张雪
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 缺氧对人视网膜色素上皮细胞G蛋白信号转导调节子5表达的影响及其可能机制
- 2011年
- 目的探讨缺氧环境下人视网膜色素上皮（RPE）细胞中G蛋白信号转导调节子5（RGS5）表达的可能机制。方法实验研究。在正常培养的人RPE细胞培养基中加入终浓度为200／μmol／L的CoCl：建立细胞化学缺氧模型。按缺氧时间分为0、1、3、6、12和24h6组，观察RGS5和血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化；另选取12和24h作观察点，按处理因素分为缺氧对照组和VEGF抑制剂Bevacizumab处理组，Bevacizumab包括25、100和250肛咖l3种浓度，观察特异性抑制VEGF表达对RGS5表达产生的影响。应用免疫荧光染色法、Western blot和RT-PCR分别检测RGS5及其mRNA和VEGF蛋白及其mRNA的表达。采用Student’s t检验进行统计学分析。结果正常条件下，RGS5主要在人RPE细胞胞浆中表达。与VEGF存在相同表达区域。随着缺氧时间的延长，RPE细胞中RGS5蛋白及其mRNA表达逐渐上调，24h时达高峰（0．932±0．104，t=3．106，P=-0．01l；0．742±0．083，t=2．852，P=-0．017）；VEGF蛋白及其mRNA表达12h达高峰（1．022±0．141，t=4．144，P=0．002；0．491_＋0．063，t=5．707，P〈0．01），24h时有所下降，但仍高于无缺氧的RPE细胞（0．942±0．125，t=3．306，P=0．008；0．425±0．080，t=3．239，P=0．011）。浓度为100和250μg／ml的Bevacizumab有效抑制VEGF蛋白（￡=2．794，P=0．019；t=3．396，P=0．007）和其mRNA（t=2．823，P=0．018；t=9．584，P〈0．01）表达后，RGS5蛋白（t=2．953，P=0．014；t=2．913，P=0．015）和其mRNA（t=3．009，P=-O．013；t=4．243，P=-0．002）表达也随之受到抑制。结论缺氧条件下人RPE细胞RGS5表达上调，并与VEGF表达具有时相关系；抑制VEGF表达后，RGS5表达随之降低。提示RGS5位于VEGF信号通路下游，可能参与缺血缺氧性RPE相关眼病发生的调控。
- 叶子王雨生张雪
- 关键词：脉络膜新生血管化血管内皮生长因子A调节子色素上皮
- 缺氧诱导体外培养人视网膜色素上皮细胞中Toll样受体4的表达
- 2010年
- 目的:了解缺氧对人视网膜色素上皮(retinal pigmentepithelium,RPE)细胞Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)表达的影响。方法:采用200μmol/L CoCl2处理RPE细胞建立化学缺氧模型,以未处理细胞作对照,在缺氧处理后2,4,8,12和24h用免疫荧光法观察TLR4在细胞中的定位,用RT-PCR和Western blot检测细胞中TLR4表达水平。结果:共聚焦显微镜观察到正常对照组RPE细胞胞质内有微弱的TLR4荧光表达,缺氧后胞质内荧光表达明显增强,缺氧12h荧光强度达最强。RT-PCR和Western blot结果分别提示随缺氧时间延长,RPE细胞中TLR4mRNA和蛋白表达增强水平升高,缺氧至12h表达高峰最强(P<0.05),24h表达开始下降,各组差异有统计学意义。结论:缺氧可诱导RPE细胞中TLR4表达增强。
- 张雪王雨生叶子马可
- 关键词：TOLL样受体4缺氧视网膜色素上皮细胞
