徐腊梅
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 果蝇心脏发育标记基因lbe的多克隆抗体制备
- 2012年
- lbe是已经证明的心脏标记基因。为了深入研究lbe在心脏发育中的功能,需要获得lbe蛋白并制备其抗体。首先提取野生型成体果蝇的总RNA,反转录获得其cDNA文库,通过PCR克隆出lbe编码区序列,将其连接到pET-28a原核表达载体上。经酶切及测序鉴定后,质粒构建成功。将重组质粒(pET-28a-lbe)转化大肠杆菌菌株Rosseta,用IPTG诱导表达出融合蛋白,经Ni-IDA凝胶柱纯化后,最后将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备lbe多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体的效价和特异性。结果显示获得了lbe原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗lbe多克隆抗体,为lbe功能的进一步研究奠定了基础。
- 徐腊梅朱玲刘腾吴秀山邓云袁婺洲
- 关键词：果蝇融合蛋白多克隆抗体
- 果蝇心脏候选基因CG3295敲除品系的鉴定
- 本实验室利用生物信息学并结合分子生物学技术,克隆出了果蝇心脏发育候选基因CG3295。生物信息学分析结果表明：果蝇基因CG3295位于2号染色体的5789-5789区段,且只有一个外显子,具有一个转录本,其cDNA全长是...
- 徐腊梅
- 关键词：基因敲除WESTERNBLOT
- 文献传递
- 果蝇Mef2基因多克隆抗体的制备及检测
- 2012年
- 为了在果蝇模型中进一步研究Mef2基因的功能,制备了Mef2多克隆抗体.以果蝇cDNA文库为模板,PCR扩增出亲水性和特异性均好的果蝇Mef2基因片段,将其克隆入pET-28a原核表达载体,然后将重组质粒转化入大肠杆菌菌株Rossetea,用IPTG诱导表达融合蛋白.融合蛋白先经Ni-IDA凝胶柱纯化,再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,然后用不同浓度的抗体分别进行Western-blot实验检测抗体效价.所得结果显示获得了较高效价的果蝇Mef2多克隆抗体.
- 朱玲徐腊梅盛立翔吴秀山莫小阳
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 利用果蝇心力衰竭模型鉴定wg信号途径成员pygo在心力衰竭发生中的功能
- 袁婺洲吴秀山唐旻刘丹刘腾徐腊梅蔡哲彦曾群Rolf BodmerKaren Ocorr
- 利用果蝇心力衰竭模型鉴定wg信号途径成员pygo在心力衰竭发生中的功能
- 心力衰竭简称心衰,是指由于心脏吸收血液或泵出血液功能障碍,以致心输出量减少、不足以适应全身组织代谢需要的一种病理过程。美国心脏病学会(ACC)/美国心脏协会(AHA)将其定义为由于心脏结构或功能性疾病导致心室充盈和射血能...
- 袁婺洲唐旻刘丹刘腾徐腊梅蔡哲彦曾群Rolf BodmerKaren Ocorr吴秀山
- 文献传递
- 果蝇心脏发育标记基因Hand多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 制备果蝇心脏标记基因Hand抗体对研究果蝇心脏发育具有重要意义。从果蝇体内提取出总RNA,反转录得到果蝇的cDNA,将其作为模板PCR得到Hand基因部分片段,将片段连接到pET-28a上,构建重组质粒pET-28a-Hand,将重组质粒转化rosetta受体菌,IPTG诱导表达,表达产物经镍柱纯化,SDS-PAGE电泳分析,结果表明Hand基因在大肠杆菌中成功表达,表达的Hand融合蛋白分子量大约为24 kD,经镍柱纯化后获得了高纯度可溶性的Hand蛋白。
- 刘腾徐腊梅江志钢袁婺洲吴秀山
- 关键词：HAND果蝇原核表达
