张宜乾
- 作品数：26 被引量：63H指数：5
- 供职机构：徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种兔紫绀型心脏病动物模型的建立被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨建立兔紫绀型心脏病动物模型的方法。方法 将新西兰大白兔主肺动脉与左心耳侧侧吻合 ,形成右向左分流的紫绀型心脏病动物模型 ,紫绀组、对照组均于术后第 1周、第 4周抽取外周动脉血进行血气分析和血常规检查。结果 紫绀组与对照组比较 ,术后第 1周pH值、二氧化碳分压 (PCO2 )、血红蛋白 (Hb)、血细胞比容 (Hct)无显著差异 (P >0 .0 5) ,而氧分压 (PO2 )及氧饱合度 (SaO2 )明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;术后第 4周紫绀组Hb、Hct、PO2 及SaO2 与对照组比较有显著差异 (P <0 .0 1) ,pH值与PCO2 2组比较无显著差异 (P >0 .0 5)。结论 将新西兰大白兔的主肺动脉与左心耳吻合 ,能产生持久而稳定的低氧状态 ,与临床上紫绀型心脏病的病理生理相接近 ,是一种稳定。
- 陈德海张宜乾董红燕张中明
- 关键词：紫绀型心脏病动物模型主肺动脉左心耳
- 兔高动力性肺动脉高压模型的建立被引量：5
- 2006年
- 目的:研究通过幼兔长时间体-肺循环分流,建立高动力性肺动脉高压模型方法的可行性。方法:将1月龄幼兔正中开胸,行左颈总动脉与主肺动脉吻合,形成持续左向右分流。3个月后通过彩超证实吻合血管通畅性,并测定其肺动脉收缩压(PASP)、肺动脉舒张压(PADP)、平均压(MPAP),观测肺小动脉病理变化、管壁厚度指数(TI)、面积指数(AI)。结果:分流组3个月后,21只形成肺动脉高压。分流血管阻断前、后PASP、PADP、mPAP明显高于对照组(P<0.05)。肺组织病理检查示肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄,与对照组比,TI和AI明显增加(P<0.05)。结论:幼兔经体-肺循环分流手术3个月后,可形成与临床先心病病理生理相接近的高动力性肺动脉高压。该模型稳定、可靠、经济。
- 王伟张宜乾吴树明
- 前列腺素E_1减轻未成熟心肌缺血/再灌注损伤的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨前列腺素E1(PGE1)对未成熟心肌缺血/再灌注损伤后血管内皮细胞的保护作用机理。方法24只幼兔随机分为3组,每组8只。Ⅰ组为正常对照组,Ⅱ组为缺血/再灌注损伤组,Ⅲ组为给药组(缺血前静脉注射前列地尔10μg/kg)。建立在体心肌缺血/再灌注损伤模型,Maclab/8s多功能生理仪监测左心室血流动力学变化,电镜观察心肌血管内皮细胞的超微结构变化。结果 再灌注60 min后,Ⅲ组左室发展压(LVDP)恢复率及左室压上升及下降最大速率(±dp/dtmax)恢复率(74.5％±13.6％,83.2％±15.3％)显著高于Ⅱ组(42.4％±12.3％,34.8％±11.5％),P<0.01;Ⅱ组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性升高,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性下降;与Ⅱ组比较,Ⅲ组eNOS活性明显升高而iNOS活性变化无显著差异。电镜观察:Ⅱ组血管内皮细胞水肿明显,基底膜不完整,Ⅲ组内皮细胞轻度水肿,损伤轻。结论 PGE1能够提高eNOS活性,通过一氧化氮途径保护未成熟心肌血管内皮细胞的完整性,减轻未成熟心肌缺血/再灌注的损伤。
- 薛涛张宜乾
- 关键词：未成熟心肌前列腺素E1NOS活性PGE
- 低氧反应元件对缺血心肌转染人血管内皮生长因子165基因表达的调控作用被引量：2
- 2008年
- 目的观察低氧反应元件（HRE）对低氧、复氧心肌细胞及缺血心肌转染人血管内皮生长因子165（hVEGF165）基因表达的调控作用。方法分离新生SD大鼠心肌细胞，采用不同氧条件进行培养；建立猪心肌缺血-复灌动物模型，将在HEK293T细胞包装后获得的rAVV-9HRE-hVEGF165病毒分别转染心肌细胞及动物缺血心肌。取培养心肌细胞及培养液，另取缺血区心肌组织，采用细胞免疫荧光法、酶联免疫吸附试验（ELISA）及Western blot方法分别测定hVEGF砌蛋白表达；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定hVEGF165 mRNA表达；Ⅷ因子染色，计数缺血心肌新生血管变化。结果病毒转染率为87％；心肌细胞A、B及E组培养液中hVEGF165蛋白含量显著升高（P〈0．01），细胞免疫荧光hVEGF165蛋白染色呈阳性；RT-PCR检测显示，心肌细胞A、B及E组可见484bp目的条带；在动物整体水平，与转基因缺血组比较，转基因复灌组hVEGF165 mRNA及蛋白表达显著减弱（P〈0．01），心肌毛细血管密度亦减少。结论HRE作为氧敏感基因调控开关能有效地调控缺血心肌转染hVEGF165基因的表达。
- 董红燕姜波张中明王伟张宜乾徐夏红
- 关键词：低氧反应元件血管内皮生长因子心肌基因表达
- 血红素氧化酶-1对紫绀型兔心脏复氧及缺血再灌注损伤的保护作用被引量：6
- 2005年
- 张中明陈德海董红燕张宜乾
- 关键词：血红素氧化酶-1缺血再灌注损伤紫绀型心脏活性改变
- 低氧反应元件(HRE)对缺氧、复氧条件下心肌细胞转染hVEGF165基因表达的调控作用
- 目的:观测缺氧、复氧条件下心肌细胞转染pAAV-HRE9-VEGF后的基因表达情况,研究低氧反应元件(hypoxic response elements,HRE)作为氧条件基因表达开关,对心肌细胞转染VEGF165 质粒...
- 张宜乾张中明闫英群董红燕
- 文献传递
- 氧相关HRE启动子控制下表达hVEGF_(165)基因重组2型腺相关病毒的获得及鉴定
- 2007年
- 目的包装及鉴定低氧反应元件(HRE)启动子控制下缺氧诱导目的基因hVEGF165基因表达的2型重组腺相关病毒。方法磷酸钙三质粒共转染方法将pAAV-HRE9-VEGF165、pAAV-Rep/cap、pHelper质粒转染HEK293T细胞,制备2型重组腺病毒相关病毒(rAAV2)。分离培养S-D大鼠心肌细胞,转染rAAV,细胞固定后做免疫细胞荧光染色,检测细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF165)蛋白的表达。结果pAAV-HRE9-VEGF165质粒经测序鉴定,结果与NCBI GenBank公布的人VEGF165cDNA核苷酸序列(AB021221)完全一致,含HRE启动子及目的基因hVEGF165的2型重组非复制型腺相关病毒包装成功,可感染原代培养的大鼠心肌细胞,缺氧可诱导VEGF165蛋白表达。结论成功包装并鉴定了rAAV-HRE9-hVEGF165载体,可有效转染心肌细胞,VEGF165基因的适时表达,为缺血性心肌疾病的“分子搭桥”治疗提供了更可能的安全性。
- 张宜乾张中明闫英群董红燕
- 关键词：重组腺相关病毒血管内皮细胞生长因子低氧反应元件
- 外源性HGF基因转染对肺动脉高压兔肺血流灌注及肺动脉压力的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨外源性肝细胞生长因子(HGF)基因转染高动力性肺动脉高压家兔后促进侧支肺血管生成、改善肺血流灌注、降低肺动脉压力的可行性。方法:将肺动脉高压兔随机分为对照组、空病毒组和HGF基因转染组;HGF基因转染组经气管内滴入法转染Ad-HGF,对照组和空病毒组分别气管内滴入同体积PBS液和Ade-no-Null;4周后,通过MacLab/8s多功能生理仪行血流动力学检测,通过抗FⅧ+α-SMA抗体免疫荧光双标检测肺小动脉密度、FITC-lectin灌注+抗α-SMA荧光双标记了解肺血管灌注情况。结果:气管内给药4周后,HGF基因治疗组含平滑肌细胞的小动脉密度较肺动脉高压对照组和空病毒组(12.5±2.7)/mm2明显增多(P<0.05);HGF组肺血流灌注获得有效改善,而肺动脉高压对照组和空病毒转染组肺血管仍处于狭窄甚至闭塞状态;HGF治疗组肺动脉平均压明显低于肺动脉高压对照组和空病毒转染组(P<0.05)。结论:肺动脉高压模型动物经气管滴入法转染外源性HGF,可以促进肺侧支血管生成,增加肺灌注并有效降低肺动脉压力。
- 王伟张芳谢悦张宜乾吴树明
- 关键词：肝细胞生长因子血管新生肺动脉高压
- 袖状肺叶切除术联合肺动脉成形术后护理
- 2007年
- 夏广梅樊桂莲王伟张宜乾
- 关键词：肺动脉成形术术后护理外科治疗原则支气管开口肿瘤侵犯
- 低氧反应元件调控下h-VEGF_(165)基因表达及其蛋白产物的延迟消失被引量：6
- 2006年
- 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)转基因可促进心肌缺血区血管生成,改善心脏功能,然而长期高水平表达又会引起诸多副作用。为调控VEGF表达,在启动子区加入低氧反应元件(hypoxic response element．HRE)作为调控开关,研究氧环境对VEGF基因mRNA及蛋白产物表达的影响。重组腺相关病毒(recombinant adeno-associ- ated virus,rAAV)作为载体(rAAV-HRE-h-VEGF_(165)),转染离体培养大鼠心肌细胞,在常氧/缺氧(氧浓度1%)/缺氧复氧条件下进行培养,用酶联免疫特异性测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测培养液h-VEGF_(165)蛋白浓度,细胞免疫荧光染色观测细胞内h-VEGF_(165)蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT- PCR)方法检测细胞h-VEGF_(165)mRNA表达。结果显示：未转染组、常氧培养组均无h-VEGF_(165)mRNA及其蛋白表达：缺氧培养组h-VEGF_(165)mRNA及蛋白均表达；缺氧复氧4h组的h-VEGF(165)mRNA消失,培养液中h-VEGF_(165)蛋白减少,细胞内h-VEGF_(165)蛋白存在：缺氧复氧8h及12h组的h-VEGF_(165)mRNA消失,培养液和细胞内h-VEGF_(165)蛋白均消失。研究表明,在HRE调控下,缺氧可促使h-VEGF_(165)基因表达,复氧后,h-VEGF_(165)mRNA表达停止,蛋白产物延迟消失。
- 张宜乾张中明闫英群董红燕
- 关键词：血管内皮生长因子低氧反应元件心肌细胞
