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李海涛

作品数:5 被引量:3H指数:1
供职机构:广州医学院第一附属医院更多>>
发文基金:广州市科技支撑计划项目澳门特别行政区科学技术发展基金广州市医药卫生科技项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇期刊文章
  • 2篇会议论文
  • 1篇专利

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇病毒
  • 2篇疫苗
  • 2篇结构蛋白
  • 2篇呼吸道合胞病...
  • 2篇合胞病毒
  • 2篇非结构蛋白
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇药物
  • 1篇药物制备
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇原核表达
  • 1篇试剂
  • 1篇双价疫苗
  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇外源蛋白
  • 1篇细胞
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇流感

机构

  • 3篇广州医学院第...
  • 2篇广州呼吸疾病...
  • 2篇澳门科技大学
  • 2篇广州呼研所医...
  • 1篇广州医学院

作者

  • 5篇李海涛
  • 3篇田新贵
  • 3篇周荣
  • 2篇伍时冠
  • 2篇杨子峰
  • 2篇关文达
  • 2篇秦笙
  • 2篇李潇
  • 1篇黄群娣
  • 1篇钟南山
  • 1篇周荣
  • 1篇郑兆广
  • 1篇高文娟
  • 1篇王玉涛
  • 1篇李潇
  • 1篇刘文宽
  • 1篇刘昆

传媒

  • 1篇病毒学报
  • 1篇热带医学杂志
  • 1篇中华医学会2...

年份

  • 1篇2012
  • 3篇2011
  • 1篇2010
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
稳定表达呼吸道合胞病毒非结构蛋白NS1细胞的构建及其生物特性研究被引量:3
2011年
获得稳定表达RSV病毒NS1基因的HEp-2-NS1细胞株并对其生物学特性进行初步研究。采用RT-PCR方法从RSV病毒中获得NS1全长基因,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,重组载体与包装质粒PIK通过磷酸钙共沉淀法转染包装细胞293FT细胞,产生的逆转录病毒颗粒感染HEp-2细胞,经嘌呤霉素筛选后得到稳定表达细胞株,用QPCR、细胞病变染色法、RT-PCR和间接免疫荧光法检测细胞中NS1 mRNA和蛋白表达情况。结果表明重组逆转录病毒载体pBABE-NS1经双酶切及测序鉴定正确;筛选获得5株阳性单克隆细胞株,QPCR结果显示HEp-2-NS1细胞有NS1基因扩增,其中d株的相对表达量是正常细胞对照组的8 483倍;在外源干扰素作用下,HEp-2-NS1细胞仍对VSV病毒保持敏感,细胞感染病毒48h后染色结果显示全部死亡;对第3代及第30代细胞的RT-PCR和间接免疫荧光法检测结果显示,导入的NS1基因在HEp-2细胞中不仅能转录成相应的mRNA而且能成功稳定地表达。成功构建了稳定表达RSV病毒非结构蛋白NS1的HEp-2-NS1改造细胞株,为建立适用于临床分离的转基因细胞提供良好的基础。
秦笙王玉涛杨子峰陈俏连关文达伍时冠刘文宽郑兆广李海涛周荣
关键词:呼吸道合胞病毒非结构蛋白细胞
呼吸道合胞病毒NS1基因原核表达及其免疫原性分析
2012年
目的原核表达呼吸道合胞病毒(RSV)非结构NS1蛋白,并对其免疫特性进行研究。方法采用PCR技术获得NS1基因,将其插入pET41a(+)载体上,导入大肠杆菌后诱导表达;利用GST亲和层析柱对诱导表达的NS1蛋白进行纯化,免疫动物制备抗体,Westernblot法鉴定抗体的特异性。结果重组质粒经酶切鉴定和DNA序列测序完全正确,经IPTG诱导后融合蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中得到高效表达,表达产物经超声破碎和GST亲和层析纯化获得重组蛋白,分子量约42000Mr,以抗NS1蛋白的多克隆抗体为一抗进行Westernblot检测,结果只有RSV感染细胞的样品在15000Mr处有特异性带显示,其他病毒感染的细胞和阴性对照没有相应条带。结论 NS1基因得到高效表达,免疫制备得到的抗体与RSV感染细胞有特异性反应,与其他常见呼吸道病毒感染细胞无交叉免疫反应。
刘昆陈俏连伍时冠潘思华李海涛杨子峰关文达秦笙
关键词:呼吸道合胞病毒非结构蛋白蛋白纯化
人3型腺病毒六邻体的可修饰位点及其应用
本发明提供了人3型腺病毒六邻体高变区中可修饰的氨基酸位点,该可修饰位点位于六邻体的高变区,具有SEQ ID NO:1-4所示序列中的至少一个氨基酸位点。这些氨基酸位点是分别位于人3型腺病毒六邻体的高变区1、2、5、7上。...
周荣李潇李海涛高文娟田新贵钟南山
文献传递
人3,4,7型三价重组腺病毒的构建
目的:研制人3,4,7型三价重组腺病毒的多价基因工程疫苗。方法:利用本实验室保存的重组pBR22-ADV3-EGFP质粒作为骨架,将生物信息学预测得到的ADV7和ADV4的中和表位,分批通过BJ5183体内同源重组的方法...
李潇周志超邱红玲唐妮田新贵李海涛周荣
关键词:腺病毒双价疫苗荧光定量
表达B型流感病毒NP蛋白的重组腺病毒构建及其特性研究
李海涛田新贵黄群娣李潇周荣
共1页<1>
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