彭寨玉
- 作品数：10 被引量：31H指数：3
- 供职机构：中山大学中山医学院病原生物学部更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫新基因精氨酸酶的扩增及序列分析被引量：3
- 2004年
- 目的 获取并真核克隆日本血吸虫新基因精氨酸酶全长cDNA。方法 对本实验室曾获得精氨酸酶基因利用生物信息学进行分析 ,发现其 5’端尚缺一段序列 ;根据已知序列设计引物 ,用 5’端单巢式PCR从尾蚴文库中扩增 ,以获得精氨酸酶基因完整的阅读框 (ORF) ;用生物信息学技术对获得的精氨酸酶编码基因进行结构与功能的分析 ;并将新基因的完整编码阅读框克隆入真核表达载体pCDNA3 1。结果 用 5’端单巢式PCR从尾蚴文库中获得了精氨酸酶 5’端所缺序列 ,得到其完整的ORF ,其ORF长 10 95bp ,编码 36 4个氨基酸。利用生物信息学技术鉴定其为日本血吸虫精氨酸酶的完整cDNA序列。重组质粒经双酶切DCR及测序鉴定证明日本血吸虫精氨酸酶真核表达质粒构建成功。结论 成功获得、识别、扩增并克隆日本血吸虫精氨酸酶编码基因的全长cDNA。
- 李孜余新炳吴忠道徐劲彭寨玉田春林赵霞
- 关键词：日本血吸虫中国大陆株精氨酸酶克隆
- 日本血吸虫肺期童虫收集方法的实验研究被引量：5
- 2005年
- 目的建立一种收集纯净肺期童虫的方法。方法用日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠,分别于感染后第1、2、3、4、5、6、7、10、12、14、21天解剖,从皮肤、肺脏、肠系膜静脉及肝门静脉处收集童虫。结果肺期童虫出现的高峰期为感染后第3天,获得最佳收获肺期童虫的时间,建立了回收大量纯净童虫的方法。
- 孟玮吴忠道余新炳彭寨玉阮志燕袁竹青
- 关键词：日本血吸虫
- 日本血吸虫精氨酸酶，其编码核酸及其应用
- 本发明公开了一种编码日本血吸虫精氨酸酶的新的基因，基因编码的多肽，多肽的抗体。本发明还公开了此多肽用于筛选日本血吸虫精氨酸酶的抑制剂，多核苷酸作为引物或者作为探针的应用，尤其公开了此多肽与多核苷酸作为诊断试剂盒、疫苗与药...
- 余新炳吴忠道李孜彭寨玉胡旭初
- 文献传递
- 日本血吸虫酪蛋白激酶Ⅱβ亚基的序列分析被引量：2
- 2003年
- 目的 发现并克隆日本血吸虫新基因。方法 对已获得的日本血吸虫表达序列标签 (EST)进行同源性分析 ,识别血吸虫新基因 ;根据EST设计引物 ,用 3′RACE从mRNA中扩增获得新基因全长 ,用生物信息学技术对获得的编码基因进行结构与功能分析 ,将新基因的完整编码阅读框克隆入原核表达载体 pGEX -4T -1。 结果 用 3′RACE获得一个EST的 3′端所缺序列 ,得到完整编码阅读框 ,其开放阅读框 (ORF) 654bp ,编码 2 17个氨基酸。利用生物信息学技术确定其为日本血吸虫酪蛋白激酶Ⅱβ亚单位的编码基因。重组质粒经双酶切及测序鉴定 ,证明日本血吸虫CKⅡβ原核表达质粒构建成功。 结论 扩增并成功克隆日本血吸虫酪蛋白激酶Ⅱβ亚单位编码基因的全长cDNA 。
- 彭寨玉余新炳吴忠道徐劲吴德李孜
- 关键词：日本血吸虫大陆株克隆
- 华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶基因的扩增、克隆和表达(英文)被引量：1
- 2004年
- 华支睾吸虫病严重危害着人们的身体健康 ,研制快速诊断试剂盒对于华支睾吸虫病的防治显得非常重要。目前 ,市场上销售的快速诊断试剂盒 ,其诊断抗原主要来自华支睾吸虫成虫的粗抗原 ,抗原敏感性高 ,特异性却不高 ,所以寻找并生产基因工程重组抗原有着非常重要的意义。半胱氨酸蛋白酶是一类含有半胱氨酸残基的蛋白水解酶 ,多种寄生虫都能产生或分泌半胱氨酸蛋白酶 ,它对寄生虫的生存、发育以及在寄生虫与宿主的相互关系上均有着极其重要的作用。越来越多的科研工作者开始重视它的免疫诊断价值 ,本文研究的目的是为华支睾吸虫快速诊断试剂盒寻找基因工程重组抗原。我们根据已知华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶基因序列设计一对引物 ,用文库构建试剂盒提取总RNA ,并反转录成cDNA ,以cDNA为模板 ,通过PCR技术从cDNA中扩增出目的基因。PCR产物通过测序鉴定 ,用工具酶BamHI和XholI同时消化目的基因和pGEX - 4T - 1原核表达载体 ,消化后的产物用连接酶连接 ,构建成 pGEX - 4T - 1-CP重组体 ,并将其转入Jm10 9大肠杆菌中。用PCR初步筛选阳性克隆 ,共获得阳性克隆 8个 ,再用双酶切和测序进一步鉴定初步筛选的阳性克隆。挑取阳性克隆 ,37℃条件下用IPTG诱导重组体表达 ,表达产物通过SDS -PAGE电泳鉴定。通过上述实验 。
- 吴德余新炳吴忠道徐劲陈守义胡旭初彭寨玉何东苟
- 关键词：华支睾吸虫扩增克隆
- 日本血吸虫新基因Sj Dad1的DNA免疫动物保护性实验研究被引量：8
- 2002年
- 目的 观察日本血吸虫未知基因SjDad1的DNA免疫保护动物实验效果 ,探讨其作为疫苗候选分子的可能性。方法 构建SjDad1的真核表达载体 pEGFP -N3 -SjDad1,两次质粒DNA免疫BALB/c小鼠后给予小鼠日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,设置生理盐水对照组 (NS)和pEGFP -N3 对照组 ,攻击感染后 4 2天处死小鼠 ,计算减虫率和减卵率。结果 双酶切和PCR反应以及测序结果证实重组真核表达载体 pEGFP -N3 -SjDad1构建成功 ,DNA免疫动物的保护实验证明 pEGFP -N3 -SjDad1与生理盐水组相比对小鼠没有显著的减虫作用 (P >0 0 5 ) ,减卵效果具有显著性意义 (P <0 0 1) ,减卵率是6 5 74 %。结论 日本血吸虫 pEGFP -N3 -SjDad1有抗血吸虫生殖作用 ,具有疫苗研究开发价值。
- 李焱余新炳吴忠道孟玮陈慧红彭寨玉
- 关键词：日本血吸虫DNA免疫动物实验免疫保护
- Sj Dad1反义核酸抗日本血吸虫感染的实验研究被引量：1
- 2001年
- 目的 进一步鉴定已获得的日本血吸虫新基因 Ｓｊ Ｄａｄ１的功能。方法 构建Ｓｊ Ｄａｄ１反义（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ）核酸载体ＰＥＧＦＰ－Ｎ３－Ｓｊ Ｄａｄ１和正义（ｓｅｎｓｅ）核酸载体 ｐＥＧＦＰ－Ｎ３－Ｓｊ Ｄｅｄ１．ＢＡＬＢ／ｃ小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第 ３天，通过小鼠尾静脉分别注射ＰＥＧＦＰ－Ｎ３－Ｓｊ Ｄａｄ１（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ）、ｐＥＧＦＰ－Ｎ３－Ｓｊ Ｄａｄｌ（ｓｅｎｓｅ）、空载体和生理盐水。４５ｄ后解剖实验小鼠进行保护性效果评价。结果 在ＰＥＧＦＰ－Ｎ３－Ｓｊ Ｄａｄ１（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ）组、ｐＥＧＦＰ－Ｎ３－Ｓｊ Ｄａｄｌ（ｓｅｎｓｅ）组以及ｐＥＧＦＰ－Ｎ３组小鼠肺部冰冻切片检查发现在童虫周围有绿色荧光出现，而在生理盐水组则无此现象。但各实验组保护性效果无统计学差异（Ｐ＞ ０．０５）。结论Ｓｊ Ｄａｄ１反义核酸无明显的抗日本血吸虫感染的效果，尚需寻找其它方法对 Ｓｊ Ｄａｄ１的疫苗候选基因价值作进一步的鉴定。
- 李焱吴忠道郑焕钦曹爱莲孟玮彭寨玉余新炳
- 关键词：日本血吸虫反义RNA抗感染动物实验
- 日本血吸虫亲环素A和乳酸脱氢酶编码基因的克隆及序列分析被引量：11
- 2003年
- 目的 识别和克隆日本血吸虫新基因。方法 对本实验室获得的EST进行同源性分析 ,识别血吸虫新基因 ;根据EST设计引物 ,用锚着PCR法从cDNA文库中扩增出新基因全长cDNA ,并将其克隆入原核表达载体 pGEX - 4T - 1,用生物信息学技术对获得的编码基因进行结构与功能的分析。结果 EST同源性分析得到一个完整编码基因 ,开放阅读框(ORF) 4 95bp ,编码 16 4个氨基酸 ;锚着PCR法获得另一EST的 3’端所缺序列 ,得到完整编码阅读框 ,其ORF 999bp ,编码 332个氨基酸。利用生物信息学技术确定它们分别为日本血吸虫亲环素A(CyPA)和乳酸脱氢酶 (LDH)的编码基因。重组质粒经双酶切及测序鉴定证明日本血吸虫CyPA和LDH原核表达质粒构建成功。 结论 克隆到日本血吸虫亲环素A和乳酸脱氢酶编码基因的全长cDNA 。
- 彭寨玉吴忠道徐劲余新炳
- 关键词：日本血吸虫亲环素A乳酸脱氢酶编码基因克隆
- 日本血吸虫新基因CyPA、LDH和CKⅡβ亚基的发现及其结构与功能的初步研究
- 目的:运用生物信息学技术对该实验室所获得的EST进行分析,发现新基因和可能为潜在药物靶标、候选抗原分子或具诊断潜力的EST.根据这些EST序列信息,从文库或mRNA中扩增未知片段,获得全长基因.用生物信息学方法对全长基因...
- 彭寨玉
- 关键词：日本血吸虫亲环素ADNA免疫
- 文献传递
- 血吸虫基因组研究进展被引量：1
- 2001年
- 20 0 0年 3月 30日至 4月 1日在美国Smith学院 (SmithCollege ,Northampton ,Connecticut,USA .)召开了WHO/UNDP/WorldBank血吸虫基因组网络会议。会议总结了上一年血吸虫基因组取得的进展 ,讨论并解决遇到的问题 ,确定未来的发展方向并制定了下一年度的工作计划。本文节译了其工作报告内容 ,供有关研究人员参考。
- 彭寨玉吴忠道余新炳
- 关键词：血吸虫基因组功能基因组
