李茜茜
- 作品数：21 被引量：25H指数：4
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 假单胞菌表达载体pYMB03的构建与性能分析被引量：4
- 2008年
- 恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)是具有强抗逆性能的环境优势菌,构建其质粒表达载体有着明显的应用潜力.将恶臭假单胞菌AB92019菌株中肽聚糖相关脂蛋白编码基因的启动子PoprL和质粒载体pTrcHis-B的多克隆位点片段插入到质粒载体pUCP18的EcoRI/HindIII位点,获得了重组载体pYMB03.用绿色荧光基因gfp作为标记进行外源蛋白表达的结果表明,该载体能分别在恶臭假单胞菌AB92019菌株和大肠杆菌DH5a菌株中,由启动子PoprL启动组成型表达GFP蛋白并使细胞产生可见荧光.经SDS-PAGE验证,所产生的GFP蛋白分别占细胞总蛋白的12.5%和5.0%.重组菌株YMB001中GFP表达量与菌体培养时间有关,在稳定期后期其相对荧光强度达到最大值(D600nm=1.0),但与培养温度未见相关性.对携带该载体的2株重组恶臭假单胞菌7次168h继代培养测定,载体pYMB03的稳定性均为100%.
- 叶婷姚陈李茜茜张红星李林
- 关键词：假单胞菌启动子
- 一种牛支原体MbovP701蛋白及其制备方法与应用
- 本发明涉及动物传染病防治技术领域，尤其涉及一种牛支原体MbovP701蛋白及其制备方法与应用。本发明的MbovP701蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，编码该蛋白的核苷酸如SEQIDNO：2所示。本发明的Mbov...
- 郭爱珍李茜茜郝智瑜朱习芳赵刚张慧陈颖钰胡长敏陈曦陈建国
- 文献传递
- 一种细胞共培养下牛支原体生长必需蛋白CDNPase
- 本发明属于动物传染病防制技术领域，具体涉及一种细胞共培养下牛支原体生长必需蛋白CDNPase。克隆得到牛支原体基因Mbov_0328，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；该基因编码的蛋白质为环二核苷酸磷酸二酯酶(C...
- 郭爱珍朱习芳董亚旗李茜茜陈颖钰胡长敏陈焕春
- 文献传递
- 细胞表面展示有机磷水解酶的恶臭假单胞菌工程菌的构建及全细胞酶活性分析被引量：10
- 2008年
- 利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)冰核基因的N-末端(inpn)作为锚定单元(anchoring mo-tif),通过与来自黄杆菌属(Flavobacteriumsp.)的有机磷水解酶基因opd构建融合基因inpn-opd,并连接于假单胞菌表达载体pYMBP,然后导入恶臭假单胞菌(P.putida)野生型菌株AB92019,获得了能在其细胞表面展示有机磷水解酶并具有全细胞酶催化活性的重组工程菌MMBL-opd。SDS-PAGE结果表明,融合基因能表达产生80 ku的蛋白质。重组菌MMBL-opd在无抗性LB固体培养基上能稳定生长,所携带的外源质粒的稳定性达到100%;在添加100μmol/L Co2+培养基上28℃培养48 h,表面展示的有机磷水解酶具有最高全细胞酶活性,为0.036 U/mg。用蛋白酶K消化处理重组菌表面蛋白可使其全细胞酶活降低92%。重组菌在PBS缓冲液中于4℃条件下保存30 d,仍能保持93%的全细胞酶活。
- 张红星李茜茜叶婷李维琳李林
- 关键词：有机磷水解酶细胞表面展示生物降解
- 一种牛支原体蛋白基因MbovGdpP及其应用
- 本发明属于动物传染病防制技术领域，具体涉及牛支原体蛋白基因MbovGdpP及其应用。Mbov_0276根据牛支原体HB0801基因组序列人工合成获得。针对大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0276基因进行了修饰：将牛...
- 郭爱珍朱习芳董亚旗李茜茜陈颖钰胡长敏陈焕春
- 文献传递
- 利用冰晶核蛋白构建细菌细胞表面展示体系及其应用研究
- 冰晶核蛋白/(Ice nucleation protein,简称为INP/)是一种分泌型表面蛋白质,存在于丁香假单胞菌、欧文氏菌等十余种革兰氏阴性菌中。近十年来,冰晶核蛋白作为细菌细胞表面展示系统的运载蛋白受到了广泛重视...
- 李茜茜
- 关键词：丁香假单胞菌恶臭假单胞菌细胞表面展示
- 文献传递
- 黏附能力降低的牛支原体基因及黏附蛋白
- 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及黏附能力降低的牛支原体基因及黏附蛋白。所述的蛋白基因Mbov_0503从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0503基因进行了修饰，将...
- 郭爱珍朱习芳董亚旗李茜茜陈颖钰胡长敏陈焕春
- 文献传递
- 黏附能力降低的牛支原体基因突变株及黏附蛋白
- 本发明属于动物传染病防治技术领域，涉及黏附能力降低的牛支原体基因突变株及黏附蛋白。蛋白基因Mbov_0503从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0503基因进行了修饰，将牛支...
- 郭爱珍朱习芳董亚旗李茜茜陈颖钰胡长敏陈焕春
- 文献传递
- 一种微生物细菌固定化方法
- 本发明涉及一种微生物细菌固定化方法，特别是一种利用壳聚糖为载体固定化菌体的方法，包括以下步骤：A、制备固定化载体；B、交联活化固定化载体；C、选取用于固定化的菌体；D、菌体固定化，最后获得经固定化的微生物细菌。本发明优点...
- 李林白志强汤浪王伟李茜茜叶婷
- 文献传递
- 细胞共培养下生长缺陷的牛支原体突变株及应用
- 本发明属于动物传染病防制技术领域，具体涉及细胞共培养下生长缺陷的牛支原体突变株及应用,从牛支原体基因突变体库中筛选得到一株牛支原体Mbov_0328基因缺失突变菌株T9.386，该基因编码环二核苷酸磷酸二酯酶。突变菌株与...
- 郭爱珍朱习芳董亚旗李茜茜陈颖钰胡长敏陈焕春
- 文献传递
