李晔
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 癸氧喹酯溶液对靶动物鸡的安全性试验被引量：7
- 2009年
- 为了评价癸氧喹酯溶液对靶动物鸡的安全性,选取100只健康的8日龄扬州AA肉鸡,随机分成5组,每组20只。各组试验鸡分别以0、推荐剂量(15 mg/kg)、3倍推荐剂量(45 mg/kg)、5倍推荐剂量(75 mg/kg)、10倍推荐剂量(150 mg/kg)的癸氧喹酯溶液连续饮水给药21 d,通过对一般临床症状、增重、饲料报酬、血液学和血液生化指标、病理组织学等观察和检测,结果表明:癸氧喹酯溶液毒性较小,在鸡体内耐受性高,至少以5倍推荐剂量饮水给药对靶动物鸡是安全的。
- 周玉武栾明娜徐福亮桂淦卜仕金王柄樟夏礼杰李晔陈秀云
- 关键词：安全性试验
- 日本血吸虫体表蛋白rSj29的保护性效果被引量：1
- 2009年
- 目的克隆表达日本血吸虫体表蛋白Sj29基因,分析其表达特性和免疫保护效果。方法根据日本血吸虫体表蛋白Sj29基因序列(GenBank登录号为AY814537)设计引物,PCR扩增目的基因,生物信息技术分析序列特性。将目的基因部分片段亚克隆到原核表达载体pET28c中,构建重组质粒pET28c-Sj29,将其转至大肠埃希菌后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,组氨酸(His)柱亲和层析法纯化重组蛋白;蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫原性。30只雌性BALB/c小鼠均分3组,实验组每鼠皮下多点注射重组蛋白rSj29共100μl(0.1mg/ml,用206佐剂配制)、佐剂对照组和空白(PBS)对照组,分别免疫3次,每次间隔2周。末次免疫后2周用血吸虫尾蚴攻击感染小鼠,每鼠40±2条,感染后第53天剖杀,收集虫体计算减虫率;取肝脏和粪便计算减卵率。ELISA法检测实验鼠血清特异性IgG抗体水平,免疫组织化学法检测rSj29蛋白在各期虫体的定位,荧光定量PCR法分析各期虫体及攻击感染后42d虫体Sj29基因表达水平。结果获得576bp的Sj29基因。重组蛋白的相对分子质量(Mr)为22900,以包涵体形式存在。Western blotting表明,重组蛋白可被免疫小鼠血清和感染日本血吸虫的小鼠血清识别。攻击感染后42d,小鼠体内Sj29基因转录水平分别为佐剂对照组和空白对照组虫体的9.1倍和51.8倍。实验组小鼠成虫数(15.4±5.9)、肝组织虫卵数(40143.3±2995.9)和粪便虫卵数(3803.9±110.9)与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示,免疫小鼠可产生高滴度(1∶32000)特异性IgG抗体。免疫组织化学结果表明,重组蛋白rSj29可在7、14d童虫,28、32d成虫和42d雄、雌虫的体表表达。荧光定量PCR结果表明,虫龄为32d的日本血吸虫成虫Sj29基因转录水平最高。结论重组蛋白rSj29有一定的免疫保护效果。
- 陈虹傅志强陈雷邱春辉付光伟李晔邵东华冯新港林矫矫
- 关键词：日本血吸虫荧光定量PCR免疫组化
- 日本血吸虫新基因Sjnanos的克隆、表达及免疫保护效果评估被引量：2
- 2010年
- 目的扩增、表达日本血吸虫Sjnanos编码基因并评估其重组蛋白诱导的免疫保护效果。方法从42d龄的日本血吸虫成虫中扩增了一个日本血吸虫性别差异表达的基因,GenBank登录号为AY814948,并对其进行生物信息学分析。将该基因亚克隆入原核表达载体pET28a,转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用纯化的重组蛋白免疫小鼠,ELISA检测其血清特异性抗体效价,蛋白印迹分析检测其抗原性,以看家基因NADH为内参,应用荧光定量PCR技术分析该基因在血吸虫各个阶段的表达状况。结果同源性分析表明,该基因为日本血吸虫的一个新基因,其编码序列的开放阅读框(ORF)为525bp,编码174个氨基酸,理论相对分子量为19.9,PI为8.2。荧光定量PCR技术分析显示该基因在7d、13d、18d、23d、32d、42d虫体均有表达,但在18d和13d虫体的表达量明显高于其他天数的虫体,在雄虫的表达量高于雌虫。成功构建了该基因的重组表达质粒pET28a(+)-Sjnanos,并在大肠埃希菌中获得表达,Western-blot分析表明重组蛋白具有较好的免疫原性,动物免疫保护试验获得了31.4%的减虫率和53.8%的肝脏减卵率。结论获得日本血吸虫新的抗原基因Sjnanos,该基因的重组蛋白在小鼠中诱导了部分免疫保护作用。
- 王艳郭凡吉彭金彪李晔洪炀陈实傅志强石耀军林矫矫
- 关键词：日本血吸虫抗原性免疫保护
- 日本血吸虫蛋白酶体α2亚基基因的克隆、表达及功能分析被引量：2
- 2010年
- 26S蛋白酶体是一种能够降解大多数内源性蛋白的多亚基复合物,它的蛋白降解作用能够影响细胞周期、转录控制和其他一些重要的细胞进程。本实验利用PCR技术从日本血吸虫18d童虫中首次扩增到蛋白酶体α2亚基基因(GenBank Accession No.AY813725),序列分析表明该基因的开放阅读框(ORF)含708bp,编码235个氨基酸,理论分子量25.84kDa。同源性分析结果显示,该基因为日本血吸虫蛋白酶体α2亚基,命名为SjPSMA2。实时定量PCR分析显示该基因在7d、13d、18d、23d、32d和42d虫体中都有表达,7d和23d虫体表达量低于其他几个时期。构建了该基因的原核表达质粒pET28a(+)-SjPSMA2,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别,并且能检测到天然状态下该蛋白的存在。应用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,诱导产生了较高的特异性抗体水平及12.33%的减虫率和35.23%的肝脏减卵率。SjPSMA2基因及其表达产物的获得,为探索蛋白酶体在血吸虫生长发育中的作用提供了重要基础。
- 洪炀韩宏晓彭金彪李晔石耀军傅志强刘金明李祥瑞林矫矫
- 关键词：日本血吸虫克隆免疫保护
- 江苏部分地区鹅球虫种类调查被引量：5
- 2008年
- 目的了解江苏地区鹅球虫感染情况。方法在扬州、南京、常州、无锡不同地区选择37个鹅群,群体采样法采集粪样,饱和食盐水收集卵囊,显微镜下观察,进行虫种鉴定。结果共查37个鹅群,球虫阳性27个群,占78.38%。共检到1科3属8种球虫,其中艾美耳属(Eimeria)6种:鹅艾美耳球虫(E.anseris)、有毒艾美耳球虫(E.nocens)、金黄艾美耳球虫(E.fulva)、赫尔曼艾美耳球虫(E.hermani)、法立兰艾美耳球虫(E.farri)、多斑艾美耳球虫(E.stigmosa);泰泽属(Tyzzeria)1种:稍小泰泽球虫(T.parvula);等孢属(Isospora)1种:鹅等孢球虫(I.anseris)。稍小泰泽球虫、赫尔曼艾美耳球虫、多斑艾美耳球虫为优势种,其感染率分别为86.21%、75.86%、58.62%;天鹅主要感染稍小泰泽球虫,其感染率为60%。结论江苏地区鹅球虫感染率较高,需要加强综合防治工作。
- 李晔陶建平
- 关键词：感染率
- 东方田鼠肝脏裂解物筛选日本血吸虫噬菌体展示抗原的免疫预防效果被引量：2
- 2010年
- 目的寻找东方田鼠抗日本血吸虫抗性靶基因。方法选取利用东方田鼠肝脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示文库获得的4个阳性噬菌体克隆免疫小鼠,评估观察其对小鼠日本血吸虫病的免疫预防效果。结果与噬菌体对照组、佐剂对照组和PBS对照组相比,1号克隆免疫组分别获得了28.23%、31.12%、29.86%的减虫率和51.73%、48.02%、55.58%的肝脏减卵率;4号克隆免疫组分别获得了24.28%、27.32%、26.00%的减虫率和45.52%、41.13%、49.86%的肝脏减卵率。结论 1号克隆展示的SJCHGC06713蛋白以及4号克隆展示的SJCHGC068068蛋白作为抗血吸虫疫苗值得进一步研究。
- 王素娟刘金明邢荣鹤李晔郭凡吉王艳石耀军陆珂林矫矫
- 关键词：日本血吸虫免疫东方田鼠
- 日本血吸虫重组抗原SjPGAM-SjEnol的保护性免疫效果评价被引量：7
- 2010年
- 目的构建日本血吸虫重组表达质粒pET32a-SjPGAM-SjEnol并在大肠埃希菌（E.coli BL21）中表达,观察重组抗原在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法利用生物信息学技术筛选SjPGAM和SjEnol富含人源（HLA）Ⅱ类、鼠源（H2-d）Ⅱ细胞结合表位且与宿主同源性较小的肽段,将对应编码的核苷酸序列进行拼接,构建重组质粒pET32a（＋）-SjPGAM-SjEnol,并在E.coli BL21中表达。用蛋白质印迹（Western blotting）分析该重组抗原的抗原性。用小鼠实验评估重组抗原的免疫保护效果,即将55只雄性BALB/c小鼠均分成5组,其中3个试验组分别用重组抗原pET32a-SjPGAM-SjEnol（A组）、pET28a-SjPGAM（B组）、pET28a-SjEnol（C组）（各27μg）与206佐剂混合后免疫小鼠,每次间隔2周,共免疫3次。同时设佐剂对照组（D组）和空白对照组（E组）。末次免疫后2周,每鼠经腹部皮肤分别感染日本血吸虫尾蚴40±2条,感染后6周,经肝门静脉灌注法收集成虫和检测每克肝虫卵数（EPG）,计算减虫率和肝脏减卵率。各组小鼠分别于免疫前、各次免疫后1周尾部取血和剖杀时收集血清,应用ELISA检测血清特异性IgG抗体水平。结果确定SjPGAM的96~147、SjEnol的233~312肽段为重组片段。PCR扩增出一条含编码这两个肽段的核苷酸序列的重组DNA序列,大小447bp。获得的重组蛋白pET32a-SjPGAM-SjEnol相对分子质量（Mr）为33000。Westernblotting结果显示,该重组蛋白可被日本血吸虫成虫抗原免疫兔血清识别,具有良好的抗原性。小鼠免疫实验结果显示,与空白组相比,A组获得39.7%的减虫率和64.9%的肝减卵率,其减虫率与B组（18.5%）、C组（14.7%）比较,差异有统计学意义（均P〈0.05）;肝减卵率与B组（47.5%）、C组（30.5%）比较,差异也有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。ELISA结果显示,第3次免疫后A组的特异性IgG抗体达到较高水平（2.372±0.268）,与D组（0.490±0.138）�
- 郭凡吉王艳李晔彭金彪洪炀邱春辉陈实傅志强石耀军林矫矫
- 关键词：日本血吸虫烯醇酶多表位疫苗免疫保护
- 日本血吸虫蛋白酶体α5亚基重组抗原及其表达、纯化与应用
- 本发明提供了日本血吸虫蛋白酶体α5亚基(SjPSM A5)重组抗原及其表达、纯化。本发明提供的日本血吸虫蛋白酶体α5亚基(SjPSM A5)重组抗原，经抗原性检测与免疫预防实验，结果显示与PBS对照组相比，重组蛋白PSM...
- 林矫矫洪炀傅志强孙安国王欣之彭金彪韩宏晓李晔刘金明石耀军孙帅
- 文献传递
