张茜 作品数:3 被引量:5 H指数:1 供职机构: 复旦大学附属中山医院 更多>> 发文基金: 上海市青年科技启明星计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
乙醛脱氢酶2基因多态性与长寿的相关性研究 2007年 目的分析乙醛脱氢酶2(ALDH2)在长寿人群中的基因型分布频率,探索ALDH2基因多态性和长寿的关系。方法采集山东省章丘市397名90岁以上长寿老人(长寿组)和有非长寿家族史的161名60-75岁老人(对照组)进行流行病学调查研究。应用变性高效液相色谱技术检测研究对象的ALDH2基因型和等位基因的频率。结果长寿组ALDH2*1/ALDH2*1、ALDH2*1/ALDH2*2和ALDH2*2/ALDH2*2三种基因型频率分别为65.7%,32.7%,1.5%,对照组分别为82.0%, 16.8%,1.2%;长寿组ALDH2*1和ALDH2*2等位基因的频率分别为82.12%和17.88%,对照组分别为90.37%和9.63%。长寿组基因型和等位基因的频率与对照组比较均有显著性差异(P= 0.001)。ALDH2基因型在男、女性别中的分布差异无统计学意义。由于男女性别生理特点不同,随着年龄的增长,男性死亡率越来越高于女性,性别比降到3.84:1,差异无统计学意义(P= 0.076)。长寿组中有181名有家庭长寿史,且其同胞也长寿(P<0.001)。饮酒与ALDH2的基因型有关(P<0.05),但与长寿没有相关性。长寿组的体重指数较对照组低(P<0.01)。长寿组的结婚年龄和生育第一胎年龄较对照组早,而绝经年龄较对照组晚(P<0.01)。根据不同的地理环境、饮食习惯等因素,将该市划为4个地区,发现在不同地区,基因型的分布不同(P<0.001)。LogistiC Regression多因素分析的结果显示,地域差异与长寿相关(P<0.01),基因型亦与长寿相关(P<0.05)。结论ALDH2基因多态性与长寿现象有关联。长寿的原因是多方面的,不但与遗传因素有关,而且与个人、家庭、社会、经济、环境等非遗传因素有着密切关系。推测ALDH2作为一种候选基因,与环境等非遗传因素相互作用,通过调节机体对疾病的反应性而影响寿命,而并非直接地控制人类的最大寿限。 弭守玲 孙爱军 邹云增 王克强 张茜 俞佳艳 葛均波关键词:基因多态性 乙醛脱氢酶 非遗传因素 结婚年龄 老年大鼠心肌线粒体的蛋白质组学研究及差异蛋白的功能分析 2007年 目的建立并优化心肌线粒体蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术平台;筛查心肌线粒体中与衰老相关的蛋白质。为保证差异蛋白初筛结果的可信及下游分析的确定性,对差异蛋白进行再验证,并探讨其生物学功能。方法清洁级雄性SD大鼠随机分为新生组(2d)、成年组(10周)、老年组(12月),提取心肌线粒体,抽提全蛋白质行2-DE,对样品制备、上样量、电泳参数、不同固定方式、不同染色方法、不同离液剂等相关技术进行了优化。应用MALDI-TOF-MS鉴定图像分析出的差异蛋白点,同时进行了心肌组织ATP含量的检测。应用Western blot,RT-PCR检测不同发育阶段心肌线粒体中差异蛋白在蛋白、mRNA水平的表达情况。通过构建腺病毒载体,使用含有差异基因的腺病毒液将差异基因导入MRC-5细胞中,并获得表达,通过检测衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色、ROS和细胞周期等指标观察差异蛋白对MRC-5细胞衰老的影响。结果45%乙醇、5%乙酸的固定液对蛋白质固定效果最好;胶体考染和快速银染都是较理想的染色方法;含9M尿素的离液剂所得蛋白点最多;构建了心肌线粒体高分辨率和重复性的双向凝胶电泳图谱。图像分析示凝胶有1100个蛋白点,84个心肌线粒体蛋白表达发生改变,质谱鉴定了43个差异点。其中乙醛脱氢酶2(ALDH2)在老年组大鼠心肌线粒体中表达较成年组下调。差异蛋白多和呼吸链功能,能量代谢,物质运输和应激反应有关。新生组心肌组织ATP含量最低(15.49±1.33)μg ATP/g心肌,老年组心肌组织ATP含量较成年组下降((41.48±2.99)比(59.64±2.68)μg ATP/g心肌, (P<0.01)。能量代谢的生化检测进一步证实了蛋白质组学的结果。Western blot,RT-PCR证实ALDH2在老年组大鼠心肌线粒体中低表达。与对照组细胞相比, ALDH2基因导入后,MRC-5细胞的SA-β-gal染色阳性率下降,ROS水平较对照组下降。细� 弭守玲 孙爱军 邹云增 王克强 俞佳艳 张茜 葛均波关键词:心肌线粒体 差异蛋白 老年大鼠 细胞衰老 双向凝胶电泳 肌组织 一个扩张型心肌病伴房室传导阻滞家系SCN5A基因的突变研究 被引量:5 2009年 目的研究一个扩张型心肌病伴房室传导阻滞家系中心脏钠离子通道基因(voltagegated sodium channel type V,SCN5A)的遗传突变或多态位点。方法应用聚合酶链反应结合DNA直接测序技术对该家系的23位直系成员进行SCN5A基因编码区全部28个外显子的检测;对于新发现的变异位点筛查133名无血缘关系的正常人作为对照。结果在该家系中共检测到4个遗传变异,分别为c.87G>A(A29A),c.731T>C(I244T),c.3578G>A(R1193Q)和c.5457T>C(D1819D)。其中c.731T>C(I244T)为新发现的遗传变异,位于第7外显子,碱基的变异导致氨基酸第244位由苏氨酸代替异亮氨酸。家系中有4名成员携带I244T,但是133名健康对照者中未发现该变异。结论在一个扩张型心肌病伴房室传导阻滞家系中发现了SCN5A基因的新遗传变异。 张茜 孙爱军 范铮 娄小燕 王时俊 张真中 王克强 邹云增 葛均波关键词:扩张型心肌病 房室传导阻滞 基因突变