张朝良
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：国家杂交水稻工程技术研究中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 野生稻基因组抗性基因富集文库的构建被引量：2
- 2008年
- 通过集成候选抗性基因克隆技术和磁珠富集文库技术以及可转化基因组文库技术,提出了基于野生稻基因组富集文库克隆野生稻新抗性基因的策略。包括构建野生稻可转化基因组文库,利用RecA重组蛋白介导生物素标记的探针对文库进行磁珠富集,构建野生稻基因富集文库,然后对富集文库的克隆进行鉴定分析,包括点杂交和克隆末端测序分析,最后对富集文库的阳性克隆进行全序列测定和功能验证。按照上述方法,构建了东乡普通野生稻和小粒野生稻可转化基因组文库,库容量分别达到1.58×105和2.68×105个克隆,进而构建了东乡野生稻基因组候选抗性基因富集文库,单克隆总数1 152个,对富集文库的菌落原位杂交筛选获得12个阳性克隆,对其中5个阳性克隆全序列测定结果表明,4个阳性克隆含有已克隆抗性基因的保守序列,证实构建候选抗性基因富集文库克隆野生稻新抗性基因的策略是可行的。
- 曹孟良李磊韩小霞田志坚邢俊杰李强崔玲玲张朝良李玲龙罗秀娟杨志刚李丁谢灵灵陶小平罗泽宇唐丽
- 关键词：野生稻富集文库新基因克隆
- 携带大片段BIBAC克隆在不同农杆菌中的遗传稳定性研究被引量：1
- 2006年
- 大片段克隆在农杆菌中的稳定性是利用可转化大片段载体进行农杆菌介导遗传转化的关键问题.选用插入片段分子质量分别为150kb和50kb的BIBAC克隆,测定了在3种农杆菌AGL-1,EHA105和LBA4404中的遗传稳定性.从第1、3、5次继代培养的农杆菌中抽提的质粒及酶切结果显示,由于农杆菌背景质粒的干扰,难以判断质粒的降解与否.将农杆菌质粒再转化到大肠杆菌宿主中,发现来自农杆菌AGL-1和EHA105的质粒出现了明显的降解,片段变小,而来自农杆菌LBA4404的质粒没有变化.结果表明,大片段BIBAC质粒在不同农杆菌菌株中的稳定性不同,在农杆菌LBA4404中比较稳定,适合用于遗传转化.
- 邢俊杰杨剑梁铃李强李磊张朝良杲修杰曹筑荣曹孟良
- 关键词：根癌农杆菌
- 利用基因芯片技术分析水稻杂种优势的分子机理被引量：9
- 2005年
- 采用基因芯片技术,以超级杂交稻先锋组合两优培九及其亲本和分离世代F2代的优势集团和负优势集团为材料,尝试利用水稻表达谱芯片分析水稻杂种优势的分子机理。结果表明,以杂种F1(两优培九)为对照组,亲本9311、培矮64S以及F2代的优势集团、负优势集团的有效基因数分别为8304,8962,9956,10196个,差异表达基因数分别有447,122,617,388个,这些差异表达基因涉及代谢、发育、运输和蛋白修饰等多种功能,但其中大部分基因的功能尚未知。提出了差异表达基因的显性表达水平的概念。分析表明,具显性表达水平的差异表达基因的聚合与杂种优势表现无明显相关性。
- 邢俊杰成志伟杨剑李亦群梁铃殷绪明张朝良杨塞谢宝贵曹孟良
- 关键词：水稻基因芯片杂种优势分子机理
