期、增殖及迁移能力的影响。方法:设计合成针对B7-H3基因的siRNA及无关干涉siRNA序列,并分别构建干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3及无关干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/NC;采用脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染对数生长期肝癌细胞HepG-2,经G418筛选后获得相应细胞模型;利用RT-PCR和Western blot方法分别检测空白对照组(WT)、无关干涉组(si-NC)和B7-H3干涉组(si-B7-H3)细胞中B7-H3 mRNA及蛋白表达水平;利用CCK-8细胞增殖实验及克隆形成实验评价各组细胞增殖情况;利用碘化丙锭(PI)染色流式细胞术检测各组细胞周期分布情况;利用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力。结果:成功构建了pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3干涉载体。RT-PCR及Western blot结果显示,B7-H3干涉组较空白对照组、无关干涉组mRNA及蛋白水平明显下降;CCK-8增殖、克隆形成实验、细胞划痕实验及流式结果表明B7-H3干涉组增殖受到明显抑制,克隆较小且克隆数减少,细胞周期阻滞于G_0/G_1期,细胞迁移能力受抑制。结论:利用siRNA靶向干涉B7-H3表达可抑制HepG-2细胞增殖并诱导细胞周期阻滞,降低细胞迁移能力,实验结果为开发针对B7-H3靶点的肝癌免疫治疗提供了初步实验及理论基础。
- 左佳蕙张喆龙敏郜赵伟刘冲董轲张惠中
- 关键词：肝癌B7-H3细胞周期细胞迁移
- AEG-1肺归巢域与Flagellin融合基因的杆状病毒制备及鉴定
- 2018年
- 目的通过重叠PCR方法获得AEG-1C-Flic融合基因,采用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统获得重组AEG-1C-Flic杆状病毒,为后续AEG-1C-Flic病毒样颗粒疫苗的制备奠定基础。方法从鼠伤寒沙门菌的基因组中PCR扩增细菌鞭毛蛋白Flagellin,采用重叠PCR的方法将AEG1肺归巢域段基因与Flagellin融合,并添加猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)包膜蛋白gp41信号肽与跨膜区,构建AEG-1C-Flic pFastBacTM重组表达载体,转座大肠杆菌E.coliDH10Bac感受态细胞后获得重组杆粒,重组杆粒转染昆虫细胞Tn5,获得AEG-1CFlic重组杆状病毒,并采用Western Blot方法对该病毒进行鉴定。结果构建的AEG-1C-Flic杆状病毒表达载体经双酶切及测序正确,通过转化E.coli DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid,经PCR鉴定大小正确,Western Blot结果显示Bacmid转染Tn5细胞后成功获得重组杆状病毒rBv AEG-1C-Flic。结论成功构建的AEG-1C-Flic杆状病毒可用于新型AEG1-病毒样颗粒疫苗的制备。
- 王希王琳张喆龙敏董轲张惠中
- 关键词：病毒样颗粒AEG-1FLAGELLIN
- 尿常规检测血尿1例假阴性分析被引量：2
- 2013年
- 尿液常规检测通常由尿液物理性状检测、尿液化学成分检测和尿液有形成分检测3个部分组成。随着检验医学技术的发展,尿液有形成分自动化分析已成为尿常规检测的重要组成部分,但由于尿液标本的复杂性和现有技术的局限性,目前临床实验室使用的全自动尿有形分析仪还都属于筛选仪器,不能够完全替代显微镜镜检[1]。
- 代瑛张喆李岩李斌张惠中
- 关键词：尿常规检测假阴性分析血尿尿液有形成分显微镜镜检
- 人B7-H3基因的克隆及其重组蛋白在毕赤酵母中的表达和纯化被引量：1
- 2017年
- 目的:克隆人B7-H3(CD276)基因的完全编码区序列,在毕赤酵母中表达B7-H3重组蛋白并纯化。方法:应用RT-PCR从人肺癌A549细胞中克隆B7-H3基因的完全编码区序列并在3'端加入6×His标签基因,克隆于毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建表达质粒pPIC9K/B7-H3,以该质粒转染酵母菌株GS115,在含有不同浓度遗传霉素(G418)的YPD平板上进行筛选,然后挑取单克隆进行PCR鉴定,甲醇诱导表达鉴定结果为阳性的酵母重组子,表达产物通过离子交换柱纯化后经SDS-PAGE电泳和Western Blot进行检测。结果:应用RT-PCR从人肺癌A549细胞中获得约1500bp、与目的基因大小相符的条带,且测序正确;构建的酵母表达质粒pPIC9K/B7-H3表达框正确无误;阳性酵母重组子表达产物经6×His标签纯化后,SDS-PAGE电泳显示在70k D处有与预期大小相符的蛋白条带,Western Blot显示该蛋白可分别与抗6×His单克隆抗体及抗人B7-H3抗体呈特异性反应。结论:成功克隆了人B7-H3基因的完全编码区序列,在毕赤酵母中表达并进一步纯化,为B7-H3在肿瘤发生、发展中的作用及机制研究奠定了基础。
- 张喆代瑛王希和婷董轲张惠中
- 关键词：B7-H3毕赤酵母蛋白表达
- 肾综合征出血热患者血清Cys-C测定临床意义被引量：7
- 2011年
- 目的:研究胱抑素C(Cys-C)在肾综合征出血热(HFRS)患者各病期的变化及其临床意义。方法:测定23例HFRS患者各病期血清肌酐(Cr)、尿素(Urea)、胱抑素C(Cys-C)的含量,采用47例发热患者(排除肾脏疾病)及30例健康体检者为对照组,使用SPSS10.0统计学软件进行分析。结果:Urea、Cr在HFRS患者各病期均显著增高,以低血压休克期、少尿期、多尿期增高最为明显,但三期间互无显著性差异。Cys-C在HFRS患者各病期均显著增高,以低血压休克期最为明显,发热期与恢复期之间、少尿期与多尿期之间无显著差异。在恢复期,Urea仍有43.5%的患者高于正常对照组,Cr为69.5%,而Cys-C为82.6%。结论:与传统肾功能指标血清肌酐(Cr)、尿素(Urea)相比,血清胱抑素C(Cys-C)测定在肾综合征出血热各病期的变化更明显,恢复期下降的最慢,是肾综合征出血热患者肾功能变化更敏感的标志物。
- 代瑛沈建军张喆张惠中
- 关键词：尿素
- 心衰及高血压患者检测血清NT-proBNP水平的临床意义被引量：7
- 2012年
- 目的:探讨血清N末端脑钠肽(NT-proBNP)水平在高血压和心衰中的临床意义。方法:采用电化学发光免疫试验(ECLIA)进行血清NT-proBNP检测,统计学方法采用SPSS软件,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果:心衰组、高血压组血清NT-proB-NP水平与正常对照组之间均有显著差异,心衰组血清NT-proBNP 1864.03±3714.90(ng/L)、高血压组血清NT-proBNP 3061.87±7339.43(ng/L),均P<0.05;心衰组、高血压组男女血清NT-proBNP无显著性差异;心功能Ⅱ～Ⅳ级患者组各组间血清NT-proBNP均有显著性差异(F=83.95,P<0.05)。结论:血清NT-proBNP检测可用于评价患者的心功能状态,在临床诊断与疗效观察有非常重要的意义。
- 张喆代瑛张惠中
- 关键词：利钠肽
- 联合应用尿液干化学法及尿沉渣仪检测尿液管型分析被引量：4
- 2014年
- 目的利用不同方法检测该院就诊患者尿液管型及蛋白,探讨全自动尿沉渣分析仪、尿液干化学分析仪及尿沉渣镜检法的异同及互补性。方法对499份随机尿液标本,用UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测管型定量、尿液干化学分析仪检测蛋白定性及尿沉渣镜检法检测尿液管型。结果 UF-1000i全自动尿沉渣分析仪与尿液干化学分析仪存在不同程度的假阳性与假阴性,说明尿沉渣显微镜检查法检测管型是不可替代的。结论先用尿沉渣分析仪与尿液干化学法结合进行初检,再用尿沉渣镜检法复检,可最大程度减少尿液管型的漏检。
- 代瑛张喆刘昕阳李岩李斌张惠中
- 关键词：尿分析显微镜检查
