李焱
- 作品数：30 被引量：75H指数：6
- 供职机构：中山医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用表达序列标签（EST）法发现日本血吸虫新基因
- ＜正＞目的:寻找日本血吸虫新基因,充实血吸虫基因组计划的研究.方法:随机挑选日本血吸虫（中国江西株）成虫cDNA文库克隆,培养后提取噬菌体DNA作模板,进行PCR反应扩增,将扩增产物部分测序产生表达序列标签（EST）,并...
- 李焱余新炳吴忠道李晖婷郑亦男周俊梅
- 关键词：日本血吸虫成虫
- 文献传递
- 艾滋病病人中的几种机会致病原感染:念珠菌病、肺孢子虫病、隐孢子虫病、弓形虫病被引量：4
- 1999年
- 约80％的艾滋病病人死于感染而不是人类免疫缺陷病毒(HIV)。大多数感染是由机会致病原引起的。本文介绍了4种重要致病原:白色念珠菌、卡氏肺孢子虫、微小隐孢子虫和刚地弓形虫。
- 李焱
- 关键词：艾滋病念珠菌病肺孢子虫病
- 日本血吸虫26ku谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆及分析被引量：2
- 2000年
- 【目的】扩增日本血吸虫 2 6ku谷胱甘肽硫 转移酶 (Sj2 6GST)基因片段 ,构建其重组原核载体 ,以研制SjGST重组克隆。【方法】根据已知基因序列设计一对引物 ,运用RT PCR技术扩增Sj2 6GST目的基因cDNA片段 ,将其克隆到 pBlue script(KS)质粒中 ,并经酶切、PCR和测序鉴定。【结果】获得GST pBluescript(KS)重组克隆。【结论】本实验获得Sj2 6GST重组克隆 ,为进一步研制基因工程蛋白疫苗作准备。
- 李焱余新炳吴忠道冯新港罗树红徐劲周俊梅郑亦男
- 关键词：日本血吸虫基因扩增
- 日本血吸虫基因表达序列标签的获得和分析被引量：11
- 2001年
- 为寻找日本血吸虫新基因并进行血吸虫基因功能研究 ,随机挑选日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫 c DNA文库克隆 ,培养后提取噬菌体 DNA作模板 ,进行 PCR反应扩增 ,将扩增产物部分测序产生表达序列标签 (EST) ,并将 EST输入Gen Bank和 EMBL,运用分子生物学软件比较其同源性 ,推导其蛋白序列并进行分析 ,结果得到 75个未曾登录的新基因 ,并对其中一些基因进行功能推测研究 ,认为表达序列标签是快速有效寻找基因的方法 。
- 李焱余新炳吴忠道李晖婷包俊英卞国武
- 关键词：日本血吸虫成虫CDNA文库表达序列标签基因功能分析基因表达
- 日本血吸虫大陆株脂肪酸结合蛋白SjFABPc编码区基因的体外扩增及克隆被引量：8
- 1999年
- 目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白（SjFABPc）抗原的编码区基因序列，将其克隆到真核表达质位pcDNA3中，为进一步对其进行核酸疫苗研究奠定基础。方法特定寡核苷酸引物的设计与合成；异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离日本血吸虫成虫RNA，RT－PCR扩增目的基因；分子克隆常规操作将扩增产物亚克隆至中间载体pUC18中，然后走向克隆到真核表达载体pcDNA3中。结果RT－PCR特异性扩增出SjFABPc编码区基因序列，其片段大小为440hp；经酶切、PCR鉴定表明所构建的质粒pUC－SjFABPc和pCD－SjFABPc中含有所扩增的基因序列。结论RT－PCR扩增的SjFABPc抗原编码区基因序列与预期长度相村合；成功地构建了含目的基因的真核表达质粒pCD－SjFABPc。从而，为进一步对其进行DNA免疫系列研究工作奠定了基础。
- 冯新港余新炳李焱刘彦文
- 关键词：日本血吸虫脂肪酸结合蛋白RT-PCR
- 序列标签法寻找日本血吸虫新基因被引量：3
- 2002年
- 目的 寻找日本血吸虫新的疫苗候选分子 ,通过构建基因的反义核酸表达载体进行基因性质功能研究。 方法 运用表达序列标签法寻找并获得日本血吸虫新基因 ,对未知基因进行功能分析 ,并构建反义真核表达载体。 结果 获得表达序列标签 JAYL0 2 30的全长 c DNA序列 ,其推导氨基酸序列与人类和猪等生物的抗凋亡因子 1具有同源性 ,将之反向克隆入真核表达载体 p EGFP- N3中。 结论 表达序列标签法与生物信息技术结合有利于寻找新基因 。
- 李焱余新炳吴忠道李晖婷包俊英邵筱
- 关键词：日本血吸虫表达序列标签反义核酸克隆
- 日本血吸虫卵黄铁蛋白基因免疫在不同处理小鼠诱导免疫应答的观察被引量：2
- 2001年
- 【目的】研究日本血吸虫卵黄铁蛋白DNA免疫在两种处理小鼠诱导的免疫应答及其保护作用。【方法】免疫小鼠分两大组进行 :实验Ⅰ组小鼠有预感染 ,实验Ⅱ组小鼠没有预感染。将构建的携带日本血吸虫卵黄铁蛋白基因的重组质粒pLXSN Fer1经左后腿肌肉注射BALB/c小鼠 ,共免疫 2次 ,间隔 2周。末次免疫后 5周以血吸虫尾蚴攻击感染 ,6周后剖杀小鼠 ,计数成虫负荷及肝组织虫卵数。设空载质粒免疫组为对照组。【结果】免疫小鼠后在实验Ⅰ组主要诱生IgG1和IgG3,在实验Ⅱ组主要诱生IgG2a和IgG2b ;实验组产生较高水平的IgA和IFN γ应答。pLXSN Fer1免疫小鼠获得一定程度的减虫率 (2 6 47% ,34 0 8% )和减卵率 (4 0 0 2 % ,36 83% )。【结论】日本血吸虫卵黄铁蛋白在两种不同处理小鼠均能产生一定程度的保护作用 ,有可能成为有价值的疫苗候选分子 。
- 周俊梅余新炳吴忠道郑亦男李焱李晖婷
- 关键词：日本血吸虫免疫应答DNA免疫
- 人体寄生虫基因组计划的研究进展被引量：3
- 2000年
- 人体寄生虫基因组计划属人类基因组计划中模式生物基因组研究内容之一 ,也是本学科发展的前沿。本文综述了恶性疟原虫、美洲锥虫、非洲锥虫、利什曼原虫、血吸虫和丝虫基因组计划的研究进展 ,并就其研究意义及如何开展我国人体寄生虫基因组研究进行了讨论。
- 吴忠道李焱余新炳
- 关键词：恶性疟原虫锥虫原虫
- 日本血吸虫(中国大陆株)若干酶类基因的发现被引量：8
- 2001年
- 目的 运用表达序列标签 (EST)技术 ,从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)cDNA文库中分离、鉴定出有潜在应用价值的血吸虫基因序列。方法 应用EST方法 ,从日本血吸虫cDNA文库中随机挑选出单个重组克隆 ,PCR扩增出插入片段 ,并进行PCR产物直接测序 ;将获得的序列资料与EBI和GenBank进行BLASTn和BLASTx同源性检索 ,对可能的酶类基因序列进行分析。结论 采用EST策略 ,可获得日本血吸虫 (中国大陆株 )若干酶类基因序列EST ,为进一步的cDNA全长扩增和克隆奠定基础。
- 李晖婷余新炳吴忠道李焱包俊英邵筱
- 关键词：日本血吸虫中国大陆株CDNA文库表达序列标签
- 日本血吸虫精氨酸酶的cDNA序列分析被引量：5
- 2001年
- 目的 对获得的日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)精氨酸酶基因cDNA序列进行二级结构预测。方法 采用生物信息学等技术对获得的Sj精氨酸酶编码基因序列进行开放读框 (ORF)的寻找 ,编码氨基酸的推导 ,蛋白质同源性比较以及二级结构的预测。结果 获得的cDNA序列为 10 6 1bp ,含有一个 840bp的阅读框 ,编码 2 79个氨基酸 ,属精氨酸酶家族 ,与国际蛋白质库中的酵母、蛙、人和大鼠精氨酸酶序列的同源性分别为 44 % ,5 0 % ,5 1% ,5 3%和 5 4%。Sj精氨酸酶氨基酸序列的 β转角、亲水性、平均可塑性和无规则卷曲的分布主要出现在N -末端AA残基 30～ 5 0 ,70～ 90和 180～ 2 0 0等 3个区域 ,是潜在的抗原表位。结论 推测Sj精氨酸氨基酸酶具有较好的抗原性。
- 吴忠道李焱徐劲余新炳
- 关键词：日本血吸虫精氨酸酶CDNA序列抗原表位生物信息学
